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編者按：生命體的很多疾病無論大小，都與炎癥有關，這些炎癥性疾病治不好，易復發(fā)，反反復復，永遠無法擺脫，比如鼻炎、關節(jié)炎、婦科炎癥和慢性疼痛等疾病，時好時壞，如影隨形。 急性炎癥原本是機體對損傷或感染做出的一種防御性保護措施，但是長期的慢性炎癥，卻與許多慢性疾病息息相關，如心臟病、自身免疫性疾病、帕金森癥、阿爾茲海默氏病、肌肉關節(jié)疼痛和僵硬、疲勞頭疼等等。 炎癥的發(fā)生與NLRP3炎癥小體密切相關，NLRP3炎癥小體被稱為炎癥反應的核心，是一組蛋白復合物，參與多種自身免疫性疾病的發(fā)生。近年來，慢性炎癥疾病中NLRP3炎癥小體的活化和調(diào)控機制成為研究熱點和國自然資助的重點方向。 今天帶來的文獻來自山東大學藥學院化學生物學教育部重點實驗室于2021年6月10日發(fā)表在Endocrine-Related Cancer上題為“Microglial NLRP3 inflammasomeactivation-mediated inflammation promotes prolactinoma development”的文章，即小膠質(zhì)細胞 NLRP3 炎癥小體激活介導的炎癥促進催乳素瘤的發(fā)展。
泌乳素瘤的發(fā)病機制尚不清楚。25% 的泌乳素瘤患者在臨床上對多巴胺受體激動劑的治療沒有反應。因此，揭示泌乳素瘤的發(fā)病機制和開發(fā)新的治療方法非常重要。該研究首次報道了小膠質(zhì)細胞 NLRP3 炎癥小體激活介導的 IL1B 相關垂體炎癥促進了催乳素瘤的發(fā)展（機制圖）。對 NLRP3 炎癥小體作用的理解為治療催乳素瘤提供了一個新的治療靶點。 分子機制圖
1. ES大鼠模型成功構建，下垂體體積升高 MRI檢測和觀察顯示，雌二醇誘導的催乳素瘤大鼠垂體體積顯著升高，表明催乳素瘤模型成功建立（圖1A和B）。 圖1 2. 雌二醇誘導的催乳素瘤大鼠垂體的炎癥狀態(tài)和NLRP3炎性體增加 PET/CT檢測顯示，雌二醇誘導的催乳素瘤大鼠腦垂體TSPO表達顯著增加，表明炎癥加重（圖2A和B）。圖2C顯示四只對照組和四只模型大鼠的腦垂體 mRNA微陣列分析的熱圖和散點圖，紅點代表上調(diào)基因，綠點代表下調(diào)基因。催乳素瘤模型大鼠腦垂體的先天免疫反應基因顯著上調(diào)（圖 2D）。 WB結(jié)果顯示雌二醇誘導的催乳素瘤大鼠垂體PRL蛋白顯著升高，NLRP3、Caspase-1 p45、Caspase-1 p20、ASC、Pro-IL1B、 IL1B p17和 IL18d的蛋白表達顯著增加（圖 2E 和 F）。 ELISA結(jié)果顯示PRL水平顯著升高（圖2G），免疫熒光顯示NLRP3 蛋白過表達（圖 2H）。 圖2 3. NLRP3 與 IBA-1 蛋白在人泌乳素瘤標本的小膠質(zhì)細胞中共同定位 免疫組織化學（IHC）檢測 NLRP3 在人腦垂體和催乳素瘤組織的 25 個正常組織組中的表達，結(jié)果顯示 NLRP3 在人催乳素瘤組織中過表達，而在正常垂體組織中顯著降低（圖 3A 和 B）。免疫熒光 (IF) 顯示 NLRP3 與五個人類催乳素瘤樣本中的小膠質(zhì)細胞標記物 IBA-1 蛋白共存（圖 3C）。與垂體腺正常組織相比，催乳素瘤微環(huán)境包括增加的IBA-1+細胞數(shù)和增加的NLRP3表達（圖 3D）。 