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君安醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)

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       君安醫(yī)學(xué)細(xì)胞平臺(tái)長期致力于細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展，為進(jìn)一步推廣漿膜腔積液、腦脊液、支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，使其操作規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，經(jīng)全國多位從事該領(lǐng)域研究的專家共同商討，根據(jù)國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室發(fā)展情況，并參考國內(nèi)外大量文獻(xiàn)，制定出漿膜腔積液、腦脊液、支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)與診斷技術(shù)專家共識(shí)。該共識(shí)由君安醫(yī)學(xué)細(xì)胞平臺(tái)獨(dú)家發(fā)布，不足之處，敬請(qǐng)指正。

腦脊液是充滿在各腦室、蛛網(wǎng)膜下腔和脊髓中央管內(nèi)的一種無色透明體。腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病、腦膜癌病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤及腦血管病等疾病的診斷、鑒別診斷、療效觀察和預(yù)后評(píng)估等有重要的參考價(jià)值。為進(jìn)一步推廣腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)，使其操作規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，經(jīng)國內(nèi)多位從事該領(lǐng)域研究的君安醫(yī)學(xué)細(xì)胞平臺(tái)專家共同商討，制定出腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)專家共識(shí)。

檢查患者腦脊液中各種細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)和比例的變化，分析腦脊液細(xì)胞學(xué)反應(yīng)類型，結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、影像檢查和實(shí)驗(yàn)室相關(guān)檢查結(jié)果等綜合分析，做出細(xì)胞學(xué)診斷,為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別診斷、治療效果和預(yù)后評(píng)估提供檢驗(yàn)診斷依據(jù)。

腦脊液標(biāo)本主要通過腰椎穿刺術(shù)獲得。為避免或減少血液混入對(duì)腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類造成的影響，一般采用第三管腦脊液用于細(xì)胞計(jì)數(shù)及細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，標(biāo)本量不少于2ml為宜。推薦使用腰穿包內(nèi)帶蓋的無菌塑料試管作為采集容器，避免使用真空采血試管或痰杯等容器送檢。

原則上，腦脊液標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，一般不超過1h，室溫保存。如標(biāo)本不能及時(shí)送檢，可置4～8℃冰箱暫時(shí)保存，2h內(nèi)送檢。

標(biāo)本送達(dá)檢驗(yàn)科后，工作人員核對(duì)標(biāo)本相關(guān)信息，檢查采集容器是否符合要求，是否有滲漏，標(biāo)本量是否足夠。標(biāo)本接收后應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢驗(yàn)，久置可致細(xì)胞破壞，影響細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類；對(duì)于部分不合格標(biāo)本(如標(biāo)本容器選擇錯(cuò)誤、標(biāo)本量小于1ml、送檢不及時(shí)等情況），可執(zhí)行讓步接收和讓步檢驗(yàn)，及時(shí)與臨床進(jìn)行溝通，并在報(bào)告單上中備注說明標(biāo)本狀況對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響。

5.1 理學(xué)檢查 包括腦脊液外觀、透明度、球蛋白定性等。

5.2 細(xì)胞計(jì)數(shù) 包括細(xì)胞總數(shù)、有核細(xì)胞計(jì)數(shù)及紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等，計(jì)數(shù)結(jié)果以×10⁶/L 單位報(bào)告。

5.3 制片 推薦采用細(xì)胞玻片離心法進(jìn)行細(xì)胞及其他有形成分的收集。每次制片取混勻后的腦脊液約500微升（細(xì)胞數(shù)較多時(shí)，可適當(dāng)減少用量），離心速度800rpm，離心時(shí)間8～10min。試管離心沉淀后取沉淀物涂片的方法不適用于腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查。

5.4 染色 瑞-吉染色為腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的常規(guī)染色方法，必要時(shí)加做其它染色法，如墨汁染色、革蘭氏染色、抗酸染色、普魯士藍(lán)染色等。

5.5 閱片 低倍鏡下快速瀏覽全片，結(jié)合常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果，判斷涂片細(xì)胞收集效果是否滿意。如收集效果不滿意，應(yīng)重新制片。低倍鏡下觀察有無異常細(xì)胞或病原成分，發(fā)現(xiàn)異常成分時(shí)轉(zhuǎn)油鏡下進(jìn)一步確認(rèn)和識(shí)別。

5.6 細(xì)胞分類 在油鏡下進(jìn)行有核細(xì)胞分類，結(jié)果以百分比形式表示。如全片有核細(xì)胞數(shù)不足50個(gè)，可以“全片可見有核細(xì)胞多少個(gè)，其中**細(xì)胞多少個(gè)”的形式進(jìn)行描述。

