細細品讀，文末有彩蛋

Samsung藥業(yè)在藥物開發(fā)過程中，分析了有效期從2015年3月到2019年12月多個批次的Herceptin原研藥。結果意外的發(fā)現(xiàn)，從有效期為2018年8月的批次開始，Herceptin的質量參數(shù)出現(xiàn)了第一次偏移， Afucose%（無巖藻糖）比例從之初的8%左右降低至4.7%左右，隨之ADCC和FcγRIIIa也均減少了50%左右。隨后，從有效期為2019年6月的批次開始，Herceptin的質量參數(shù)出現(xiàn)了第二次偏移，HW%（高甘露糖）比例從2.0%提高到5.0%左右，Afucose%恢復到6.0%以上（仍與8.0%左右有差距），HW%和Afucose％的總和基本恢復到原來10%左右水平，這樣ADCC功能小有恢復，但仍然只是有效期為2018年8月之前的80-90%。此外，值得注意的是在這兩次的偏移中，Galactosylation％均降至20%左右，比2018年8月之前的40%減少了一半左右。

▲  多批次Herceptin質量概述

▲ 多批次Herceptin糖基化分布

▲  多批次Herceptin ADCC等生化功能

在兩次有關糖基化質量參數(shù)偏移過程中，電荷異質性的變化并不明顯。但值得注意的是，在有效期為2018年8月的批次之前，美國產(chǎn)的Hcerptin的酸性峰含量要高于歐洲產(chǎn)的。同時隨著第二次高甘露糖的質量偏移，堿性峰的含量也有所增加，與早前筆者報道的有關電荷異質性的規(guī)律類似（抗體藥物電荷異質性研究進展：堿性組分中分離出影響Fc功能的非巖藻糖化蛋白），當然兩個維度的質量屬性是否具有關聯(lián)性仍不可知。

▲  多批次Herceptin電荷異質性數(shù)據(jù)

在兩次有關糖基化質量參數(shù)偏移過程中，分子量大小的變化也不明顯。兩次糖基化質量參數(shù)偏移過程，多聚體的含量似乎依次減少。

▲  多批次Herceptin分子量大小分布

Herceptin的質量偏移源頭

Herceptin為什么會出現(xiàn)質量偏移？通常這樣的質量參數(shù)偏移可能來自于工藝轉移、產(chǎn)能增加和工藝改進等引起的工藝變更，筆者進一步在EMA官網(wǎng)查閱Herceptin審評數(shù)據(jù)。結果顯示，從2014年起，Herceptin共發(fā)生過三次原液生產(chǎn)的工藝變更，2014年9月和2016年2月的兩次可能會對產(chǎn)品的質量、安全性和有效性產(chǎn)生顯著（Significant）的影響，而2016年9月這次影響很?。╩inor）。而Herceptin的產(chǎn)品有效期為三年，這兩次的工藝變更時間跟Samsung藥業(yè)的發(fā)現(xiàn)質量偏移時機較為相符。

▲   Herceptin自2014年來原液工藝變更歷史

充滿爭議的工藝變更

值得注意的是這并不是第三方公司首次檢測發(fā)現(xiàn)原研廠家的質量參數(shù)發(fā)生偏移，仿制藥巨頭Sandoz 早在2011年就在Nature Biotechnology發(fā)表了對有效期從2007年到2011年的三個品種Aranesp , Rituxan和Enbrel 的全面質量分析結果，結果發(fā)現(xiàn)三個品種在此期間都發(fā)生了較大的質量參數(shù)偏移。

在藥物的生命周期過程中，基于工藝轉移、產(chǎn)能增加和工藝改進等引起的工藝變更不可避免，而這些變更也通常會帶來產(chǎn)品質量參數(shù)的變化， 如果能證明這些變更沒有影響到產(chǎn)品的有效性和安全性，監(jiān)管部門通常會在不改變產(chǎn)品標簽（Product label）的情況下批準這些變更。然而由于缺乏第三方的公開數(shù)據(jù)，致使關于工藝變更的討論通常停留在理論層面，并且充滿爭議。不知道是否考慮到自身作為類似藥的開發(fā)的敏感性，即使Sandoz 在發(fā)現(xiàn)這些原研產(chǎn)品的變更后，仍然很客氣指出他們的研究結果，一方面使關于工藝變更的討論從理論層面上升到特定產(chǎn)品層面（潛臺詞是監(jiān)管機構都沒說什么，說明人家這樣的工藝變更是合理的，咱們也別操心，下次工藝變更跟著干就是了），另一方面也使公眾了解到了大分子生物藥物質量控制的難點（潛臺詞是大分子藥物搞起來就是很難，這樣質量參數(shù)遷移是可接受的 ）。

▲  2011年Sandoz發(fā)現(xiàn)多批次Rituxan質量發(fā)生偏移

藥王Humira工藝變更一路暢通

如前文所述，產(chǎn)品質量周期中，工藝變更在所難免，似乎越暢銷的藥工藝變更越多，至少銷量都是靠擴大產(chǎn)能出來的。Humira 2016年的年銷售額超過160億美元，一方面自2004年來不斷擴展適應癥以增加標簽，另一方面則來自源源不斷的工藝改進、產(chǎn)能擴充及產(chǎn)品有效期延長，截止到2013年共進行了21項不同程度的生產(chǎn)工藝變更。然而，藥王始終不改本色，保證著極為穩(wěn)定的產(chǎn)品質量。

▲  Humira 工藝變更歷史

▲   Humira 工藝變更歷史中質量參數(shù)

工藝變更對生物類似藥開發(fā)的挑戰(zhàn)

