【編前語】

有人問：我買的附片做藥湯怎么有時(shí)有效有時(shí)又無效果？

生附子含有劇毒。

     所以，市場(chǎng)上見到的附片各種品種（黑順片、白附片、炮附子等）都是生附子的附子的炮制品。炮制附子的傳統(tǒng)工藝，是將生附子浸泡在膽巴（鹽鹵）水中10幾20天，然后再水洗漂洗進(jìn)入切制干燥等工序環(huán)節(jié)。

    但是，人們錯(cuò)誤理解的一點(diǎn)是：生附子泡入膽巴水是為了去除附子的毒性。

    而真實(shí)的事實(shí)是：生附子浸泡入膽巴水，是為了防止附子腐爛，因?yàn)楦阶映墒炱谡歉邷?/span>高濕的夏季7-8月間，附子出土后，極容易腐爛。老百姓稱其為有名的“隔夜?fàn)€”。

    生附子本身含有大量的生物堿，這既包括了毒性成分，也包括了藥用成分。

   附子在膽巴水里浸泡，又經(jīng)過退出膽巴液的漂洗浸泡，生物堿成分大量流失于水中。藥性當(dāng)然大打折扣

    更有過度加工炮制的現(xiàn)象：生附子浸泡的膽巴液濃度很大，讓附子吃進(jìn)更大量鹽鹵，而且，又不合規(guī)進(jìn)行漂洗。這樣的附片，毒性減少了，藥性流失了，又撿進(jìn)來新的化學(xué)毒性成分。

看看下面專家的實(shí)驗(yàn)研究

（圖：漢中生附子）

附子中生物堿含量與在膽巴液中浸泡時(shí)間變化規(guī)律的研究

周林1，2，李飛1* ，任玉珍2，杜杰2，陳彥琳2，梁煥2，白宗利2，張曉莉3
( 1. 北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102; 2. 中國(guó)藥材公司中藥質(zhì)量控制技術(shù)
國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室，北京 100195; 3. 四川江油中壩附子科技發(fā)展有限公司，四川 江油 621700)
［ 摘要］ 目的: 采用高效液相色譜法檢測(cè)在膽巴溶液中浸泡不同時(shí)間的附子中6 種生物堿的含量， 分析附子中生物堿成分隨浸泡時(shí)間的變化規(guī)律。

方法: 采用 Waters sunfire C18 色譜柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流速 0. 8 mL·min － 1 ，柱溫 30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng) 235 nm，流動(dòng)相乙腈-四氫呋喃( 25∶ 15) 和 0. 1 mol·L － 1 醋酸銨溶液( 每 1 000 mL加冰醋酸 0. 5 mL) ， 梯度洗脫。

（圖：清洗泡膽前生附子）

結(jié)果

泥附子洗凈后在膽巴溶液中浸泡，新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿和苯甲酰新烏頭原堿的含量逐漸降低， 浸泡 20 d 后， 成分變化趨于平緩。浸泡 20 d 樣品與生品比較，其降低率分別為 60. 39% ，73.84% ，72. 57% 和 88. 46% 。結(jié)論: 泥附子洗凈后在膽巴溶液中浸泡，能達(dá)到防止腐爛的目的，浸泡20 d 以后膽附子質(zhì)量穩(wěn)定，時(shí)雙酯型和單酯型生物堿總量均流失70% 左右，為保證臨床用藥的安全和有效，有必要改進(jìn)泥附子產(chǎn)地加工方法。

附子于 6 月下旬至 8 月上旬采挖，除去母根、須根及泥沙，習(xí)稱“泥附子”。因附子在夏至季節(jié)采收后極易腐爛，須進(jìn)行產(chǎn)地加工以防止腐爛。張山雷在《本草正義》中說“此物善腐” ，《四川省彰明縣概況》中記載“售腌須速， 過夜吐水， 即就腐爛”。附子產(chǎn)地加工的方法最早出現(xiàn)在宋代《本草圖經(jīng)》，采用釀醋腌制附子防腐; 到明末時(shí)期用鹽腌制防腐，最早見于明代《景岳全書》 中“土人腌以重鹽”、“腌者大咸” ; 此方法盛行于清代， 如《本草害利》、《本草從新》、《外科證治全生集》、《本經(jīng)逢原》等中均有記載; 民國(guó)時(shí)期至今則演變?yōu)槟懓碗缰品栏?/span>

