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第二篇:通過得分就能判斷鑒定到種或鑒定到屬嗎?

 天際風(fēng)和日麗 2021-11-25
 第一篇:MALDI-TOF MS檢測(cè)的是蛋白嗎?(已發(fā)布,請(qǐng)?jiān)诒竟娞?hào)中尋找原文)
簡(jiǎn)介:已知的蛋白可以在MALDI-TOF質(zhì)譜上出峰,而未知樣品的MALDI-TOF質(zhì)譜峰不一定是蛋白峰,MALDI-TOF MS檢測(cè)微生物就是檢測(cè)未知樣本,因此MALDI-TOF MS檢測(cè)不一定是蛋白,更不是核糖體蛋白,是什么MALDI-TOF的技術(shù)做不到,僅知道是質(zhì)荷比。

第二篇:通過得分就能判斷鑒定到種或鑒定到屬嗎?

臨床微生物行業(yè)的圣經(jīng)級(jí)參考書CLSI M58,國(guó)內(nèi)多篇MALDI-TOF質(zhì)譜專家共識(shí)以及一些MALDI-TOF質(zhì)譜廠家的技術(shù)文件,一致認(rèn)為得分的高低可以判定鑒定到種水平或鑒定到屬水平或無(wú)法鑒定,要了解是否是真的,需要先知曉微生物質(zhì)譜建庫(kù)的模式,目前市面上流行的微生物建庫(kù)模式大概兩類:

第一:按照比對(duì)建庫(kù),不同來(lái)源的同一菌(比如世界各地或全國(guó)各地不同實(shí)驗(yàn)室的100株ECO),進(jìn)行質(zhì)譜圖采集(假設(shè)每一株菌采集20個(gè)峰圖,該種菌共計(jì)50株),再把所有峰圖(20*50=1000)疊加,后形成該種菌的標(biāo)準(zhǔn)譜圖或質(zhì)譜圖權(quán)重表,示例圖1,圖中形狀代表菌種,顏色代表不同來(lái)源的菌株,六角形這種菌數(shù)據(jù)庫(kù)譜圖是由10株不同來(lái)源六角形菌的譜圖擬合疊加而成。數(shù)據(jù)庫(kù)多少種菌就有多少個(gè)譜圖。

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數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì):一個(gè)未知峰圖與數(shù)據(jù)庫(kù)中每菌的峰圖進(jìn)行比較,得出與該種屬菌的匹配性(一般用百分?jǐn)?shù)表示),見圖2。

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第二:按照比對(duì)建庫(kù),一株菌采集不同多個(gè)峰圖(假設(shè)每一株菌采集20個(gè)峰圖),將這20個(gè)峰圖疊加形成該菌的峰圖,示例圖3,5株六角形菌譜圖都在數(shù)據(jù)庫(kù)里,只有1株四角形菌,數(shù)據(jù)有多少株菌,就有多少個(gè)譜圖。比如某廠家質(zhì)譜宣傳數(shù)據(jù)庫(kù)能鑒定4000種,10000株,即平均每種菌只有2.5個(gè)菌株,估計(jì)有3000種以上的菌只有1株菌。

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數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì):一個(gè)未知峰圖與數(shù)據(jù)庫(kù)中每株菌的峰圖進(jìn)行比較,得出與該株菌的匹配性(一般用數(shù)字表示,不同質(zhì)譜廠家表現(xiàn)形式各異),見圖4。一般提示前十名或前二十名菌株信息。

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綜上所述,不論哪一種比對(duì)算法,從得分上都不能確定鑒定到屬得分僅能顯示所測(cè)菌的峰圖與建數(shù)據(jù)庫(kù)時(shí)該種菌或該株菌的峰圖匹配性。

第一種按種比對(duì)建庫(kù)還能確定到種,第二種只能到株,如果到種還需要進(jìn)一步運(yùn)算。

第二種按株比對(duì)算法可能出現(xiàn):

(1)前十名都在規(guī)定的分?jǐn)?shù)以上,但出現(xiàn)不同種屬時(shí),需要對(duì)結(jié)果進(jìn)行復(fù)核測(cè)試。

(2)前十名都小于規(guī)定的分?jǐn)?shù),但出現(xiàn)同一種菌時(shí),其結(jié)果也可能是對(duì)的,只不過該菌譜圖與建庫(kù)菌的譜圖匹配性略低。


種比對(duì)分析法

株比對(duì)分析法

優(yōu)點(diǎn)

  • 從物種分類的角度上考慮,避免單個(gè)菌株的錯(cuò)誤導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤

  • 能夠得出更多的信息(需要數(shù)據(jù)庫(kù)支持),如耐藥信息、溯源等等

  • 建庫(kù)容易,一株菌也能建庫(kù)

缺點(diǎn)

  • 不能進(jìn)一步區(qū)分菌株間的差異

  • 建庫(kù)麻煩,需要考慮不同來(lái)源菌株的差異

  • 基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)的菌株信息必須正確

  • 所選菌株沒有代表性

  • 當(dāng)前流行的測(cè)序鑒定就是菌株分析法,所測(cè)序列與數(shù)據(jù)庫(kù)中某一株菌序列的匹配性

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