1 創(chuàng)建一個項目地址:http://genome./ 首先點擊My Data中的My Sessions進入頁面。 新建一個項目。 點擊新建的項目進入可視化的頁面,在圖片的下方點擊add custom tracks就是上傳自己的數(shù)據(jù)了。 也可以設(shè)置數(shù)據(jù)類型的物種,基因組和參考基因組的信息,參考基因組信息如果需要轉(zhuǎn)換,可以通過LiftOver來實現(xiàn)(hg19與hg38的相互轉(zhuǎn)換)。 1 數(shù)據(jù)的上傳瀏覽器支持bigBed, bigChain, bigGenePred, bigMaf, bigPsl, bigWig, barChart,bigBarChart, BAM, VCF, BED, BED detail, bedGraph, broadPeak, CRAM, GFF, GTF,MAF, narrowPeak, Personal Genome SNP, PSL, 或 WIG等文件格式的上傳,主要分為通過網(wǎng)頁直接提交和服務(wù)器的URL鏈接上傳。 由于數(shù)據(jù)類型較多,通過可以直接上傳的BED文件為例介紹: BED文件由3列必需的信息和9個額外可選擇的信息組成,三列必須信息就是:染色體,起始位置,終止位置。其他9個額外的信息如下: BED文件的第一行是對這個條目的設(shè)置,包括名字、描述和顏色等,Color的選擇按照RGB顏色的參數(shù)可以選擇不同的顏色。上傳BED文件的數(shù)據(jù)是不能體現(xiàn)出數(shù)據(jù)的變化、高低等現(xiàn)象,只能顯示數(shù)據(jù)的區(qū)域信息,因此需要更高級的設(shè)置,即設(shè)置區(qū)域的顏色來區(qū)別數(shù)據(jù)的大小等。這個功能就是BED文件的第9列itemRgb選項,需要注意的是,如果要使用第9列的信息則前面的幾列信息也要存在不能空缺。 保存后點擊go進行在基因組上的可視化,可以尋找感興趣區(qū)域的數(shù)據(jù),根據(jù)顏色的深淺判斷甲基化值的大小。 而最簡單的格式只需要前三列就能上傳查看,并且其他格式的數(shù)據(jù)也能很方面的轉(zhuǎn)換成BED格式進行上傳。 當(dāng)文件大小超過50M時,則不推薦通過網(wǎng)頁上傳數(shù)據(jù),這時候需要一個URL鏈接,通常是bigBed, bigWig, bigGenePred, BAM 和VCF格式的數(shù)據(jù),我們以bigWig格式為例。 bigWig是通過wig格式的文件轉(zhuǎn)換的二進制壓縮文件,而wig文件也是和BED文件類似的包含區(qū)域信息的文件,一般使用MACS峰值探測后可以產(chǎn)生wig格式的文件。wig格式是可以直接上傳的但超過50m就推薦轉(zhuǎn)換成bigWig文件上傳。轉(zhuǎn)換命令如下: wigToBigWig input.wig chrom.sizes myBigWig.bw(若出現(xiàn)超出染色體長度的錯誤,需編輯染色體信息使其長度增加) wigToBigWig程序下載地址:http://hgdownload.soe./admin/exe/linux.x86_64/wigToBigWig chrom.sizes染色體信息下載地址:http://hgdownload.soe./admin/exe/ 上傳的例子如下,需要在bigDataUrl后增加數(shù)據(jù)的在服務(wù)器中的鏈接。 wig和bigWig文件的優(yōu)勢在于可以體現(xiàn)出數(shù)據(jù)大小的變化和高低,例如組蛋白修飾的峰值等。 1 圖像的設(shè)置首先是最上方的設(shè)置,對圖中的區(qū)域進行放大和縮?。ɑ趬A基數(shù)目),下方的輸入框可以輸入具體基因組的位置(tab分隔)或一個條目的名字跳轉(zhuǎn)到該處,也可以點擊圖像左右拖拽進行微調(diào)。 圖中的每個track可以點擊左側(cè)灰色條框拖拽進行上下移動。 對于每一個上傳后的track在圖中都可以右鍵灰色條框設(shè)置其顯示效果。如果上傳的文件對每段區(qū)域有定義的名字,則會多出pack和squish的選項。 例如以瀏覽器中自帶的CpG島為例,選擇了pack后則會在每個CpG島前顯示其名字,這是比較合適顯示效果。用戶可以根據(jù)自己上傳的數(shù)據(jù)選擇不同的設(shè)置進行調(diào)整。 對于有峰值顯示的數(shù)據(jù),可以左鍵灰色條框設(shè)置其顯示的高度。
圖像下方的一行設(shè)置中tracksearch可以搜索感興趣的條目,manage custom tracks即是上傳文件,configure是設(shè)置圖像的寬度,resize是調(diào)整圖像的寬度和瀏覽器寬度一致。
關(guān)于最下方的設(shè)置,是瀏覽器自帶的基因組中的參考信息,可以對沒有幫助的進行隱藏,如果沒有顯示出感興趣的信息,可以使用track search進行搜索添加。
圖像的保存可以點擊上方的PDF/PS進行保存。
最后則是這個項目的保存,網(wǎng)頁中沒有保存的選項,因此需要重復(fù)項目創(chuàng)建的過程,在界面上方點擊My Data中的My Sessions,使用當(dāng)前項目的名字進行保存覆蓋即可。 小結(jié):本文僅提供了最簡單直接的可視化實現(xiàn)方法,更詳細的介紹在UCSC官網(wǎng):http://genome./FAQ/FAQformat.html#format1。Genome Browser的可視化更多的是方面自己對數(shù)據(jù)的理解,更直觀的查看識別出的差異區(qū)域是否顯著,或是感興趣的例如CpG島、啟動子等區(qū)域的信息,有助于更進一步的分析。 |
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