（圖：膽巴浸泡附子的大缸及水泥池）

現(xiàn)行藥典制備附子飲片時(shí)均有“泥附子洗凈，浸入食用膽巴的水溶液中數(shù)日” 的加工程序。有研究表明，附子在膽巴溶液中浸泡，其膽巴含量( 以氯化鈣計(jì)) 隨浸泡時(shí)間的變化規(guī)律符合指數(shù)函數(shù)，在 20 天后達(dá)到 25% ～ 30%，而生物堿類成分隨浸泡時(shí)間的變化情況尚無文獻(xiàn)報(bào)道。我們以《中國(guó)藥典》2010 年版附子項(xiàng)下含量測(cè)定方法，檢測(cè)置于膽巴溶液浸泡不同時(shí)間的附子樣品中雙酯型生物堿和單酯型生物堿類成分含量，分析生物堿在巴溶液中的變化規(guī)律， 為客觀評(píng)價(jià)及改進(jìn)附子產(chǎn)地加工方法提供科學(xué)依據(jù)。

1材料

2695- 2998 型 HPLC［(沃特世科技( 上海) 有限公司) ］，DENVEＲ 型 1 /10 萬電子分析天平( 北京賽多利斯儀器系列有限公司) ， KQ- 251DA 型數(shù)控超聲波清洗器( 江蘇省昆山市超聲儀器有限公司) 。乙腈、 四氫呋喃為色譜純 ( Fisher 公司) ， 異丙醇、 乙酸乙酯、 冰醋酸、 醋酸銨、 三氯甲烷為分析純( 北京化學(xué)試劑公司) 。
    各對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院， 烏頭堿( 批號(hào)110720- 200410) 、 次烏頭堿( 批號(hào) 110798-200404) 、 新烏頭堿( 批號(hào) 110799- 200404) 、 苯甲酰次烏頭原堿( 批號(hào) 111796- 200901) 、 苯甲酰烏頭原堿( 批號(hào) 111794- 200901) 、 苯甲酰新烏頭原堿( 批號(hào)111795- 200901) 。附子藥材購(gòu)于四川江油中壩附子科技發(fā)展有限公司，經(jīng)中國(guó)食品藥品檢定研究院張繼研究員鑒定為毛 茛 科 植 物烏 頭 Aconitum carmichaeli Debx． 的子根。
     附子在膽巴溶液中浸泡后習(xí)稱“膽附子” ， 泥附子凈制切片干燥后為生附片( 子) 。將江油產(chǎn)泥附子洗凈后，置于膽巴溶液中浸泡，分別于第9，12，16，20，25，27，34，41，48，55，63，70，77，87，107 天取樣， 作為在膽巴溶液中浸泡不同時(shí)間的膽附子樣品備用。
2 方法與結(jié)果
2. 1 3 種雙酯型生物堿和 3 種單酯型生物堿的含量測(cè)定［ 1，12- 13］
2. 1. 1對(duì)照品溶液的制備 取各對(duì)照品適量， 精密稱定，用異丙醇-三氯甲烷( 1∶ 1) 溶液溶解， 配制成質(zhì)量濃度分別為苯甲酰新烏頭原堿0. 048 66 g·L － 1、 苯甲酰烏頭原堿 0. 068 34 g·L － 1、 苯甲酰次烏頭原堿0. 039 67 g·L － 1、 新烏頭堿 0. 122 4 g·L － 1、 次烏頭堿0. 163 2 g·L － 1、 烏頭堿 0. 044 64 g·L － 1 的對(duì)照品儲(chǔ)
備液，儲(chǔ)存于4 ℃ 冰箱待用。
2. 1. 2 供試品溶液的制備 取附子各炮制品粉末( 過三號(hào)篩) 約 2 g， 精密稱定， 置具塞錐形瓶中， 加氨試液 3 mL，精密加入異丙醇-乙酸乙酯( 1∶ 1) 混合溶液 50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理( 功率 300 W， 頻率40 kHz， 水溫在 25 ℃ 以下) 30 min， 放冷， 再稱定質(zhì)量，用異丙醇-乙酸乙酯( 1∶ 1) 混合溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液 25 mL，40 ℃ 以下減壓回收溶劑至干，殘?jiān)芗尤氘惐?/span>-三氯甲烷( 1∶1) 混合溶液 3 mL 溶解，濾過，取續(xù)濾液，即得。
2. 2 樣品含量測(cè)定

