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【百家講堂第13期】瘦肉精與肉品質(zhì)量安全及檢測

 指動石 2012-08-09

瘦肉精與肉品質(zhì)量安全及檢測


摘  要：受雙匯“瘦肉精”事件的影響，大量含瘦肉精的肉品浮出水面，“食品安全”經(jīng)歷兩會后再次成為焦點話題。本文僅對瘦肉精與肉品質(zhì)量安全及檢測相關(guān)知識做一個簡單介紹。


關(guān)鍵詞：瘦肉精；肉品；質(zhì)量安全；檢測



Abstract: The subject Shuanghui "lean" events, a lot of meat containing Clenbuterol surfaced, "food security" experience once again become a hot topic after the two sessions. This article only lean meat quality and safety and testing and knowledge to make a brief introduction.


Key words: lean;meat;quality and safety;testing

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1.引言
        1.1背景
    有這么一類藥物，從1987年開始，由國內(nèi)多名動物營養(yǎng)專家不斷報道、引進(jìn)、研究，并開始應(yīng)用在畜牧業(yè)生產(chǎn)上。該類物質(zhì)被添加到飼料中后，能夠改善養(yǎng)分的代謝途徑，促進(jìn)動物肌肉，特別是骨骼肌蛋白質(zhì)的合成，抑制脂肪合成的積累，從而加速動物生長速度，增加肌體瘦肉。不但可提高動物蛋白質(zhì)含量約15%，減少脂肪含量約18%，而且還可以提高動物生長速度、飼料利用率、胴體瘦肉率10%以上。然而其毒副作用遠(yuǎn)沒有引起重視。隨著中毒事件的不斷凸現(xiàn)和社會各界對食品安全問題重視程度的不斷提升，該類物質(zhì)終于由倡導(dǎo)推廣的“香餑餑”，變成人人喊打“害人精”，這類物質(zhì)就是最近“大名鼎鼎”的“瘦肉精”。
    原先的“瘦肉精”特指克倫特羅(Clenbuterol)，商品名為氨哮素、克喘素，化學(xué)名稱為α-[（叔丁氨基）甲基]-4-氨基-3，5二氯苯甲醇鹽酸鹽，分子式為：C12H18Cl2N20·HCl，是一種β2-腎上腺素受體激動劑（簡稱β-興奮劑）。目前大家講所有能夠起到促進(jìn)動物瘦肉生長的違禁添加藥物統(tǒng)稱為“瘦肉精”。因此不僅有克倫特羅，還有沙丁胺醇、溴布特羅、萊克多巴胺（Ractopamine）等。
        -興奮劑類物質(zhì)是自然產(chǎn)生的兒茶酚胺類藥物的人工合成衍生物。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中常用于促進(jìn)家畜的生產(chǎn)性能，特別是改進(jìn)脂肪型動物的肉與脂肪的比例或加速動物生長。然而直到現(xiàn)在，這些化合物并沒有被批準(zhǔn)作為合法的加速生長調(diào)節(jié)劑。除了水解脂肪及合成代謝的作用外，-興奮劑還有對非條紋肌肉組織的松弛作用，因此它們可以被用來作為平喘劑和宮縮抑制劑。-興奮劑非常有可能殘留在動物體內(nèi)，不合法的使用會給消費者帶來危害。因此，禁止在食品生產(chǎn)中試用-興奮劑。


      1.2毒副作用及治療
    “瘦肉精”進(jìn)入人體后，分布快、消除慢。此類藥主要蓄積于內(nèi)臟、毛發(fā)、視網(wǎng)膜等組織中，長期食用會引起心血管和神經(jīng)系統(tǒng)的疾病。其毒性反應(yīng)劑量因人而異，一般食用15min-6h出現(xiàn)癥狀，癥狀可持續(xù)90min-6h，通常表現(xiàn)為面色潮紅、頭痛、胸悶、心悸、心慌、骨骼肌震顫、四肢麻木等一系列不良反應(yīng)。對心律失常、高血壓、青光眼、糖尿病、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)、前列腺肥大等疾病的患者有較大危害甚至危及生命。
    中毒治療是以對癥治療為主，可采取催吐，補(bǔ)充維生素C、B1等和護(hù)肝、利尿等，對于心律失常的病人可采用心得安等抗心律失常藥。在心電圖監(jiān)測及電解質(zhì)測定下，使用保護(hù)心臟藥物如6-二磷酸果糖(FDP)及β1-受體阻滯劑倍他樂克。


