首先要采集一段基線，看一看波動(dòng)情況，需要一段穩(wěn)定的波動(dòng)，看看最高點(diǎn)和最低點(diǎn)之間的高度。這個(gè)就是你的儀器噪音。

然后是將你需要測(cè)定的樣品進(jìn)樣分析，當(dāng)信噪比為10的時(shí)候，這個(gè)濃度就是定量限；當(dāng)信噪比為3的時(shí)候，這個(gè)濃度就是檢測(cè)限。信噪比的意思就是信號(hào)/噪音。

比如說(shuō)，你的噪音高度大約是0.1mV，那么檢測(cè)限就是你的待測(cè)樣品逐級(jí)稀釋至 樣品峰高為0.3mV時(shí)樣品的濃度，定量限則是峰高為1.0mV時(shí)的樣品濃度。
你可以選擇線性最小濃度的樣品進(jìn)樣，假設(shè)它的濃度是10ug/ml，進(jìn)樣后主峰峰高是10mV，那么你的定量限濃度大約是這個(gè)濃度稀釋10倍，也就是1ug/ml。而檢測(cè)限濃度則需要這個(gè)濃度再稀釋3倍，大約是0.3ug/ml

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用[1]  。

高效液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn)：

①高壓：流動(dòng)相為液體，流經(jīng)色譜柱時(shí)，受到的阻力較大，為了能迅速通過(guò)色譜柱，必須對(duì)載液加高壓。

②高速：分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個(gè)樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時(shí)。

③高效：分離效能高?？蛇x擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

④高靈敏度：紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。

⑤應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。

⑥柱子可反復(fù)使用：用一根柱子可分離不同化合物

⑦樣品量少、容易回收：樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。

此外高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長(zhǎng)，相互補(bǔ)充。高效液相色譜的缺點(diǎn)是有“柱外效應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測(cè)器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管和檢測(cè)池等）中，如果流動(dòng)相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯留都會(huì)顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。高效液相色譜檢測(cè)器的靈敏度不及氣相色譜。