細(xì)胞學(xué)報(bào)告推薦采用圖文報(bào)告形式，內(nèi)容包括常規(guī)、細(xì)胞學(xué)和實(shí)驗(yàn)室提示三部分。

6.1 常規(guī)部分 包括顏色、透明度、球蛋白定性、細(xì)胞總數(shù)、有核細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及有核細(xì)胞分類等。

6.2 細(xì)胞學(xué)部分 包括圖像和形態(tài)學(xué)描述。用圖像采集系統(tǒng)在鏡下選擇2～4幅有代表性的圖片進(jìn)行報(bào)告。對(duì)細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)進(jìn)行必要的形態(tài)描述，包括細(xì)胞分布、細(xì)胞大小、胞核大小、核形、核染色質(zhì)特點(diǎn)、核仁大小與數(shù)量、胞質(zhì)顏色及內(nèi)容物等。同時(shí)報(bào)告其他異常成分，如細(xì)菌、真菌及菌絲、寄生蟲、結(jié)晶等。

6.3 實(shí)驗(yàn)室提示 根據(jù)細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)，結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、影像檢查及實(shí)驗(yàn)室檢查相關(guān)結(jié)果綜合分析，向臨床提供合理性提示和建議。

報(bào)告發(fā)出后，對(duì)涂片進(jìn)行分類歸檔，妥善保管，保存時(shí)限按各實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行處置，一般保存3～5年。

8.1 標(biāo)本的采集、運(yùn)送必須符合生物安全要求，防止溢出。如標(biāo)本溢出后，應(yīng)立即對(duì)污染的環(huán)境和設(shè)備進(jìn)行消毒處理。

8.2 檢驗(yàn)人員在處理標(biāo)本時(shí)，需做好個(gè)人防護(hù)，嚴(yán)格執(zhí)行生物安全管理程序，對(duì)有明確傳染性的標(biāo)本按級(jí)別進(jìn)行防護(hù)。

8.3 廢棄標(biāo)本及其它相關(guān)的廢棄物，嚴(yán)格執(zhí)行醫(yī)療廢物處理流程。

9.1 常見細(xì)胞及臨床意義

9.1.1 紅細(xì)胞 正常腦脊液中不存在紅細(xì)胞。腦脊液中出現(xiàn)紅細(xì)胞，見于各種原因引起的出血，如腦出血（病理性）、蛛網(wǎng)膜下腔出血（病理性）及腰穿損傷出血（非病理性）等。

9.1.2 淋巴細(xì)胞 正常腦脊液中有少量的淋巴細(xì)胞，約占有核細(xì)胞總數(shù)的60%～70%。受抗原刺激后，淋巴細(xì)胞形態(tài)和功能可發(fā)生改變，按形態(tài)學(xué)分為小淋巴細(xì)胞、大淋巴細(xì)胞、激活淋巴細(xì)胞等。

9.1.3 漿細(xì)胞 正常腦脊液中不存在漿細(xì)胞。漿細(xì)胞的出現(xiàn)，提示體液免疫反應(yīng)的存在。

9.1.4 單核細(xì)胞 正常腦脊液中有少量的單核細(xì)胞，形態(tài)與外周血中單核細(xì)胞相似，約占有核細(xì)胞總數(shù)的30%～40%，與淋巴細(xì)胞的比例為4∶6或3∶7。疾病狀態(tài)下，單核細(xì)胞受到抗原或各種理化因素的刺激時(shí)，形態(tài)會(huì)發(fā)生變化，表現(xiàn)為胞體、胞核增大，胞膜不規(guī)整，可有瘤狀突起，胞質(zhì)著色加深，胞質(zhì)出現(xiàn)多個(gè)空泡，稱為激活單核細(xì)胞。

9.1.5 中性粒細(xì)胞 正常腦脊液中不存在中性粒細(xì)胞，但外周血中的中性粒細(xì)胞可因腰椎穿刺損傷隨紅細(xì)胞帶入，應(yīng)予識(shí)別。中性粒細(xì)胞的出現(xiàn)提示機(jī)體存在炎癥反應(yīng)，常見于各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，無診斷特異性；也可見于顱腦外傷、顱腦術(shù)后、腫瘤、腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血等。

9.1.6 嗜酸性粒細(xì)胞 正常腦脊液中不存在嗜酸性粒細(xì)胞。嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量或比例明顯增多時(shí)，提示機(jī)體存在過敏反應(yīng)或寄生蟲感染的可能。

