【原】組培中的污染及解決方法——安利一款賊好用的滅菌劑（殺孢劑）

賽思基因 2022-05-16

展開全文

Hi~做轉基因或者組培的艾瑞巴蒂~

您是否還在為組培過程中的孢子污染而撓頭呢?

微生物污染是組織培養(yǎng)中普遍存在的問題。目前研究主要集中在防治細菌污染方面, 對真菌污染較少顧及，而組培中的真菌污染卻是一個很棘手的問題。作為一家常年從事植物轉基因和組培的公司，應對真菌污染，我們有“大殺器”！

賽思滅菌劑（殺孢劑）是賽思基因實驗室自制的一款消毒劑，可以有效的消除組織培養(yǎng)中的細菌和真菌污染?，F(xiàn)為廣大科研工作者提供一批試用裝，如果好用，歡迎聯(lián)系小編進行采購~??

背景

植物組織培養(yǎng)是上世紀初開始，以植物生理學為基礎發(fā)展起來的一項植物繁殖技術。經(jīng)過近一個世紀的發(fā)展，這項技術已在科學研究和生產(chǎn)上得到廣泛應用，但它的技術環(huán)節(jié)還存在不少問題。微生物污染是組織培養(yǎng)中普遍存在的問題。在培養(yǎng)基中添加殺菌劑已成為防治污染的一種重要方法得到廣泛運用。但目前研究主要集中在防治細菌污染方面，對真菌污染較少顧及。程逸宇等研究表明：組培環(huán)境中存在大量真菌孢子, 常規(guī)方法很難避免真菌污染，且真菌污染有著爆發(fā)突然，感染面積大等特點，一旦爆發(fā)會導致全部材料報廢，對一些珍貴的材料來說是很嚴重的威脅。

常見的種子和外植體滅菌劑

常見的滅菌劑有：

①氯化汞（升汞）：殺菌效果很好，但是對身體有害。因此，如果您正在使用它，請務必小心謹慎。

②次氯酸鈉：是外植體表面滅菌最常用的試劑之一。但是有毒性容易刺激眼睛，呼吸系統(tǒng)和皮膚。

③次氯酸鈣：是一種無機化合物，化學式為Ca(ClO)2，常用于化工生產(chǎn)中的漂白過程，以其快速的起效和漂白的效果突出而在工業(yè)生產(chǎn)中占據(jù)重要作用。容易引起灼傷。該品粉塵對眼結膜及呼吸道有刺激性，可引起牙齒損害。皮膚接觸可引起中至重度皮膚損害。具刺激性。

④雙氧水：過氧化氫是一種較為理想的消毒劑，作用完畢只分解為水和氧氣，沒有殘留，能夠對管路和水體消毒，但缺點是不穩(wěn)定，效力受溫度、PH值、光照等因素影響，效果不太穩(wěn)定。

⑤乙醇：70-95% 范圍內(nèi)的乙醇濃度廣泛用于殺菌。然而，乙醇對植物也有毒，乙醇中的較長時間會損壞外植體。?

在用上述藥劑進行接種材料的消毒處理時，為了使殺菌劑濕潤整個組織，還可以在藥液中加入潤濕劑。如加入數(shù)滴0.1％的濕潤劑吐溫（Tween）80或吐溫20。有時還可以用磁力攪拌、超聲振動等方法使殺菌劑達到外植體表面，消毒徹底。

為了使植物材料消毒徹底，一般先用自來水沖洗10min，表明不光滑或長有絨毛難以洗凈的材料，要沖洗1-2h，并且用洗衣粉或洗潔精溶液洗滌，必要時用毛刷充分刷洗。

洗后的材料用濾紙吸干水分，然后浸泡于消毒藥劑，時間長短、濃度高低根據(jù)材料而定。一般宜選用兩種消毒劑交叉進行。例如先用70％酒精浸幾秒（有些材料可浸較長時間），再浸入10％次氯酸鈉溶液5-15min，隨之用無菌水沖洗3次以上。消毒滅菌的步驟根據(jù)材料試驗，取效果好、毒害小的一種。

不同殺菌劑的效果對比

消毒劑	濃度/%	處理時間/min	效果
次氯酸鈉	2	5-30	優(yōu)秀
次氯酸鈣	9-10	5-30	優(yōu)秀
漂白粉	飽和	5-30	優(yōu)秀
升汞	0.1-1	2-10	優(yōu)秀
酒精	70-75	0.2-2	優(yōu)秀
雙氧水	10-12	5-15	優(yōu)秀
溴水	1-2	2-10	優(yōu)秀
硝酸銀	1	5-30	良好
抗菌素	4-50mg/L	30-60	一般