按 2010 年版《中國(guó)藥典》 中附子項(xiàng)下的含量測(cè)定方法， 分別精密量取對(duì)照品和各供試品溶液 10 μL 注入色譜儀，測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算各供試品中新烏頭堿、 次烏頭堿、 烏頭堿、 苯甲酰新烏頭原堿、 苯甲酰烏頭原堿、 苯甲酰次烏頭原堿的含量。結(jié)果見表 1，圖 1。附子不同浸泡時(shí)間樣品平行取樣 2 份，每份樣品均平行處理 2 份供試品溶液，結(jié)果以平均值表示。最后計(jì)算各浸泡樣品較未浸泡樣品( 浸泡時(shí)間為 0 d) 的雙酯型生物堿和單酯型生
物堿總量的降低率。A. 混合對(duì)照品; B. 浸泡不同時(shí)間樣品
1. 苯甲酰新烏頭原堿; 2. 苯甲酰烏頭原堿; 3. 苯甲酰次烏頭原堿;
4. 新烏頭堿; 5. 次烏頭堿; 6. 烏頭堿;
圖 1 膽附子 HPLC

表 1 膽巴溶液中浸泡不同時(shí)間的附子中生物堿成分的含量( n = 2) %浸泡時(shí)間/d
    雙酯型生物堿                     單酯型生物堿
新烏頭堿 次烏頭堿 烏頭堿 雙酯型堿總量 苯甲新烏頭原堿 苯甲烏頭原堿 苯甲次烏頭原堿 單酯型堿總量
0 0. 056 8 0. 090 6 0. 017 5 0. 165 0 0. 013 0 － － 0. 0130
9 0. 060 5 0. 059 2 0. 011 6 0. 131 3 0. 004 5 － － 0. 004 5
12 0. 052 0 0. 052 0 0. 009 8 0. 113 9 0. 003 7 － － 0. 003 7
16 0. 029 8 0. 032 0 0. 006 4 0. 068 1 0. 002 0 － － 0. 002 0
20 0. 022 5 0. 023 7 0. 004 8 0. 050 9 0. 001 5 － － 0. 001 5
25 0. 033 7 0. 030 2 0. 005 1 0. 069 0 0. 003 0 － － 0. 003 0
27 0. 028 3 0. 027 1 0. 004 3 0. 059 7 0. 003 5 － － 0. 003 5
34 0. 029 2 0. 028 9 0. 004 8 0. 062 8 0. 002 5 － － 0. 002 5
41 0. 016 4 0. 015 7 0. 003 5 0. 035 6 0. 003 0 － － 0. 003 0
48 0. 016 5 0. 014 5 0. 002 4 0. 033 4 0. 002 9 － － 0. 002 9
55 0. 020 4 0. 020 0 0. 003 1 0. 043 5 0. 003 4 － － 0. 003 4
63 0. 020 6 0. 018 9 0. 004 6 0. 044 0 0. 002 6 － － 0. 002 6
70 0. 019 3 0. 017 5 0. 003 4 0. 040 2 0. 002 9 － － 0. 002 9
77 0. 027 1 0. 027 6 0. 004 6 0. 059 2 0. 004 2 － － 0. 004 2
87 0. 027 0 0. 026 8 0. 004 4 0. 058 2 0. 004 6 － － 0. 004 6
107 0. 017 1 0. 017 8 0. 003 2 0. 038 1 0. 003 0 － － 0. 003 0
注 : “ －” 表示未檢測(cè)出。