        1.3中毒事件
    資料表明，第一例“瘦肉精”中毒事件發(fā)生在西班牙，有43個家庭的成員在一次吃了牛肝后，發(fā)生了集體食物中毒，而這牛正是用添加了“瘦肉精”的飼料喂養(yǎng)的。在我國，最早披露的中毒事件發(fā)生在香港，1998年5月，17名香港居民因食用內(nèi)陸供應(yīng)的豬內(nèi)臟中毒。同時，廣東省高明市人民醫(yī)院也在一周內(nèi)接診了7例因喝豬肺湯而中毒的患者，其元兇也是鹽酸克倫特羅。2006年上海瘦肉精中毒事件，數(shù)百人到醫(yī)院接受治療。2009年廣州發(fā)生的瘦肉精中毒事件，受害者70多人。以及最近發(fā)生的雙匯“瘦肉精”事件。


        1.4相關(guān)規(guī)定
    基于食用動物內(nèi)臟而導(dǎo)致的中毒事件的不斷發(fā)生，歐盟很快做出了反映：嚴(yán)禁在飼料中添加鹽酸克倫特羅類藥物。美國食品與藥品管理局（FDA）也將肉品中的鹽酸克倫特羅殘留作為必檢項目。FDA和世界衛(wèi)生組織（WHO）還制定了畜產(chǎn)品中鹽酸克倫特羅的最高殘留限量：肉、肝臟、腎臟、脂肪和奶中分別為0.2μg/㎏、0.6μg/㎏、0.6μg/㎏、0.2μg/㎏、0.05μg/㎏。至此，以高科技面目出現(xiàn)的“瘦肉精”最終被確認(rèn)為地地道道的“害人精”。
    我國食品藥品監(jiān)督管理局2001年下發(fā)了《關(guān)于嚴(yán)厲打擊非法生產(chǎn)經(jīng)營和使用鹽酸克倫特羅等藥品違法行為的通知》，開展了大規(guī)模的禁用“瘦肉精”的行動。按照上級要求，我市將“瘦肉精”的監(jiān)測作為肉品安全的重要內(nèi)容，每年對全市范圍內(nèi)的規(guī)模養(yǎng)殖場、生豬屠宰場和超市進(jìn)行隨機(jī)抽樣監(jiān)測，進(jìn)一步治理了我市的肉食品市場，維護(hù)了人們的食肉安全。
    我國明令禁止使用“瘦肉精”作為飼料添加劑，并且規(guī)定所有動物所有可食用組織中均不得檢出“瘦肉精”。
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2.肉品質(zhì)量安全
    隨著“瘦肉精”事件的不斷出現(xiàn)，給人民群眾的飲食安全帶來了極大的威脅，甚至出現(xiàn)了談“精”色變的情況。世界各有關(guān)組織及大部分國家均明確了瘦肉精在肉品中的限量，以確保肉品的質(zhì)量安全。


2.1聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織（FAO）&世界衛(wèi)生組織（WHO）國際食品法典委員會（CAC）




2.2 中國


相關(guān)法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)：《農(nóng)業(yè)部第235號公告》；GB 18406.3-2001《農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量 無公害畜禽肉安全要求》



2.3 中國香港



相關(guān)法規(guī)：《公眾衞生(動物及禽鳥)(化學(xué)物殘余)規(guī)例》、《2001年食物內(nèi)有害物質(zhì)(修訂)規(guī)例》


2 .4 歐盟


相關(guān)法規(guī)：96/22/EC《關(guān)于禁止在畜牧業(yè)中使用某些具有激素或甲狀腺拮抗作用的物質(zhì)及興奮劑并廢除指令81/602/EEC、88/146/EEC和88/299/EEC》


