一、標(biāo)本采集

　?。ㄒ唬?/span>標(biāo)本采集
　　采集標(biāo)本前應(yīng)禁欲3～5d，采前排凈尿液；將一次射出的全部精液直接排入潔凈、干燥的容器內(nèi)（不能用乳膠避孕套）。采集微生物培養(yǎng)標(biāo)本須無(wú)菌操作。

　?。ǘ?/span>標(biāo)本運(yùn)送
　　精液采集后應(yīng)立即保溫送檢（＜1h）。溫度低于20℃或高于40℃影響精子活動(dòng)。

　?。ㄈ?biāo)本采集次數(shù) 一般應(yīng)間隔1～2周檢查一次，連續(xù)檢查2～3次。

　　
　　二、理學(xué)檢查

　?。ㄒ唬?/span>精液外觀(guān)和氣味

　　1.正常
　　剛射出的精液一般為微混濁的灰白色，有一股腥味，自行液化后為半透明的乳白色。
　　2.異常
　?。?）紅色：前列腺和精囊腺炎癥、結(jié)核、腫瘤或結(jié)石等。
　?。?）黃色：前列腺炎、精囊炎等。

　?。ǘ┚毫?/span>
　　1.方法
　　通常用規(guī)格為10ml刻度吸管測(cè)定精液全量。
　　2.正常
　　一次排精量為2～6ml，平均3.5mL。
　　3.異常
　　精液量少于1ml或大于8ml，為異常，不利于生育。

（三）精液液化時(shí)間
　　新排出的精液從膠凍狀轉(zhuǎn)變?yōu)榱鲃?dòng)狀態(tài)所需的時(shí)間，室溫下正常精液排出后30分鐘內(nèi)自行液化。
　　●觀(guān)察凝固
　　●37℃水浴
　　●5min查1次至液化
　　精液超過(guò)60min仍未液化為異常，常見(jiàn)于前列腺炎。

　　（四）精液黏稠度
　　系指完全液化后的精液黏度。
　　檢測(cè)方法
　　1.直接玻棒法：將玻棒插入精液標(biāo)本，提棒時(shí)可拉起黏絲，正常精液黏絲長(zhǎng)度不超過(guò)2cm。黏稠度增加時(shí)，精液懸滴可形成長(zhǎng)于2cm的長(zhǎng)絲。
　　2.黏度計(jì)法：測(cè)定0.5ml精液通過(guò)黏度計(jì)所需的時(shí)間即為精液黏稠度。
　　3.臨床意義
　?。?）黏稠度增加：精液常伴不液化，影響精子活力。
　?。?）黏稠度下降：見(jiàn)于先天性無(wú)精囊腺及精子濃度太低或無(wú)精子癥。

（五）精液酸堿度（pH）
　　1.檢測(cè)方法
　　用精密pH試紙或酸度計(jì)測(cè)定，應(yīng)在射精后1h內(nèi)完成。
　　2.臨床意義
　　正常精液pH為7.2～7.8。
　?。?）pH值＜7.0，伴少精癥，常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變。
　?。?）pH值＞7.8，常見(jiàn)于急性前列腺炎、精囊炎或附睪炎。

　　三、化學(xué)檢査

（一）精漿果糖測(cè)定
　　1.測(cè)定方法及評(píng)價(jià)
　?、匍g苯二酚比色法（國(guó)內(nèi)常用）：9.11～17.67mmol/L；
　?、谶胚犸@色法：每次射精≥13μmol/1次射精，本法為WHO推薦方法。
　　2.臨床意義
　　①先天性精囊腺缺如，果糖為陰性。
　?、诰蚁傺讜r(shí)，果糖含量減低。
　?、墼跓o(wú)精癥和射精量少于1ml者，若精漿中無(wú)果糖為精囊阻塞；有果糖，則為射精管阻塞。
　　

（二）精漿α-葡糖苷酶測(cè)定
　　1.測(cè)定方法及評(píng)價(jià)
　　比色法可測(cè)定精漿中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法測(cè)定葡萄糖的生成量，反映α-葡糖苷酶的活性。國(guó)內(nèi)臨床上較為常用。
　　2.臨床意義
　　α-葡糖苷酶活性下降，見(jiàn)于阻塞性無(wú)精子癥，具有肯定性診斷價(jià)值。

