在使用G418、潮霉素B或嘌呤霉素篩選穩(wěn)定細胞系細胞之前，需要先通過梯度實驗確定適合該類細胞的最佳藥物濃度。對于一些常見的細胞系，通?？梢栽谫Y料中找到推薦的藥物濃度。例如Hela細胞用400 μg/ml的G41或1 μg/ml的嘌呤霉素進行穩(wěn)定細胞株篩選。

用G418或潮霉素B，選用在5天左右出現(xiàn)細胞大批死亡，2周全部死亡的濃度作為篩選濃度。對于嘌呤霉素,通常采用在3-4天殺死全部細胞的濃度。不同批次的藥物活性有一定差異。因此在使用新批次藥物時，需要重新測定最佳濃度。

篩選抗生素的推薦使用濃度（μg/ml）

1、在加入篩選藥物前一天將細胞以50%密度接種到6孔板。第二天在培養(yǎng)基中按G418(0,50,1000,200,400,800μg/ml)或者嘌呤霉素（0,1,2.5,5,7.5,10μg/ml）加入。

2、用G418篩選處理5-10天。每2天觀察細胞一次。每4天跟換新的有抗生素的培養(yǎng)基（如果有必要可以更換得更勤）。直到得到最佳濃度。

3、用嘌呤霉素處理4-7天。每2天跟換新的有抗生素的培養(yǎng)基。