小男孩‘自慰网亚洲一区二区,亚洲一级在线播放毛片,亚洲中文字幕av每天更新,黄aⅴ永久免费无码,91成人午夜在线精品,色网站免费在线观看,亚洲欧洲wwwww在线观看

分享

RNAi 技術(shù)視頻

 微笑如酒 2017-02-24


RNA干擾(RNAi),即用20多個(gè)核苷酸組成的短的雙鏈RNA代替?zhèn)鹘y(tǒng)反義核酸進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后基因沉默,已經(jīng)迅速而廣泛地應(yīng)用到基因功能、基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制研究等熱門領(lǐng)域,并為基因治療開辟了新的途徑。與RNAi相關(guān)的論文已成千上萬,論文中不斷出現(xiàn)與RNA干擾相關(guān)的概念,意思很相近但并不完全相同。RNAi是一種基因沉默的實(shí)驗(yàn)技術(shù),而siRNA,shRNA,dsRNA,miRNA是在這種技術(shù)路線中所運(yùn)用的核苷酸片段。下面對(duì)這四個(gè)RNA干擾相關(guān)的名詞進(jìn)行簡單的解釋。

1. miRNA

在遺傳學(xué)中,微 RNA(micrornAs,miRNA)是長度在21-23個(gè)核苷酸之間的單鏈RNA片段, 調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。miRNA由基因編碼,從DNA轉(zhuǎn)錄而來, 但不翻譯成蛋白。初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(primary transcripts,pri-miRNA)縮短其頸環(huán)結(jié)構(gòu)得到功能性的miRNA。成熟的miRNA分子與一個(gè)或更多個(gè)mRNA分子部分互補(bǔ),其主要 功能是下調(diào)基因的表達(dá)。而microRNA這個(gè)概念第一次在2001年Science (26 October 2001)的文章中出現(xiàn)。

2. dsRNA

雙鏈RNA(double-stranded RNA, dsRNA)是一種有互補(bǔ)鏈的RNA,與細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的DNA相似,dsRNA構(gòu)成了一些病毒(雙鏈RNA病毒)的基因組。像病毒RNA或siRNA之類的 雙鏈RNA能夠促發(fā)真核細(xì)胞中的RNA干擾,引起脊椎動(dòng)物中的干擾素反應(yīng)。

3. shRNA

小發(fā)卡或短發(fā)卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)是一段具有緊密發(fā)卡環(huán)(tight hairpin turn)的RNA序列,常被用于RNA干擾沉默靶基因的表達(dá)。利用載體把shRNA導(dǎo)入細(xì)胞,載體中的U6 啟動(dòng)子確保shRNA總是表達(dá);這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細(xì)胞中去,從而使基因的沉默可被遺傳。shRNA的發(fā)卡結(jié)構(gòu)可被細(xì)胞機(jī)制切割成 siRNA,然后siRNA結(jié)合到RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物上(RNA-induced silencing complex,RISC),該復(fù)合物能夠結(jié)合到目的mRNAs并將其降解。shRNA 是由RNA 聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄的,哺乳細(xì)胞中的shRNA產(chǎn)物有時(shí)會(huì)促使細(xì)胞產(chǎn)生干擾素反應(yīng)(細(xì)胞遇到病毒侵襲時(shí)做出的自我防衛(wèi)反應(yīng)),而miRNA中卻不會(huì)遇到這種問題 (miRNA是由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄,與轉(zhuǎn)錄mRNA的聚合酶相同)。shRNA也被用于植物和其它系統(tǒng)中,在這些系統(tǒng)中不需要U6啟動(dòng)子的驅(qū)動(dòng)。在植物 中,常用的增強(qiáng)表達(dá)的啟動(dòng)子是CaMV35S(cauliflower mosaic virus 35S),在這種情況下,RNA聚合酶Ⅱ參與了轉(zhuǎn)錄,起始RNA干擾。

4. siRNA

小或短干擾RNA(small/short interfering RNA, siRNA)是一類20-25個(gè)核苷酸長度的雙鏈RNA分子,其主要在RNAi 通路中起作用,干擾特異基因的表達(dá)。此外siRNA在RNAi相關(guān)的通路中 也起作用,如抗病毒機(jī)制,基因組染色體結(jié)構(gòu)的塑造等。其結(jié)構(gòu)是一段完全互補(bǔ)的RNA雙鏈,兩端各有兩個(gè)未互補(bǔ)的的堿基。

最后,miRNA,siRNA,dsRNA和shRNA都是RNA干擾技術(shù)中用到的小分子RNA,其不同之處在miRNA 是單鏈RNA,其余均為雙鏈RNA; siRNA和dsRNA相似; shRNA需通過載體導(dǎo)入細(xì)胞后,然后利用細(xì)胞內(nèi)的酶切機(jī)制得到siRNA而最終發(fā)揮 RNA干擾作用。

本文參考自武漢華聯(lián)科生物技術(shù)有限公司

    本站是提供個(gè)人知識(shí)管理的網(wǎng)絡(luò)存儲(chǔ)空間,所有內(nèi)容均由用戶發(fā)布,不代表本站觀點(diǎn)。請(qǐng)注意甄別內(nèi)容中的聯(lián)系方式、誘導(dǎo)購買等信息,謹(jǐn)防詐騙。如發(fā)現(xiàn)有害或侵權(quán)內(nèi)容,請(qǐng)點(diǎn)擊一鍵舉報(bào)。
    轉(zhuǎn)藏 分享 獻(xiàn)花(0

    0條評(píng)論

    發(fā)表

    請(qǐng)遵守用戶 評(píng)論公約

    類似文章 更多