2.5 美國



相關(guān)法規(guī)：21 CFR 556《新型動物藥在食物中的殘余允許量》


2.6 日本












以上數(shù)據(jù)來《日本肯定列表》


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2.7 加拿大




3.檢測手段及方法
    衛(wèi)生檢驗及市場監(jiān)管部門主要檢測市場上肉品及內(nèi)臟組織中的殘留情況。雖然肌肉、肝臟、肺臟、腎臟、眼球的殘留量多，殘留維持時間較長，但是這些樣品預(yù)處理過程復(fù)雜，難于操作。鹽酸克倫特羅在血漿中濃度較低，維持時間短，不是檢測鹽酸克倫特羅殘留的理想樣品。鹽酸克倫特羅在體內(nèi)代謝后大量以原形從尿液中排出，而且尿液中鹽酸克倫特羅的濃度比血漿中高40倍，可實現(xiàn)宰前檢測，所以尿液是檢測鹽酸克倫特羅的較好的樣品。鹽酸克倫特羅能特異地與毛發(fā)、羽毛中的色素牢固結(jié)合，而且殘留量大、維持時間長、采集方便，也適合宰前檢測，因此有人認(rèn)為毛發(fā)、羽毛是檢測鹽酸克倫特羅最好的樣品。
    目前，“瘦肉精”的檢測技術(shù)主要有色譜檢測技術(shù)、免疫分析技術(shù)、金標(biāo)免疫檢測技術(shù)(DIGFA)等。色譜檢測技術(shù)又分為高效液相色譜技術(shù)（HPLC）、高效液相色譜/熒光技術(shù)（HPLC/FLR）、液譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）、氣譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）等。免疫分析技術(shù)又分為酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法、放射免疫（RIA）法、膠體金免疫層析法等。


    3.1樣品的選擇

    在目前鹽酸克倫特羅的檢測體系中，樣品的選擇具有多樣性，內(nèi)臟、肌肉、尿液、毛發(fā)都能作為樣品進(jìn)行檢測，但都存在著殘留濃度的問題?？藗愄亓_的殘留量與性別無關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，添加于飼料中的1mg/kg鹽酸克倫特羅（7d），零休藥期，肝和肺中克倫特羅的殘留量最大，超過腎中殘留的2倍，大約是脂肪和肌肉的15倍。休藥3d后，肝中克倫特羅的總殘留量最大，肺、腎、脂肪組織中的殘留濃度幾乎相等，肌肉的總殘留量仍大約是肝中的1/15。休藥7d后，脂肪中的克倫特羅總殘留量大約是零休藥期25％，腎、肝、肺、肌肉中的克倫特羅總殘留量分別大約是零休藥期的4％、5％、2％及6％。


    由于采樣方便，檢出率高，因此尿液作為檢測樣本最為普遍，但尿液中鹽酸克倫特羅的殘留時間及殘留量還少見報道。部分試驗結(jié)果表明：飼喂不同濃度的克倫特羅，其在豬尿液中的排出量在第3d達(dá)到一個高峰，第20d再次出現(xiàn)一個高峰，此過程呈波浪形，而且隨添加劑量的增大而升高。但停藥后，尿液中的鹽酸克倫特羅含量大量下降，飼喂5mg/kg的鹽酸克倫特羅試驗組，零休藥期的排出量為338.6×10－9，在第7d降到19.7×10－9，14d降到15.1×10－9。研究發(fā)現(xiàn)，在1t飼料中添加100g鹽酸克倫特羅，采取混飼給藥的方式飼喂60kg左右的生長肥育豬1周，鹽酸克倫特羅在豬尿中的殘留時間為1個月左右。停藥36d后，不能檢測出尿液中的鹽酸克倫特羅。因此，尿液作為檢測樣本也具有一定的局限性。


    眼睛中克倫特羅的殘留量最大且持續(xù)時間最長。測定添加于飼料中的1mg/kg鹽酸克倫特羅（7d），休藥7d后，眼睛中鹽酸克倫特羅總殘留量仍保持在200μg/kg以上，表明眼睛是監(jiān)測克倫特羅的最佳靶組織。同時研究發(fā)現(xiàn)，以1mg/kg克倫特羅喂21d停藥，在視網(wǎng)膜和頭發(fā)絲的含量分別為1779ng/g和424ng/g。


