由博鰲國際醫(yī)院、哈工大生命科技學(xué)院和日本 ISHIN-KAI ODA診所聯(lián)合在AGING（老齡化）雜志發(fā)文：《Immune normalization strategy against suboptimal health status: safe and efficacious therapy using mixed-natural killer cells》（對抗亞健康的免疫正?；呗裕菏褂肗KM細胞的安全和有效性治療）。

經(jīng)過筆者檢索，該文是博鰲樂城正式發(fā)表的首篇關(guān)于細胞應(yīng)用的公開文獻。該文研究主體分為三部分內(nèi)容。

（1）根據(jù)PDMC（外周血單個核細胞）的PD-1的表達來定義“亞健康”狀態(tài)；

（2）NKM細胞輔助治療腫瘤患者；

（3）NKM細胞應(yīng)用于亞健康人群。

免疫系統(tǒng)是人體抵抗疾病的關(guān)鍵屏障，并受幾個因素的影響(如遺傳、年齡），免疫細胞反應(yīng)能力的降低會導(dǎo)致疾病(例如癌癥)，而免疫細胞的過度激活會導(dǎo)致自身免疫性疾病。因此，免疫系統(tǒng)的平衡對健康很重要。

最近，如果個體免疫力能夠正?；鞣N疾病都有可能預(yù)防。過去十年細胞療法的發(fā)展為這一策略的實施帶來了希望。細胞療法，尤其是那些使用免疫細胞的療法，已被用于癌癥治療，例如使用自然殺傷(NK)細胞的療法和嵌合抗原受體T細胞。

近幾十年來，結(jié)腸直腸癌和肺癌的流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，癌癥的預(yù)防和早期檢測遠比控制癌癥死亡率的治療更有效。免疫細胞療法在疾病預(yù)防(尤其是癌癥)中的應(yīng)用可以大大減少疾病的發(fā)生或復(fù)發(fā)。對于長期免疫功能低下的老年人，免疫細胞療法可以“重新平衡”他們的免疫系統(tǒng)，消除突變細胞和病原體(如病毒、細菌)，從而降低疾病風(fēng)險。

T細胞上程序性細胞死亡蛋白(PD)-1的表達被認為是“免疫衰竭”的標志。PD-1在外周血單核細胞(PBMCs)包括CD4+和CD8+t細胞上的表達，已經(jīng)顯示在癌癥、結(jié)節(jié)病和慢性丙型肝炎病毒感染中顯著增加。PD-1屬于免疫細胞表面的抑制性小分子，在腫瘤患者中常常是高表達，后果就是抑制了免疫細胞對腫瘤細胞的殺傷。

下圖是NKM細胞的制備，實際是一種混合的免疫細胞，作者分析了他們培養(yǎng)的NKM細胞，其中包含約20%的NK細胞(CD3?CD16/56+)、約30%的NK T樣細胞(CD3+CD16/56+)，以及其他T細胞。

體外測試表明，NKM細胞的細胞毒性只有“純”NK細胞(NK92)的一半，但細胞毒性比PBMCs高。（如下圖）

作者招募了11例惡性淋巴瘤患者(彌漫性大B細胞淋巴瘤[7例]、外周T細胞淋巴瘤[2例]、間變性大細胞淋巴瘤[1例]和霍奇金淋巴瘤[1例])，這些患者患有原發(fā)性復(fù)發(fā)/難治性治療(1例)、補救性化療后復(fù)發(fā)(8例)或自體干細胞治療后復(fù)發(fā)(2例)(下圖A)。

每位患者每次接受20–30×10^8NKM細胞(每2周治療一次)，共完成6次回輸，對NKM治療的反應(yīng)并不強烈(一例完全反應(yīng)，一例病情穩(wěn)定)，但生活質(zhì)量有了很大提高。

在具有完全反應(yīng)的患者(病例#2)中，在用NKM細胞治療后，癌灶的數(shù)量顯著減少(下圖B)。靜脈輸注NKM細胞期間和之后，體溫、血壓和心跳保持穩(wěn)定，未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)?；颊吣苣褪苤委?，無臨床副作用。

另一名患有胰腺導(dǎo)管癌(T4N1M1c)的患者，其癌細胞已經(jīng)轉(zhuǎn)移，且不能維持化療。作者采用了單倍體相合的NKM細胞輸注治療該患者(供體是患者的兒子)。患者接受了20–30×10^8NKM細胞，六次治療后，患者表現(xiàn)出良好的治療耐受性，并且腎盂和腹盆腹膜中轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量顯著減少（下圖C）).患者的生命體征和身體狀況明顯改善。

這些結(jié)果表明NKM細胞在癌癥患者中顯示出有效的抗腫瘤活性，NKM細胞可用于輔助癌癥治療。

NKM細胞是免疫細胞類型的混合物，包括Th細胞(抑制細胞毒性)和NK細胞(引發(fā)細胞毒性)。于是作者探索了NKM細胞是否在亞健康個體的免疫正?；斜憩F(xiàn)出更有效的功能。

共招募了四名潛在的亞健康個體，治療方案如下圖A所示。

每次治療使用大約20×10^8自體NKM細胞，一個療程注射三次，每次間隔1個月。在治療前、第一次注射后和第三次注射后測量T細胞中PD-1的表達。（作者提前定義了CD3+PD-1+細胞/PBMCs >4%和CD3+CD8+PD-1+細胞/CD3+CD8+細胞> 10%為“亞健康個體”）

從上圖，四位亞健康患者的數(shù)據(jù)統(tǒng)計情況表明，NKM可以降低PBMCs中PD-1的表達，并實現(xiàn)亞健康個體免疫系統(tǒng)的再正?；?。

作者鑒定了NKM細胞的組成并研究了它們的細胞毒性，發(fā)現(xiàn)NKM細胞對K562細胞或肝癌細胞有明顯的細胞毒性。但是，與癌癥患者體內(nèi)的癌細胞數(shù)量相比，能夠到達癌變區(qū)域的NKM細胞數(shù)量相對較少，因此抗癌效果有限。盡管該研究隊列的結(jié)果并不可靠，但顯示了NKM細胞療法潛在的輔助抗癌功能。后者可能不如使用純NK細胞的治療有效。然而，由于其易于操作和安全(較少發(fā)現(xiàn)免疫相關(guān)的副作用)，作者認為NKM細胞療法是癌癥患者的有效輔助療法，尤其是與手術(shù)結(jié)合，以改善免疫反應(yīng)和消除殘余癌細胞。

在本文定義的亞健康個體中，NKM細胞療法可以減少PBMCs中PD-1的表達，并快速恢復(fù)/重新平衡免疫系統(tǒng)。然而，對于一些個體(例如，患者C)，可能需要更多的注射或更大劑量的NKM細胞療法來降低PBMCs中的PD-1表達。

該文證明了使用NKM細胞的新方法作為癌癥患者的輔助治療以及亞健康個體的治療是安全有效的。通過NKM細胞療法使外周免疫系統(tǒng)正?；梢詳U大其在不同疾病中的應(yīng)用范圍。