（三）精漿乳酸脫氫酶同工酶X（LD-X）測(cè)定
　　1.測(cè)定方法及評(píng)價(jià)
　　LD-X的電泳位置在LD3-LD4之間。活性測(cè)定多采用聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯(lián)染色及光度計(jì)掃描法，求得其相對(duì)百分率。國(guó)內(nèi)臨床上較為常用。
　　2.參考值 LD-X相對(duì)活性≥42.6%。
　　3.臨床意義
　　精子發(fā)生缺陷時(shí)無(wú)LD-X形成。少精或無(wú)精者可致LD-X活性減低。
　　

（四）精漿酸性磷酸酶測(cè)定（ACP）
　　1.參考值
　　80～1000U/ml（速率法）；＞200U/1次射精
　　（β-硝基酚法）。
　　2.臨床意義
　　前列腺炎時(shí)ACP活性減低；前列腺癌和前列腺肥大時(shí)，ACP活性增高。

　　四、顯微鏡檢查

　?。ㄒ唬┩科瑱z查
　　精液液化后，取1滴混勻的精液置于載玻片上，通常在低倍鏡下粗略觀(guān)察有無(wú)精子，是活動(dòng)還是不活動(dòng)。若遇無(wú)精子癥，應(yīng)將標(biāo)本在600g下離心15min后取沉淀物重復(fù)檢查。

（二）檢測(cè)指標(biāo)

　　1.精子活動(dòng)率 對(duì)精子活力的定性檢查
　?。?）方法：取液化均勻的精液1滴置載玻片上，加蓋玻片放置片刻，在高倍鏡下觀(guān)察100個(gè)精子，計(jì)數(shù)活動(dòng)精子與不活動(dòng)精子的比例即為精子的活動(dòng)率。
　?。?）參考值：正常人精液在排精30～60min內(nèi)，精子活動(dòng)率80%～90%，應(yīng)至少＞60%。
　　

2.精子存活率 對(duì)精子存活率的觀(guān)察。
　　（1）檢測(cè)方法：取液化均勻的精液1滴置載玻片上，加等量染色液（伊紅Y、臺(tái)盼藍(lán)等）混勻，放置片刻，推成薄片，在高倍鏡下觀(guān)察計(jì)數(shù)100個(gè)精子中不著色精子與著色精子的比例，即為精子存活率。一般精子死亡后，細(xì)胞膜完整性受損，失去屏障功能，易于著色。
　?。?）參考值：有生育力男性精子存活率應(yīng)≥58%。

3.精子活動(dòng)力
　　指精子向前運(yùn)動(dòng)的能力，是直接反映精子質(zhì)量的一項(xiàng)指標(biāo)。
　　（1）檢測(cè)方法：取液化均勻精液1滴置載玻片上，蓋上蓋玻片，放置片刻，在高倍鏡下觀(guān)察5～10個(gè)視野，計(jì)數(shù)100個(gè)精子并進(jìn)行活動(dòng)力分級(jí)，以百分率表示。
　?。?）結(jié)果判斷：WH0建議將精子活動(dòng)力分為4級(jí)：a.快速前向運(yùn)動(dòng)（Ⅲ級(jí)：直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)）；b.慢或呆滯的前向運(yùn)動(dòng)（Ⅱ級(jí)：運(yùn)動(dòng)緩慢）；c.非前向運(yùn)動(dòng)（Ⅰ級(jí)：原地運(yùn)動(dòng)）；d.不動(dòng)（0級(jí)：不活動(dòng)）。
　　（3）參考值：WHO規(guī)定正常生育者精子活動(dòng)力：射精后60min內(nèi)，Ⅲ級(jí)精子應(yīng)＞25%；或Ⅲ和Ⅱ級(jí)精子的總和＞50%。
　?。?）臨床意義：精子活動(dòng)力減低，精子存活率減低，0級(jí)、Ⅰ級(jí)精子40%以上，見(jiàn)于精索靜脈曲張、泌尿生殖系感染如前列腺炎等及使用某些藥物如抗瘧藥、雌激素等。

（三）精子計(jì)數(shù)