圖3 4. NLRP3敲除抑制催乳素瘤小鼠垂體腫瘤過度生長和PRL表達和分泌 與WT小鼠相比，雌二醇誘導的催乳素瘤小鼠的垂體重量/體重、垂體PRL蛋白和血清PRL水平顯著增加，同時NLRP3、Caspase-1 p20、IL1B p17和 IL18蛋白升高。此外，與雌二醇誘導的催乳素瘤小鼠相比，雌二醇誘導NLRP3-/-小鼠的垂體重量/體重、垂體PRL蛋白表達和血清PRL水平顯著降低，同時 NLRP3、Caspase-1 p20、IL1B p17和 IL18蛋白減少。與NLRP3-/-小鼠相比，雌二醇誘導的NLRP3-/-小鼠組的垂體重量/體重、垂體PRL蛋白表達和血清PRL水平無顯著變化。（圖4A-F)。 圖4 與WT小鼠相比，垂體重量/體重、垂體PRL蛋白表達和血清PRL水平隨著NLRP3、Caspase-1 p20 、IL1B p17和 IL18的蛋白升高而明顯升高。此外，與DRD2-/-小鼠相比，DRD2-/-NLRP3-/-小鼠的垂體重量/體重、垂體PRL蛋白和血清PRL水平顯著降低，以及NLRP3、Caspase-1 p20、IL1B p17和 IL18的蛋白減少。與NLRP3-/-小鼠相比，DRD2-/-NLRP3-/-小鼠垂體重量/體重、垂體PRL蛋白表達和血清PRL水平無顯著變化（圖5A-F）。 圖5 5. NLRP3炎性體激活促進GH3細胞中PRL的表達和分泌 與未刺激的GH3細胞相比，LPS-，LPS和MSU-，LPS和ATP-，以及LPS和Ni刺激的細胞中細胞裂解物的PRL蛋白表達顯著增加，同時伴隨NLRP3炎癥小體激活介導的IL1B過表達（圖6A），這與培養(yǎng)上清液中的PRL 蛋白水平相同（圖6B）。使用不同濃度的MCC950 抑制 GH3 細胞中的 NLRP3 炎癥小體，結(jié)果顯示在LPS和Ni刺激細胞的培養(yǎng)上清液（圖6C）和細胞裂解物（圖6D）中MCC950抑制PRL的升高，而介導IL1B表達的NLRP3炎性體顯著降低。免疫熒光顯示，NLRP3 蛋白與 GH3 細胞中的 IBA-1 蛋白位于同一位置。與對照細胞相比，用LPS和Ni處理的細胞中NLRP3蛋白和IBA-1蛋白表達顯著增加，而MCC950（10μM）處理可逆轉(zhuǎn)這種情況（圖6E）。
圖6 6. MCC950抑制催乳素瘤大鼠垂體瘤過度生長和PRL表達和分泌 與對照大鼠相比，雌二醇誘導的催乳素瘤大鼠的垂體重量/體重、垂體PRL蛋白和血清PRL水平顯著升高，NLRP3、Caspase-1 p20、IL1B p17和 IL18蛋白升高。此外，與雌二醇誘導的催乳素瘤大鼠相比，施用 MCC950 (20 mg/kg) 的催乳素瘤大鼠的垂體重量/體重、垂體PRL蛋白表達和血清PRL水平顯著降低，NLRP3、Caspase-1 p20、IL1B p17和 IL18蛋白降低（圖 7-E）。
圖7
2022年的國自然申請準備工作已經(jīng)開始啟動了，如果您關注的臨床問題與心臟病、自身免疫性疾病、疼痛、腫瘤等慢性疾病相關，在考慮研究思路的時候，不妨從慢性炎癥的角度出發(fā)，而提到炎癥，要記得關注“NLRP3炎性小體”的重要作用，從炎性小體的上下游出發(fā)與細胞焦亡等研究熱點關聯(lián)拓展新思路，小編認為也是不錯的一個標書方向。 2021年度國自然醫(yī)學部國自32大科研熱點的中標數(shù)統(tǒng)計如下：
 學術查 關注國自然32大熱點，協(xié)助圖像查重，解讀高分文章，分享實驗技巧，反對科研內(nèi)卷。 313篇原創(chuàng)內(nèi)容 公眾號 其他精彩文章↓↓↓ |
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