EDTA依賴的血小板假性減少必須重新采樣嗎？

開心100mm05xkw 2019-04-21

展開全文

抗凝劑依賴的血小板假性減少是指血小板在體外與血液抗凝劑作用后出現(xiàn)聚集，采用電阻抗法進行檢測時血小板計數(shù)假性減低的現(xiàn)象。該現(xiàn)象在不同種類抗凝劑中均會發(fā)生。日常工作中接觸最多的是乙二胺四乙酸依賴的血小板假性減少（Ethylenediaminetetraacetic acid-dependent pseudothrombocytopenia ， EDTA - PTCP）。及時發(fā)現(xiàn)和糾正這種假性減少對臨床明確診斷，減少不必要的醫(yī)療措施，減輕患者醫(yī)療花費和所受痛苦具有重要意義。在這個問題上，學(xué)者們曾提出了一系列解決方案如：更換抗凝劑、在抗凝血中加入卡那霉素、阿米卡星或氯化鈣與肝素混合液等[1-5]。但這些方法或是需要重新采樣，或需額外添加物質(zhì)后等待反應(yīng)進行，一定程度上影響了臨床工作效率。最近筆者在工作中又遇到一例EDTA-PTCP的患者，除了使用傳統(tǒng)方法外，我們嘗試使用另一方法解決該問題，與傳統(tǒng)方法相比也取得了較滿意的結(jié)果。

病史摘要

患者呂某，男性，63歲，因冠心病前來就診。

實驗室檢查

全血細胞計數(shù)（電阻抗法）結(jié)果如表1所示。

▼表1 電阻抗法全血細胞計數(shù)結(jié)果

血細胞計數(shù)發(fā)現(xiàn)血小板減少（55×10⁹/L），血小板直方圖尾部呈鋸齒狀，儀器報警信息提示“Platelet Clumps”，如圖1所示。觸發(fā)復(fù)檢規(guī)則，改用另一儀器復(fù)查（圖2），同時推片鏡檢（圖3）。

▲圖1 全血細胞計數(shù)結(jié)果

▲圖2 復(fù)查全血細胞計數(shù)結(jié)果

▲圖3 顯微鏡鏡檢（1000×）

復(fù)查時打開儀器血小板熒光染色通道，結(jié)果與首次的電阻抗法相仿（51×10⁹/L）。血小板直方圖尾部呈鋸齒狀，略有上翹，報警信息提示“Thrombocytopenia”、“PLT Clumps？”。

鏡檢見血涂片兩側(cè)邊緣及尾部存在大量血小板聚集，白細胞及紅細胞形態(tài)未見明顯異常。據(jù)此，推斷血小板聚集的原因可能為采樣不順或抗凝劑依賴的血小板假性減少。在尋找患者重新采樣的同時，我們試著在一臺考評儀器上使用CDR模式進行檢測，結(jié)果如圖4所示。血小板計數(shù)結(jié)果落在正常范圍（144×10⁹/L），血小板直方圖及報警信息與之前兩臺儀器相同。

▲圖4 全血細胞計數(shù)結(jié)果

重新采集EDTA-K₂抗凝及枸櫞酸鈉抗凝血，充分混勻后EDTA抗凝血分管，進行如下處理：

① 使用電阻抗法、血小板熒光染色及CDR模式對EDTA及枸櫞酸鈉抗凝血進行檢測并推片鏡檢。

② 在兩管EDTA抗凝血中分別加入阿米卡星（終濃度5mg/mL）、硫酸鎂（硫酸鎂與全血比例1:4），加入后即刻、20分鐘進行檢測。

重新采樣后的結(jié)果

重新采樣后電阻抗法、血小板熒光染色及CDR模式檢測結(jié)果如表2~表4所示，鏡檢結(jié)果如圖5、圖6所示。

▼表2 各儀器枸櫞酸鈉抗凝血小板檢測結(jié)果（×10⁹/L）

▼表3 不同時間各儀器EDTA抗凝血血小板檢測結(jié)果（×10⁹/L）

▼表4 加入阿米卡星、硫酸鎂后EDTA抗凝血血小板檢測結(jié)果（×10⁹/L）

▲圖5 EDTA抗凝血即刻推片鏡檢

▲圖6 枸櫞酸鈉抗凝血即刻推片鏡檢

案例分析

患者血常規(guī)顯示“血小板計數(shù)減少”，儀器報警提示血小板聚集，推片后鏡檢證實為血小板聚集，遂重新采集EDTA抗凝及枸櫞酸鈉抗凝管。采用電阻抗法，血小板熒光染色，CDR模式分別復(fù)檢。三種方法采用枸櫞酸鈉抗凝管檢測時血小板計數(shù)結(jié)果均正常，鏡下見血小板散在分布無聚集。EDTA抗凝管鏡下見血小板依舊聚集，排除抽血因素，該患者為EDTA-PTCP。

使用不同原理的儀器對EDTA抗凝血進行檢測，結(jié)果顯示相對于阻抗法和熒光染色，CDR模式的計數(shù)更接近枸櫞酸鈉抗凝結(jié)果。在2小時后CDR模式的計數(shù)結(jié)果依然處于正常范圍，與之相對的其他方法血小板計數(shù)結(jié)果均偏低。

既往研究表明阿米卡星及硫酸鎂對EDTA-PTCP均有一定解聚效果。分別添加兩種藥物，在即刻、20分鐘時檢測，結(jié)果顯示阿米卡星的解聚效果優(yōu)于硫酸鎂。相同處理方式下，CDR模式計數(shù)結(jié)果更接近枸櫞酸鈉抗凝結(jié)果。

總結(jié)

目前對EDTA-PTCP的解決辦法多是更換抗凝劑重新采血，給患者帶來額外痛苦且延長TAT時間。雖然可加入阿米卡星或硫酸鎂后重新檢測，但操作較為繁瑣，加藥量及檢測時間不易把握。若有更加快速直接的處理方式，將提高臨床檢驗的便利性。就本例而言，使用CDR模式(如邁瑞6800 plus)的檢測結(jié)果與枸櫞酸鈉抗凝血或加入阿米卡星解聚后的結(jié)果十分接近，顯示了較好的解聚效果。使用EDTA抗凝血未加解聚藥物的標本進行CDR復(fù)檢，也可獲得正常的血小板計數(shù)結(jié)果。

[1] Bizzaro N. EDTA-dependent pseudothrombocytopenia: a clinical and epidemiological study of 112 cases, with 10-year follow-up. [J] Am J Hematol 1995;50:103-9.

[2] Zhou X, Wu X, Deng W, Li J, Luo W. Amikacin can be added to blood to reduce the fall in platelet count. [J] Am J Clin Pathol 2011;136:646-52.

[3] Sakurai S, Shiojima I, Tanigawa T, Nakahara K. Aminoglycosides prevent and dissociate the aggregation of platelets in patients with EDTA-dependent pseudothrombocytopenia. [J] Br J Haematol 1997;99:817-23.

[4] Ahn HL, Jo YI, Choi YS, Lee JY, Lee HW, Kim SR, et al. EDTA-dependent pseudothrombocytopenia confirmed by supplementation of kanamycin; a case report. [J] Korean J Intern Med 2002;17:6-8.

[5] Chae H, Kim M, Lim J, Oh EJ, Kim Y, Han K. Novel method to dissociate platelet clumps in EDTA-dependent pseudothrombocytopenia based on the pathophysiological mechanism. [J] Clinical Chemistry and Laboratory Medicine 2012: 50, 1387–1391.

會議預(yù)告

（點擊圖片查看詳情）