應對產(chǎn)業(yè)升級，以上如Herceptin在工藝變更情況下如此的大質量偏移是否可以接受暫且不講，對于生物藥的研發(fā)也存在諸多疑問。

1、既然原研如此大的質量參數(shù)遷移都可以接受，那么Biosimilar step-wise的相似性研究是否等于打臉？

2、沒錯，biosimilar的指導條例里為了規(guī)避風險，建議類似藥研究者要橫跨多個批次多個地區(qū)的原研藥進行研究。多個批次中的原研藥沒有多大區(qū)別還好說，像Sandoz和Samsung這樣發(fā)現(xiàn)原研藥質量發(fā)生遷移，到底該怎樣確定質量標準？更悲劇一點，如果臨床前或者更早期的時候跟原研的相似性極好，到關鍵III期臨床試驗如果是因為原研工藝變更導致相似性不好又該怎么辦。（通常這種情況類似藥廠家很難找到原因，因為不可能把兩個時間維度的原研藥進行頭對頭對比）

3、目前基于這些研究結果，Sandoz和Samsung的口吻極其謹慎，因為如果弄不好原研廠家會封鎖相關原研藥的出售，而這將是所有類似藥開發(fā)的噩夢。目前幾個品種基于不同的策略已經(jīng)有不同原研藥管控。Humira的口子最大，你要多少我給你多少，早日助我彪入200億美元大關。而據(jù)悉Infliximab已經(jīng)封鎖了在華對于類似藥比對的銷售。第三方的監(jiān)測確實可以增加原研廠家的透明度，但不知道這樣的透明是否會給原本敏感的原研藥出售雪上加霜？

4、原研的質量偏移尚且這么大了，類似藥又如何能實現(xiàn)Interchangable?

歐美工藝變更的理論條例更為完善

按照可能對產(chǎn)品安全性、有效性和質量可控性產(chǎn)生的影響程度，施行變更分類管理，是國際通行的辦法，ICH Q5E是所有工藝變更的研究的基礎

• 美國FDA將變更分為三類：

  ?? 重大變更

  ?? 一般變更

  ?? 微小變更

• 歐盟將變更分為兩類：

  ?? Ⅰ類變更（ⅠA類微小變更、ⅠB類微小變更）

  ?? Ⅱ類重大變更

基于這些變更的研究者將完成特定的研究，F(xiàn)DA理論性較為精要，而EMA的不僅理論性更強，同時還有很多具體的案例指導。

國內理論和案例的指導均缺乏

自“7.22”以來，國內藥物生產(chǎn)核查監(jiān)管升級，經(jīng)歷臨床數(shù)據(jù)自查和一致性評價之后，監(jiān)管機構開始2016年8月11日，CFDA發(fā)文公開征求《關于開展藥品生產(chǎn)工藝核對工作的公告（征求意見稿）》的意見。

同時指出藥品生產(chǎn)企業(yè)應于2016年12月31日前完成上述自查、研究驗證、提交備案或補充申請等相關工作；藥品生產(chǎn)企業(yè)應于2016年12月31日前完成上述自查、研究驗證、提交備案或補充申請等相關工作；未按時完成的，應暫停生產(chǎn)或進口。

2017年3月1日起，國家食品藥品監(jiān)督管理總局將組織專家對藥品生產(chǎn)企業(yè)開展飛行檢查。檢查中發(fā)現(xiàn)實際生產(chǎn)工藝與食品藥品監(jiān)管部門備案或核準的生產(chǎn)工藝不一致的，其所生產(chǎn)的藥品按假藥論處,將依據(jù)《中華人民共和國藥品管理法》第七十三條的有關規(guī)定進行處罰。

而相關工藝變更評估的則可依據(jù)《已上市中藥變更研究技術指導原則（一）》、《已上市化學藥品變更研究的技術指導原則（一）》、《生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術指導原則》。

而原文提到的《生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術指導原則》則是在2005年的發(fā)布的一則指導原則，指導原則根據(jù)變更情況，將變更內容分類六類，類型分為三種。變更引起產(chǎn)品內在質量發(fā)生改變的，需要按新藥申報程序進行申報為I類，請參考《藥品注冊管理辦法》附件4藥品補充申請注冊事項及申報資料要求；變更可能對產(chǎn)品的安全和有效性有影響的為II類，需報CFDA審批；一般不影響產(chǎn)品安全性和有效性的為III類，需報CFDA備案。

▲   生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術指導原則

需要指出的是，該條例無論從時效性和指導性方面均有一定程度滯后，同時缺乏更具體的指導案例研究。近10年來，國內生物藥業(yè)增速明顯，產(chǎn)業(yè)升級加快，目前國內存在多方面的工藝變更需求，可以說工藝變更的理性指導迫在眉睫。

而值得注意的是，2014年8月舉行的CFDA藥品質量管理夏季研討會上，CDE曾明確提出過生物制品CMC變更技術指導原則實施計劃，并且分享過相關工藝變更的實施案例。但原定于2014底完成的指導條例至今仍未見面，是否基于其它優(yōu)先級更高的事務而受擱置仍不可知。

▲  原生物制品CMC變更技術指導原則實施計劃

基于科學技術的不斷進步，生產(chǎn)條件的持續(xù)改變，政策法規(guī)的升級，臨床和市場需要的滿足，生物制品的變更將貫穿于藥物研發(fā)、生產(chǎn)和流通的整個產(chǎn)品周期中。質量提升無止境，工藝變更永遠在路上。

參考文獻

• Drifts in ADCC-related quality attributes of Herceptin?: Impact on development of a trastuzumab biosimilar

• Acceptable changes in quality attributes of glycosylated biopharmaceuticals

• Consistency of quality attributes for the glycosylated monoclonal antibody Humira (adalimumab)

• EMA：WC500049820

• CFDA:生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術指導原則