（圖：膽巴浸泡生附子）

3討論

泥附子洗凈后在膽巴液中浸泡使 3 種雙酯型類生物堿和 3 種單酯型類生物堿含量均降低。附子在膽巴溶液中浸泡前20 d， 新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿的含量隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降，在20 d 時(shí)降低率分別達(dá)到 60.39% ，73. 84% ，72.57% ，20 d 后， 新烏頭
堿、次烏頭堿和烏頭堿的含量變化不大。

生附子和膽附子中，苯甲酰次烏頭原堿和苯甲酰烏頭原堿含量甚微，基本檢測(cè)不到，主要是以苯甲酰新烏頭原堿為主。

附子在膽巴溶液中浸泡前20 d， 苯甲酰新烏頭原 堿 的 含 量 逐 漸 降 低， 20 d 時(shí) 其 降 低 率 達(dá) 到88.46% 。20 d 后苯甲酰新烏頭原堿含量變化趨于平緩。
    泥附子洗凈后在膽巴液中浸泡使雙酯型生物堿總量和單酯型生物堿總量降低。浸泡9d 的樣品與生附子比較，雙酯型生物堿總量降低 20. 42% ， 單酯型生物堿總量降低 65. 38% ，單酯型生物堿降低率大于雙酯型生物堿。其后， 兩類成分的含量隨浸泡時(shí)間延長(zhǎng)逐漸降低，到 20 d 時(shí)雙酯型生物堿降低率達(dá)到 69. 15% ，單酯型生物堿降低率達(dá)到88.46% 。浸泡 20 ～ 107 d 膽附子中成分變化不明顯， 且單酯型生物堿降低率和雙酯型生物堿降低率趨于一致，表明浸泡 20 d 后的膽附子質(zhì)量基本穩(wěn)定， 證明《四川省彰明縣概況》［ 4］ 中記載附子 “用膽腌足二十日”的要求具有一定的科學(xué)性。
    附子用膽巴溶液浸泡可以達(dá)到防腐的目的， 但造成了指標(biāo)性成分的流失。據(jù)實(shí)驗(yàn)觀察， 泥附子凈制切片后制成的生附片和經(jīng)過膽巴溶液浸泡 9 d 以后的樣品，均能防止其在高溫高濕的環(huán)境腐爛，達(dá)到防腐的目的。但泥附子洗凈后在膽巴溶液中浸泡20 d 以上時(shí)，單酯型生物堿和雙酯型生物堿流失約在 70% 左右。雖然雙酯型生物堿含量降低使附子毒性減小，但大量的成分流失也會(huì)影響藥效。證明清代《本草從新》［ 14］“土人以鹽腌之， 欲減其力” 和《藥籠小品》［ 14］“土人以鹽腌之， 其性愈減” 的論述是有一定科學(xué)依據(jù)的。
    現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)條件下， 附子腐爛問題可利用先進(jìn)技術(shù)或設(shè)備解決。學(xué)者［ 15-17］ 對(duì)附子采用室內(nèi)自然堆放、麻袋覆蓋、沙藏、冷藏等方法貯藏進(jìn)行比較研究，發(fā)現(xiàn)低溫可以明顯抑制附子貯藏物質(zhì)的分解，可延長(zhǎng)貯藏期，并且以冷藏處理時(shí)，總生物堿含量下降最為緩慢。本實(shí)驗(yàn)中泥附子凈制切片的干燥品也可以達(dá)到防止腐爛的目的， 為避免附子中生物堿因在膽巴溶液中浸泡而流失，改進(jìn)加工方法，采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法解決附子易腐爛的問題具有可行性，但需對(duì)不經(jīng)膽巴浸泡的生附子的炮制方法進(jìn)行研究，為臨床提供低毒高效的附子飲片，以保證臨床用藥的安全和有效。
［ 參考文獻(xiàn)］略

（圖：無膽浸泡的加工附子）

（圖：無膽浸泡并科學(xué)加工的無毒附片）

關(guān)注漢中附子  關(guān)注身體健康