生物學(xué)是一門以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)的科學(xué)，實(shí)驗(yàn)是生物學(xué)的重要組成部分。實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Φ目疾槭恰犊荚囌f(shuō)明》中四種考查能力之一。顯微鏡作為中學(xué)階段常使用的一種放大儀器，在生物實(shí)驗(yàn)室中也是使用頻率較高的儀器之一。如教材實(shí)驗(yàn)：脂肪的鑒定，用高倍鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)，觀察植物細(xì)胞的有絲分裂等都涉及到顯微鏡的使用。在高考試題中關(guān)于顯微鏡的考查頻率也是很高的。如：

 【例1】（05年上海卷高考）顯微鏡目鏡為10×，物鏡為10×，視野中被相連的64個(gè)分生組織細(xì)胞所充滿。若物鏡轉(zhuǎn)換為40×后，則在視野中可檢測(cè)到的分生組織細(xì)胞數(shù)為（     ）

A．2個(gè)       B．4個(gè)         C．8個(gè)             D．16個(gè)

解析：顯微鏡的放大倍數(shù)=物鏡倍數(shù)×目鏡倍數(shù)。放大100倍時(shí)，視野中有64個(gè)細(xì)胞。物鏡換為40倍后，半徑放大4倍，面積放大了16倍，所以視野中細(xì)胞數(shù)目為原來(lái)的1/16，看到的細(xì)胞數(shù)目是64/16=4。答案：B

【例2】（05年江蘇卷高考）觀察細(xì)胞中染色體行為并計(jì)數(shù)時(shí)，使用光學(xué)顯微鏡的正確方法是（     ）

A．低倍鏡對(duì)焦．將觀察目標(biāo)移至視野中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并增加進(jìn)光量，調(diào)焦觀察

    B．低倍鏡對(duì)焦，將觀察目標(biāo)移至視野中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并減少進(jìn)光量．調(diào)焦觀察

    C．低倍鏡對(duì)焦，轉(zhuǎn)用高倍鏡，將觀察目標(biāo)移至視野中央，減少進(jìn)光量，調(diào)焦觀察

D．高倍鏡對(duì)焦，將觀察目標(biāo)移至視野中央，增加進(jìn)光量，調(diào)焦觀察

解析：使用顯微鏡原則是，先用低倍鏡對(duì)焦．將觀察目標(biāo)移至視野中央，否則轉(zhuǎn)用高倍鏡后，原來(lái)處于視野邊緣的細(xì)胞觀察不到。轉(zhuǎn)用高倍鏡后，視野變暗，故應(yīng)增加進(jìn)光量，調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋使物象清晰并觀察。答案：A

【例3】（04年廣東卷高考）取生長(zhǎng)健壯的小麥根尖，經(jīng)過(guò)解離、漂洗、染色、制片過(guò)程，制成臨時(shí)裝片，放在顯微鏡下觀察。欲觀察到細(xì)胞有絲分裂的前、中、后、末幾個(gè)時(shí)期（     ）

   A. 應(yīng)該選一個(gè)處于間期的細(xì)胞，持續(xù)觀察它從間期到末期的全過(guò)程

   B．如果在低倍鏡下看不到細(xì)胞，可改用高倍物鏡繼續(xù)觀察

   C. 如果在一個(gè)視野中不能看全各個(gè)時(shí)期，可移動(dòng)裝片從周圍細(xì)胞中尋找

   D. 如果視野過(guò)暗，可以轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋增加視野的亮度

解析：解離的目的是殺死細(xì)胞，各個(gè)細(xì)胞被固定在某一個(gè)時(shí)期，持續(xù)觀察一個(gè)細(xì)胞從間期到末期的全過(guò)程是不可能的，但可通過(guò)移動(dòng)裝片尋找各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞。當(dāng)?shù)捅剁R觀察清楚后，再換高倍鏡，若視野過(guò)暗，可通過(guò)調(diào)整反光鏡和光圈調(diào)整亮度，細(xì)準(zhǔn)焦螺旋不能增加視野的亮度。答案：C

【例4】（05年廣東卷高考）用顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)．請(qǐng)回答：

( 1 )為什么選用黑藻的幼嫩葉片而不是幼根為材料觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)?

 （2）如果先用高倍鏡觀察，可能會(huì)出現(xiàn)什么情況?