9.1.7 嗜堿性粒細(xì)胞 正常腦脊液中不存在嗜堿性粒細(xì)胞，它的出現(xiàn)提示存在過敏反應(yīng)，可見于各種炎癥、異物反應(yīng)、寄生蟲感染等，無診斷特異性。

9.1.8 吞噬細(xì)胞 正常腦脊液中不存在吞噬細(xì)胞。紅細(xì)胞吞噬細(xì)胞、含鐵血黃素吞噬細(xì)胞及膽紅素吞噬細(xì)胞的出現(xiàn)提示陳舊性出血。吞噬細(xì)胞吞噬功能強(qiáng)大，可吞噬各種異物，包括變性的白細(xì)胞、吞噬細(xì)胞和病原體等。

9.1.9 脫落細(xì)胞 各種原因?qū)е履X室中的室管膜細(xì)胞、脈絡(luò)叢細(xì)胞及蛛網(wǎng)膜下腔中的蛛網(wǎng)膜細(xì)胞脫落時(shí)，可在腦脊液中偶然發(fā)現(xiàn)，無診斷特異性。

9.1.10 腫瘤細(xì)胞 腦脊液中的腫瘤細(xì)胞來源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤和繼發(fā)性腫瘤。前者可見于惡性程度較高的髓母細(xì)胞瘤、膠質(zhì)瘤、生殖細(xì)胞瘤、室管膜瘤和腦膜瘤等；后者常見于肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、胃癌、白血病及淋巴瘤等向中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移。

9.2 常見細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)及臨床意義

9.2.1 正常腦脊液細(xì)胞學(xué)表現(xiàn) 外觀呈無色透明，白細(xì)胞數(shù)不高于5╳10⁶/L，由淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞組成，兩者比值為7∶3或6∶4，細(xì)胞形態(tài)規(guī)整，無明顯的細(xì)胞激活表現(xiàn)。

9.2.2 淋巴細(xì)胞反應(yīng)型 有核細(xì)胞計(jì)數(shù)可正?；蝻@著升高，鏡下可見淋巴細(xì)胞比例明顯增多，可見激活淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞及少量單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等。臨床意義：常見于病毒性腦膜炎，也可見于其它中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病、免疫性疾病和腫瘤。

9.2.3 中性粒細(xì)胞反應(yīng)型 有核細(xì)胞數(shù)中度至顯著升高，鏡下可見大量的中性粒細(xì)胞，可伴少量淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞或漿細(xì)胞，有時(shí)可見病原菌。臨床意義：提示急性炎性反應(yīng)，見于細(xì)菌性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎滲出期，也可見于腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血及顱腦手術(shù)后等非急性炎性反應(yīng)。

9.2.4 嗜酸性粒細(xì)胞-漿細(xì)胞反應(yīng)型 有核細(xì)胞數(shù)可正?；蜉p中度升高，鏡下可見嗜酸性粒細(xì)胞和漿細(xì)胞比例明顯升高，常伴少量淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等。臨床意義：常見于腦寄生蟲感染，也可見于結(jié)核性腦膜炎、隱球菌性腦膜炎、顱腦手術(shù)后及蛛網(wǎng)膜下腔出血病患者。

9.2.5 淋巴-單核細(xì)胞反應(yīng)型 有核細(xì)胞數(shù)基本正?；蜉p度增高，鏡下可見少量淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞，部分淋巴及單核細(xì)胞可見激活表現(xiàn)。臨床意義：多見于疾病的恢復(fù)期，需與先前的細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)進(jìn)行比較分析。

9.2.6 淋巴-中性粒細(xì)胞反應(yīng)型 有核細(xì)胞數(shù)中度至顯著升高，鏡下可見中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞明顯增多，偶見單核細(xì)胞或漿細(xì)胞等。臨床意義：提示炎性反應(yīng)。多見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌感染治療后、結(jié)核性腦膜炎、真菌感染和顱腦術(shù)后等，需結(jié)合病史、患者臨床癥狀及體征和實(shí)驗(yàn)室相關(guān)檢查結(jié)果綜合考慮。