    有報道說，因瘦肉精在血液和尿液中可迅速被清除，故此檢驗的意義有限，用毛發(fā)作為活家畜的檢測標(biāo)本較血液和尿液更可靠，但待進(jìn)一步研究。

最后編輯wuyun 最后編輯于 2011-03-22 12:03:24
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3.2主要檢測方法概述
3.2.1氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS） GC-MS法優(yōu)點是把色譜高效快速的分離效果和質(zhì)譜高靈敏度的定性分析有機(jī)合起來，能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進(jìn)行定性、定量分析，而且具更高的檢測極限。Fente C. A等用GC-MS法檢測牛毛中CLB的殘留，最低檢測限為5ng/g；Pteer Batioens應(yīng)用氣相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS-MS)對牛、羊、豬組織中的CLB含量進(jìn)行檢測，最低檢測限為2ng/g；劉琪等用GC-MS法（EI離子源）檢測豬尿中的CLB，檢測限為0.5ng/mL；VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基嗎啉衍生物檢測尿提取物中的CLB，衍生物用電脈沖方式或化學(xué)離子化方式掃描，會產(chǎn)生更高的靈敏度。另外，GC-MS法與HPLC法相比，檢測靈敏度更高，假陽性率更低。因此，我國將GC-MS法定為檢測CLB的確證性方法（NY/T468-2001）。

3.2.2高效液相色譜法（HPLC） HPLC適合測定熱不穩(wěn)定和強(qiáng)極性的β-激動劑及其代謝產(chǎn)物，而且，HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用，容易實現(xiàn)分析過程的自動化。黃士新等(1995)應(yīng)用紫外檢測器，在λ=243nm，色譜柱：shimpackCLC-ODS150×6.0mn，流速：1mL/min，柱溫：室溫30℃的條件下檢測豬肝臟和豬肉中的CLB殘留，最低檢測限可達(dá)2ng/g。國外有人應(yīng)用HPLC (二極管陣列檢測器)測定動物性食品中CLB殘留，測得最低檢測限為1.26ng/g，回收率達(dá)98.9%。目前，我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方法，最低檢測限范圍為1～15ng/g，其優(yōu)點是專屬性好、選擇性強(qiáng)、檢測精確度較高，而且假陽性率低；缺點是樣品處理時間長，檢測過程煩瑣、難于操作，需貴重儀器，在實際應(yīng)用中受到一定的限制。

3.2.3酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA） 利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的高效催化作用，通過化學(xué)方法將植物辣根過氧化物酶（HRP）與克倫特羅（CL）結(jié)合，形成酶偶聯(lián)克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體（羊抗兔IgG抗體）與特異性的抗克倫特羅抗體結(jié)合，然后加入待測克倫特羅和酶偶聯(lián)克倫特羅，它們競爭性與克倫特羅抗體結(jié)合，洗滌后加底物，根據(jù)有色物的變化計量待測克倫特羅量。若待測克倫特羅多，則被結(jié)合的酶偶聯(lián)克倫特羅少，有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克倫特羅含量，比色的最佳波長為450 nm，參比波長應(yīng)大于600 nm。

3.2.4膠體金免疫層析法（Colloidal gold immunochromatography） 利用競爭法膠體金免疫層析技術(shù)，檢測液中的Clen與金標(biāo)墊上的金標(biāo)抗體結(jié)合形成復(fù)合物，若Clen在檢測液中濃度低于靈敏度值，未結(jié)合的金標(biāo)抗體流到T區(qū)時，被固定在膜上的Clen-BSA偶聯(lián)物結(jié)合，逐漸凝集成一條可見的T線；若Clen濃度高于靈敏度值，金標(biāo)抗體全部形成復(fù)合物，不會再與T線處Clen-BSA偶聯(lián)物結(jié)合形成可見T線。未固定的復(fù)合物流過T區(qū)被C（Quality Control 區(qū)域）區(qū)的二抗捕獲并形成可見的C線。C線出現(xiàn)則表明免疫層析發(fā)生，即試紙有效。
膠體金免疫層析檢測方法是最有效的控制瘦肉精的手段，基本上不受場地和人員的限制，隨時隨地可以進(jìn)行篩選檢測，特別適宜屠宰場動物檢疫員進(jìn)行現(xiàn)場檢測，其特點是成本低、速度快、門檻低，能現(xiàn)場檢測，能大批量檢測，缺點是無法定性定量、只能初篩，有一定的假陽性率，遇到可疑樣品仍需進(jìn)一步確認(rèn)。