 （3）葉綠體的形態(tài)和分布隨       的強(qiáng)度和方向的改變而改變。

解析：本題涉及用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。植物的幼葉中有葉綠體，可作為觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的材料，幼根中細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)沒有明顯參照物，不便于觀察。高倍鏡焦距對(duì)準(zhǔn)物象時(shí)，距離標(biāo)本過(guò)近，直接調(diào)焦不易調(diào)準(zhǔn)焦距，且容、易壓標(biāo)本并損壞鏡頭。光照會(huì)影響葉綠體的形態(tài)和分布，使細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)加快。

答案：（！）幼葉中存在葉綠體，便與細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的觀察，幼根中細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)沒有明顯參照物，不便于觀察。（2）可能會(huì)找不到觀察對(duì)象，還可能出現(xiàn)高倍鏡鏡頭壓破玻片（損壞鏡頭）。（3）光照

從高考試題關(guān)于顯微鏡的考察來(lái)看涉及到考查顯微鏡的結(jié)構(gòu)、使用和注意事項(xiàng)；放大倍數(shù)的計(jì)算和低倍鏡及高倍鏡關(guān)系；物象與標(biāo)本之間關(guān)系及物象特點(diǎn)；如何辨別污點(diǎn)等。因此在復(fù)習(xí)中應(yīng)注意全面：

 1顯微鏡的結(jié)構(gòu)：

（1）機(jī)械部分：

鏡筒：是一個(gè)金屬長(zhǎng)筒，筒口上端安裝目鏡鏡頭，下端裝有鏡頭轉(zhuǎn)換器和物鏡鏡頭；

轉(zhuǎn)換器：是安裝在鏡簡(jiǎn)下端的一個(gè)旋轉(zhuǎn)圓盤。鏡頭轉(zhuǎn)換器上有3--5 個(gè)孔，分別裝有低倍或高倍物鏡鏡頭；

粗準(zhǔn)焦螺旋：位于鏡臂的下方，可以轉(zhuǎn)動(dòng)，以便使載物臺(tái)能上下移動(dòng)，從而調(diào)節(jié)焦距；

細(xì)準(zhǔn)焦螺旋：位于粗準(zhǔn)焦螺旋外方，它的移動(dòng)范圍較粗準(zhǔn)焦螺旋小，可以細(xì)調(diào)焦距；

鏡座：位于鏡臂下方，用以穩(wěn)固和支持鏡身；

鏡臂：上接鏡筒，下連載物臺(tái)，呈弓曲形。為顯微鏡上的手握之處；

載物臺(tái)：放置玻片的平臺(tái)。其中央具有通光孔，載物臺(tái)上有金屬夾片夾，是用來(lái)卡住載玻片的夾子，轉(zhuǎn)動(dòng)左、右移動(dòng)尺螺旋還可使切片在載物臺(tái)上移動(dòng)。

（2）光學(xué)部分

  目鏡：是插在鏡筒頂部的鏡頭，是由一組透鏡組成的，它可以使物鏡成倍地分辨、放大物像，例如 5×、10×、15×和20×。

   物鏡：安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器的孔上，也是由一組透鏡組成的，能夠把物體清晰地放大。物鏡上刻有放大倍數(shù)，例如 （4、10、25、

40、100×）等。顯微鏡的放大倍數(shù)是目鏡倍數(shù)乘以物鏡的倍數(shù)。

 反光鏡：位于底座上，有2個(gè)面（平面和凹面）可以根據(jù)光線的強(qiáng)度進(jìn)行調(diào)節(jié)。

 2顯微鏡的使用

顯微鏡的使用，具體的講：

（1）顯微鏡的取送：①右手握鏡臂；②左手托住鏡座；③置于胸前。

（2）顯微鏡的旋轉(zhuǎn)：①鏡筒朝前，鏡臂朝后；②置于觀察者座位前的桌子上，偏向身體左側(cè)，便于左眼向目鏡內(nèi)觀察；③置于桌子內(nèi)側(cè)，距桌子邊緣5cm左右（便于用左眼觀察）。

（3）對(duì)光：①轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔；②用手指轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器，使最大光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔，左眼向目鏡內(nèi)注視，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使其朝向光源，使視野內(nèi)亮度均勻合適。

（4）使用原則：先用低倍物鏡，后換成高倍物鏡。具體的講：

　　①低倍物鏡的使用：①用手轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐下降，同時(shí)兩眼從側(cè)面注視物鏡鏡頭，當(dāng)物鏡鏡頭與載物臺(tái)的玻片相距2～3mm時(shí)停止。②用左眼向目鏡內(nèi)注視（注意右眼應(yīng)該同時(shí)睜著），并轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，直到看清物象為止。如果不清楚，可調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，至清楚為止。

　?、诟弑段镧R的使用：使用高倍物鏡之前，必須先用低倍物鏡找到觀察的物象，并調(diào)到視野的正中央，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器再換高倍鏡。換用高倍鏡后，視野內(nèi)亮度變暗，因此一般選用較大的光圈并使用反光鏡的凹面，然后調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。觀看的物體數(shù)目變少，但是體積變大。

　（5）　反光鏡的使用：反光鏡通常與遮光器（或光圈）配合使用，以調(diào)節(jié)視野內(nèi)的亮度。反光鏡有平面和凹面。對(duì)光時(shí)，如果視野光線太強(qiáng)，則使用反光鏡的平面，如果光線仍舊太強(qiáng)，則同時(shí)使用較小的光圈；反之，如果視野內(nèi)光線較弱，則使用較大的光圈或使用反光鏡的凹面。

