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Re:【求助】小鼠腎臟masson染色問題 - 形態(tài)學(xué)討論版 -丁香園論壇

 ngcky 2011-01-11
Masson 三色染色法
1、試劑配制:
麗春紅酸性品紅液: 麗春紅 0.7 g 酸性品紅 0.3 g
蒸餾水 99ml 冰醋酸 1 ml
苯胺藍液: 苯胺藍 2 g 蒸餾水 98 ml 醋酸 2 ml
亮綠液: 亮綠 0.2g 蒸餾水 100 ml 冰醋酸 0.2 ml
苦味酸酒精液:苦味酸在95%酒精中的飽和液 20 ml,加95%酒精10 ml
2、染色步驟:
(1)切片脫蠟至蒸餾水
(2)蘇木素染5~10分鐘
(3)鹽酸酒精分化
(4)流水藍化,蒸餾水洗(蘇木素可不染)
(5)麗春紅酸性品紅液中染5~8分鐘
(6)蒸餾水洗
(7)1% 磷鉬酸中染1~3分鐘
(8)不用水洗直接入苯胺藍液或亮綠液5分鐘 (如染色效果不佳,可在冰醋酸內(nèi)脫色后重染)
(9)水速洗,置60℃溫箱中烘干,二甲苯透明,封固
3、結(jié)果:膠原纖維藍色(苯胺藍復(fù)染)或綠色(亮綠復(fù)染),肌纖維、纖維素紅色。
4、注意:
(1) 此法廣泛用于膠原纖維和平滑肌的鑒別,也為腎組織活檢,觀察腎小球病變的重要染色法,常用于觀察缺血病變的心肌。 用于觀察腎小球病變時,一定要用2um以下半薄切片。
(2) 細胞核染色后分化很重要,觀察控制著色程度。而HE染色則是最常用的一種常規(guī)染色方法,但無法區(qū)別膠原纖維和肌肉。

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