3.3 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)/方法

a)        GB/T 5009.192-2003動物性食品中克倫特羅殘留量的測定 （沙丁胺醇參照此標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行）
b)        農(nóng)業(yè)部1025號公告-6-2008動物性食品中萊克多巴胺殘留檢測 ELISA法
c)        農(nóng)業(yè)部1025號公告-18-2008動物性食品中β-受體激動素殘留檢測 LC-MS法
d)        農(nóng)牧發(fā)[2001]38號 豬尿中克倫特羅檢測方法 ELISA法（沙丁胺醇參照此標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行）
e)        農(nóng)業(yè)部1025號公告-11-2008動物性食品中β-受體激動素殘留檢測 LC-MS法
f)          NY/T 468-2006動物組織中鹽酸克倫特羅的測定氣相色譜質(zhì)譜法
g)        SN/T 1116-2002進(jìn)出口飼料中克倫特羅、沙丁胺醇?xì)埩袅康臋z驗方法 液相色譜法
h)        SN/T 1924-2007進(jìn)出口動物源性食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測方法 液相色譜－質(zhì)譜/質(zhì)譜法
i)          GB/T 22944-2008蜂蜜中克倫特羅殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
j)          DB32/T 1166-2007動物尿液中特布他林、克倫特羅、沙丁胺醇、西馬特羅和萊克多巴胺及其代謝物殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜法
k)        DB34/T 818-2008飼料中鹽酸克倫特羅的測定-膠體金免疫層析法
l)          DB33/T 537-2005動物組織中萊克多巴胺的測定 
m)      DB33/T 539-2005飼料中萊克多巴胺的測定
n)        DB34/T 820-2008飼料中萊克多巴胺的測定——氣相色譜質(zhì)譜法
o)        DB/T 819-2008飼料中萊克多巴胺的測定——酶聯(lián)免疫吸附法
p)        GB/T 20189-2006飼料中萊克多巴胺的測定 高效液相色譜法 
q)        GB/T 22147-2008飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測定 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法
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4. 致謝
    感謝管理員wisdom提供的相關(guān)資料。


5. 參考資料/文獻(xiàn)
[1] 易展儀表展覽網(wǎng)http://www./
[2] 我的儀家http://bbs./
[3] 技術(shù)壁壘資源網(wǎng)http://www./
[4] 中國技術(shù)性貿(mào)易措施網(wǎng)http://www./
[5] 食品伙伴網(wǎng)http://www.foodmate.net/
[6] 互動百科http://www.hudong.com/
[7] 維基百科http://zh./zh/
[8] 百度百科http://baike.baidu.com/
[9] 歐洲議會和理事會.96/22/EC關(guān)于禁止在畜牧業(yè)中使用某些具有激素或甲狀腺拮抗作用的物質(zhì)及興奮劑并廢除指令81/602/EEC、88/146/EEC和88/299/EEC.歐洲.1996.
[10] 歐洲議會和理事會.禁止在畜牧業(yè)中使用某些含有激素或甲狀腺抑制反應(yīng)的物質(zhì)以及長肉劑指令草案 {SEC(2007)733}.歐洲.2007.
[11] 歐洲議會和理事會. 2008/97/EC關(guān)于禁止在畜牧業(yè)中使用某些具有激素或甲狀腺拮抗作用的物質(zhì)指令.歐洲.2008.
[12] 美國聯(lián)邦.21 CFR 556 Tolerances for residues of new animal drugs in food. 美國.2003.
[13] 香港特區(qū)政府律政司.公眾衛(wèi)生(動物及禽鳥)(化學(xué)物殘余)規(guī)例.香港.2003.
[14] 香港特區(qū)政府律政司.2001年食物內(nèi)有害物質(zhì)(修訂)規(guī)例.香港.2001.
[15] 葉雪珠等.我國與CAC、日本雞肉獸藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)比較分析［A］. 中國畜牧雜志，2009,45（16）：28-32.
[16] 馬兵等.各國藥物殘留限量標(biāo)準(zhǔn)比對分析及對中國水產(chǎn)品出口貿(mào)易的影響［A］. 中國農(nóng)學(xué)通報，2010,26（17）:398-402.
[17] 馬愛進(jìn)等.食品中獸藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的差異［A］.肉類研究，2007，（10）:40-43.
[18] 王靜等.“瘦肉精”快速檢測技術(shù)在肉品安全中的應(yīng)用［J］.山東畜牧獸醫(yī).2005.12ZK：38-40.

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