　　指單位體積中精子數(shù)，即精子濃度。精子計(jì)數(shù)乘以1次射精量，即1次射精精子總數(shù)。
　　測(cè)定方法及評(píng)價(jià)：
　　1.粗略估計(jì)法：取液化均勻的精液1滴置載玻片上，蓋上蓋玻片，放置片刻，在高倍鏡下觀(guān)察5個(gè)視野，取每個(gè)視野的精子平均數(shù)×10⁹，即為大概精子數(shù)。該法操作簡(jiǎn)便，但只能作粗略估計(jì)。
　　2.精確計(jì)數(shù)法：
　　①血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)：只能用于精子數(shù)量觀(guān)察，不能同時(shí)進(jìn)行精子活動(dòng)率和活動(dòng)度、運(yùn)動(dòng)軌跡和速度的檢查等。
　?、贛akler精子計(jì)數(shù)板：簡(jiǎn)便、快速，精液不需要稀釋?zhuān)淮渭訕硬坏捎?jì)數(shù)精子密度，還可分析精子的活動(dòng)力和活動(dòng)率。
　?、塾?jì)算機(jī)輔助精液分析（CASA）：CASA系統(tǒng)是利用圖像和計(jì)算機(jī)視屏技術(shù)來(lái)進(jìn)行精子計(jì)數(shù)，利用CASA計(jì)數(shù)精子簡(jiǎn)單、快速，但易受精液中細(xì)胞成分和非精子顆粒物質(zhì)的影響。

　　3.參考值
　　精子總數(shù)≥39×10⁶/次
　　精子濃度≥15×10⁹/L
　　4.臨床意義
　　精子數(shù)量減低可見(jiàn)于：①精索靜脈曲張；②先天性或后天性睪丸疾病，如睪丸畸形、萎縮、結(jié)核、淋病、炎癥等；③輸精管或精囊缺如；④重金屬損害，如鉛、鎘中毒或放射性損害；⑤某些藥物，如抗癌藥等或長(zhǎng)期服用棉酚；⑥50歲以上男性精子數(shù)逐年減少。

（四）精子形態(tài)檢查

　　1.正常形態(tài)：正常精子形似蝌蚪狀，由頭、體（頸、中段）、尾三部分構(gòu)成。頭部正面呈卵圓形，側(cè)面呈扁平梨形；體部輪廓直而規(guī)則，長(zhǎng)約5～7μm，寬1μm；尾部細(xì)長(zhǎng)，一般長(zhǎng)約50～60μm。
　　2.異常形態(tài)：①頭部異常：包括大頭、小頭、錐形頭、梨形頭、無(wú)定形頭等；②體部異常：主要指腫脹和不規(guī)則；③尾部異常：包括短尾、多尾、發(fā)夾狀尾及斷尾等。
　　

　　
　　3.臨床意義
　　正常精液中異常精子應(yīng)＜20%，超過(guò)40%，即影響精液質(zhì)量，超過(guò)50%?？蓪?dǎo)致不育。感染、外傷、高溫、放射線(xiàn)、酒精中毒、藥物和精索靜脈曲張均可使畸形精子數(shù)量增加。

　　（五）其他細(xì)胞
　　1.未成熟生殖細(xì)胞
　　參考值：未成熟生精細(xì)胞＜1%。
　　臨床意義：曲細(xì)精管受損（如藥物或其他因素），精液中可出現(xiàn)較多的未成熟生精細(xì)胞。
　　2.紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞
　?。?）紅細(xì)胞（偶見(jiàn)）和白細(xì)胞：正常＜5/HP。在生殖道炎癥、結(jié)核、惡性腫瘤時(shí)，精液中紅、白細(xì)胞數(shù)可增高。
　?。?）上皮細(xì)胞：正常偶爾可見(jiàn)前列腺上皮細(xì)胞，增多見(jiàn)于前列腺增生。
　　3.癌細(xì)胞
　　精液中查見(jiàn)癌細(xì)胞對(duì)生殖系惡性腫瘤的診斷將提供重要依據(jù)。

　　
　　五、免疫學(xué)檢查
　　抗精子抗體檢查方法
　　1.混合抗免疫球蛋白試驗(yàn)（MAR）
　　2.免疫珠試驗(yàn)
　　3.精子凝集試驗(yàn)（SAT）

　　
　　六、微生物學(xué)檢查

　　
　　七、精子功能檢查 精子低滲腫脹試驗(yàn)（HOS）
　　1.檢查方法
　　將精子置入低滲溶液中，計(jì)算100～200個(gè)精子中出現(xiàn)腫脹的百分率。結(jié)果判斷：a、b、c、d、e及f型（部分尾部腫脹）；g型（全尾部腫脹）。
　　2.參考值
　　g型腫脹精子率＞50%。
　　3.臨床意義
　　精子尾部低滲腫脹試驗(yàn)可作為體外精子膜功能及完整性的評(píng)估指標(biāo)，預(yù)測(cè)精子潛在的受精能力。有研究表明，不育癥的精子尾部腫脹率明顯減低。