3 顯微鏡的計(jì)算

   （1）顯微鏡的放大對(duì)象：是物體的長(zhǎng)和寬，不是面積，更不是體積。顯微鏡的放大倍數(shù)=目鏡的放大倍數(shù)×物鏡的放大倍數(shù)。

（2 ）一行細(xì)胞數(shù)量的變化，可根據(jù)放大倍數(shù)與視野呈反比計(jì)算。假設(shè)：某臺(tái)顯微鏡放大n1倍時(shí)，可看到一列m1個(gè)細(xì)胞；若放大n2倍時(shí)，可看到一列 m2個(gè)細(xì)胞。則它們的關(guān)系為：n1. m1 = n2. m2

（3）圖形視野內(nèi)細(xì)胞數(shù)量變化，可根據(jù)視野范圍與放大倍數(shù)的平方成反比計(jì)算。假設(shè)：某臺(tái)顯微鏡放大n1倍時(shí)，可看到整個(gè)視野內(nèi)m1個(gè)細(xì)胞；若放大倍n2時(shí)，可看到整個(gè)視野內(nèi)m2個(gè)細(xì)胞。則它們的關(guān)系為：m2. n22=m1. n12

 4顯微鏡污點(diǎn)的判斷：

目鏡：如果旋轉(zhuǎn)目鏡發(fā)現(xiàn)物象也隨之旋轉(zhuǎn)，則說(shuō)明在目鏡上。

裝片：通過(guò)移動(dòng)玻片，發(fā)現(xiàn)污點(diǎn)也隨之移動(dòng)，則說(shuō)明在裝片上。

物鏡：排除是目鏡和裝片，則證明是；也可以通過(guò)換物鏡驗(yàn)證，即如果換一個(gè)物鏡后發(fā)現(xiàn)污點(diǎn)消失，則也可說(shuō)明在該上。

5幾點(diǎn)說(shuō)明：

 （1）低倍鏡與高倍鏡比較：低倍鏡下看到的物象范圍大，視野亮度高，觀察到的細(xì)胞數(shù)目多，但是具體的細(xì)胞則體積小，物鏡與載波片的工作距離大。而高倍鏡下則相反。

（2）目反物正：目鏡的放大倍數(shù)越大，鏡筒的長(zhǎng)度越小；而物鏡的放大倍數(shù)越大，鏡筒的長(zhǎng)度越大。如物鏡的放大倍數(shù)分別為10×、15×，則15×的鏡筒長(zhǎng)于10×的。

（3）用顯微鏡下觀察到的物象是個(gè)放大的倒立的像（上下與左右都顛倒）

（4）物象的移動(dòng)方向與標(biāo)本的移動(dòng)方向相反（強(qiáng)調(diào)的是移動(dòng)方向）。

（5）　用顯微鏡觀察的物體必須制成薄而透明的標(biāo)本才行，且觀察的過(guò)程應(yīng)該考慮光線的選擇。

6顯微鏡使用的注意事項(xiàng)

（1）取送顯微鏡時(shí)一定要一手握住鏡臂，另一手托住底座。顯微鏡不能傾斜，以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡時(shí)要輕拿輕放轉(zhuǎn)換物鏡鏡頭時(shí)，不要搬動(dòng)物鏡鏡頭，應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器。切勿隨意轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋。使用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，用力要輕，轉(zhuǎn)動(dòng)要慢，轉(zhuǎn)不動(dòng)時(shí)不要硬轉(zhuǎn)。在使用高倍物鏡時(shí)，不要用粗準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)焦距，以免移動(dòng)距離過(guò)大，損傷物鏡和玻片。不得任意拆卸顯微鏡上的零件，嚴(yán)禁隨意拆卸物鏡鏡頭，以免損傷轉(zhuǎn)換器螺口，或螺口松動(dòng)后使低高倍物鏡轉(zhuǎn)換時(shí)不齊焦。

（2）凡是顯微鏡的光學(xué)部分，只能用特殊的擦鏡頭紙擦拭，不能亂用他物擦拭，更不能用手指觸摸透鏡，以免汗液玷污透鏡。鏡頭的擦拭：①用專門的擦鏡紙；②擦鏡頭時(shí)，先將擦鏡紙折疊幾次，然后朝一個(gè)方向擦，不可來(lái)回擦或轉(zhuǎn)動(dòng)擦；③如果鏡頭被油污污染，則可在擦鏡紙上滴幾滴二甲苯，然后按上述方法擦拭。

（3）保持顯微鏡的清潔，避免灰塵、水及化學(xué)試劑的玷污，保持顯微鏡的干燥。

 （4）實(shí)驗(yàn)后顯微鏡的安置：顯微鏡使用完畢后，應(yīng)將玻片取下，將其機(jī)械部分用白紗布擦拭干凈；轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，讓兩個(gè)物鏡偏于兩旁；轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒下降至最低點(diǎn)，將反光鏡豎起，蒙上紅綢布，然后將顯微鏡鎖入箱內(nèi)。