9.2.7 混合細(xì)胞反應(yīng)型 有核細(xì)胞數(shù)中度至顯著升高，鏡下可見中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等多種細(xì)胞同時(shí)存在，以中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞為主，也可伴少量漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞的出現(xiàn)。臨床意義：提示炎性反應(yīng)，與淋巴-中性粒細(xì)胞反應(yīng)型臨床意義基本一致。多見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌感染治療后、結(jié)核性腦膜炎、真菌感染和顱腦術(shù)后等，需結(jié)合病史、患者臨床癥狀及體征和實(shí)驗(yàn)室相關(guān)檢查結(jié)果綜合考慮。部分結(jié)核性腦膜炎患者抗結(jié)核治療后，在相當(dāng)長一段時(shí)間內(nèi)細(xì)胞學(xué)可表現(xiàn)為混合細(xì)胞反應(yīng)型，這一特點(diǎn)對(duì)診斷結(jié)核性腦膜炎具有一定的參考價(jià)值。

10.1 粟秀初，孔繁元.神經(jīng)系統(tǒng)臨床腦脊液細(xì)胞學(xué).北京：人民軍醫(yī)出片社，2001.

10.2 何俊瑛，孔繁元，郭力.臨床腦脊液細(xì)胞學(xué).石家莊：河北科學(xué)技術(shù)出版社，2007.

10.3 尚紅，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第4版，北京：人民衛(wèi)生出版社，2015.

10.4 張國軍.腦脊液臨床實(shí)驗(yàn)室檢查策略.北京：人民衛(wèi)生出版社，2018.

10.5 WS/T 662-2020 臨床體液檢驗(yàn)技術(shù)要求

10.6 龔道元，張時(shí)民，黃道連.臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)形態(tài)學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，2019.

10.7 吳茅.漿膜積液細(xì)胞圖譜新解及病例分析.北京：人民衛(wèi)生出版社，2018.

10.8 張紀(jì)云，龔道元.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)（第五版）.北京：人民衛(wèi)生出版社，2019.

10.9 王建中，張時(shí)民，劉貴建，等.臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)圖譜.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012.

10.10 彭明婷.臨床血液與體液檢驗(yàn).北京:人民衛(wèi)生出版社，2017.

曹 科（深圳市兒童醫(yī)院）

竇心靈（酒泉市人民醫(yī)院）

丁邦勝（中科大一附院（安徽省立醫(yī)院））

段愛軍（河南信合醫(yī)院）

樊愛琳（附屬西）

高菊興（ 臨沂市人民醫(yī)院）

顧劍飛（復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院）

高建軍（河北邯鄲市第一醫(yī)院）

高海燕（哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院）

黃道連（南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山市博愛醫(yī)院）

何 勇（湖南保靖縣人民醫(yī)院）

黃 ?。ǔ啥际械谌嗣襻t(yī)院-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部）

胡  晶（重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院）

蔣錦文（浙江省東陽市人民醫(yī)院）

金鑫（浙江省立同德醫(yī)院）

盧興國（浙江大學(xué)附屬第二醫(yī)院）

李相磊（開封市中心醫(yī)院）

劉超群（金華市中醫(yī)醫(yī)院）

梁 勤（甘肅省中醫(yī)院）

林慧君（浙江省人民醫(yī)院）

繆 峰（原山東省寄生蟲病防治研究所）

潘  ?。ê｛}縣人民醫(yī)院）

茹進(jìn)偉（樂昌市人民醫(yī)院）

孫宏華（中山大學(xué)附屬第七醫(yī)院（深圳））

吳 茅（浙江省人民醫(yī)院）

王敏敏（杭州市第一人民醫(yī)院）

王哲（河北省保定第一醫(yī)院）

許紹強(qiáng)（廣東三九腦科醫(yī)院）

夏萬寶（上海市松江區(qū)中心醫(yī)院）

邢銘芬（湖州市南潯區(qū)人民醫(yī)院）

許銀懷（河南省濮陽市疾病預(yù)防控制中心）

岳保紅（鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院、鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系）

閆立志（內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院）

張時(shí)民（北京協(xié)和醫(yī)院）

張建富（江蘇省人民醫(yī)院，南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

曾強(qiáng)武（貴州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

趙成艷（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院）

朱鳳嬌（浙大一院三門灣分院）

莊順紅（浙江省金華市中心醫(yī)院）

周道銀（上海長海醫(yī)院）

周玉利（杭州市第一人民醫(yī)院）

鄭智弦（梧州市紅十字會(huì)醫(yī)院）

周麟（諸暨市中醫(yī)醫(yī)院）

鄭  瑞（浙江省臺(tái)州醫(yī)院）

三、執(zhí)筆：閆立志

四、主審：許紹強(qiáng)  周道銀  吳茅  張時(shí)民  黃道連  樊愛琳  段愛軍

五、定稿會(huì)   

江蘇南京，2020年7月17～19日