Synaffix BV是荷蘭一家生物技術(shù)公司，專注于開發(fā)抗體偶聯(lián)藥物(ADC)技術(shù)以成為同類最佳（best-in-class），先后與ADC Therapeutics、Mersana Therapeutics和中國上海美雅珂等多家企業(yè)達(dá)成多項(xiàng)技術(shù)合作協(xié)議，將Synaffix的ADC專利技術(shù)用于開發(fā)抗體偶聯(lián)藥物。

ADC Therapeutics、Mersana Therapeutics在ADC藥物領(lǐng)域也頗受矚目，上海美雅珂的ADC產(chǎn)品也已經(jīng)處于臨床或臨床前研究。這些企業(yè)中，不乏擁有自己的ADC專利技術(shù)，然而，是什么原因促使他們紛紛與Synaffix達(dá)成合作，甚至不惜放棄自己的專利技術(shù)？讓我們從公開的信息、專利和產(chǎn)品中一探究竟。

根據(jù)公開信息顯示，GlycoConnect?作為一種偶聯(lián)技術(shù)，能夠利用天然糖基化位點(diǎn)實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)偶聯(lián)。Synaffix從2014年開始，逐步有涉及ADC的技術(shù)專利公開，并先后獲得授權(quán)，包括已經(jīng)進(jìn)入中國的同組專利CN105142672，在該專利中具體詳述了經(jīng)修飾的抗體、抗體-綴合物及其制備方法。此外，其他同族專利，如CN107108454、CN105829543、CN107810273、CN108883191等也處于審查之中，這些專利都涉及糖蛋白修飾和抗體-綴合物制備，因此，不妨從中窺探GlycoConnect?技術(shù)。

首先，對(duì)于修飾抗體，Synaffix的專利中披露了一種利用內(nèi)切糖苷酶對(duì)N-乙酰葡糖胺的抗體聚糖進(jìn)行去糖基化，得到包含N-乙酰葡糖胺取代基的抗體。其中，N-乙酰葡糖胺取代基可以被巖藻糖基化，而N-乙酰葡糖胺取代基通過N-糖苷鍵鍵合至抗體天冬酰胺氨基酸側(cè)鏈中的酰胺氮原子。類似的，形成了Synaffix專利技術(shù)平臺(tái)中描述的“Trim”。

來源：Synaffix網(wǎng)站

正如Synaffix網(wǎng)站對(duì)技術(shù)的介紹那樣，GlycoConnect?采用第一種酶修剪聚糖，第二種酶安裝專有的小分子底物，該底物帶有在隨后偶聯(lián)過程中發(fā)揮作用的功能性手柄。對(duì)于第二種酶，就是專利中談到的β-（1,4）-N-乙酰半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶或包含其催化域的突變體。具體來說，就是使包含含有末端N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）取代基的抗體與糖衍生物核苷酸Su（A）-Nuc在半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶催化下連接。

同樣，類似地形成了技術(shù)平臺(tái)中描述的“Tag”。而在早期的專利中，Su（A）-Nuc布局的取代種類有多種形式，包括疊氮基、酮基、炔基、巰基及其前體、鹵素、磺酰胺基等。而在專利之外，GlycoConnect?技術(shù)在這一位置現(xiàn)在主要采用疊氮基的骨架結(jié)構(gòu)，基于疊氮化物的酶底物保留了通過點(diǎn)擊化學(xué)偶聯(lián)的高反應(yīng)活性和選擇性，同時(shí)提供了由反應(yīng)過程中形成的芳香族穩(wěn)定的三唑連接基，從而改善ADC的安全性和功效。

Su（A）-Nuc取代實(shí)例

產(chǎn)品演示：ADC therapeutics

可以說，GlycoConnect?作為一種偶聯(lián)技術(shù)，通過兩種酶催化實(shí)現(xiàn)了天然抗體聚糖的定點(diǎn)偶聯(lián)，并引入“功能性手柄”。尤其功能性手柄，使DAR1、DAR2或DAR4等不同需求的格式化定制成為可能。

HydraSpace?是一種具有高極性間隔子的ADC技術(shù)，Synaffix認(rèn)為該技術(shù)可以改善ADC穩(wěn)定性、增加有效載荷溶解度、提高偶聯(lián)的效率和速度，具備的分支能力可提高藥物載量以及實(shí)現(xiàn)兩種作用機(jī)制的ADC藥物。

其實(shí)，Synaffix公司最早的ADC專利技術(shù)布局，就是這一領(lǐng)域。2014年，Synaffix公司網(wǎng)站披露，核心專利分別獲得美國和歐盟授權(quán)，這項(xiàng)專利就是描述了具體與GlycoConnect?技術(shù)產(chǎn)生的抗體修飾物結(jié)合的化合物和技術(shù)。

來源：WO2011136645

環(huán)丙烷環(huán)辛炔（BCN,上圖Ⅱa骨架）可以用來進(jìn)行非金屬催化的點(diǎn)擊反應(yīng)（click reaction），該反應(yīng)由美國諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)獲得者K. Barry Sharpless提出，具有化學(xué)選擇性高、產(chǎn)率高、反應(yīng)速度快等優(yōu)勢(shì)。BCN可以與疊氮基團(tuán)進(jìn)行環(huán)加成反應(yīng)，這類反應(yīng)已經(jīng)成為生物分子（如蛋白質(zhì)、聚糖等）的生物標(biāo)記和成像、蛋白質(zhì)組學(xué)等中的通用手段。當(dāng)然，Synaffix公司的專利布局中也不止BCN一種分子片段，但反應(yīng)原理是一致的。

概括性來說，GlycoConnect?和HydraSpace?已經(jīng)組成了ADC藥物生產(chǎn)技術(shù)基石，Synaffix公司的toxSYN?技術(shù)屬于毒素/載荷領(lǐng)域內(nèi)容，各家公司也有不同考量和應(yīng)用，在此不再展開。綜上，利用專利圖示可以進(jìn)一步清晰解釋GlycoConnect?和HydraSpace?的技術(shù)應(yīng)用。

針對(duì)特定抗體（如：cAC10、伊妥木單抗），在內(nèi)切酶的催化下，將經(jīng)過半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶催化生成的分子片段2（GalNAc-T）定點(diǎn)偶聯(lián)至抗體上，分子片段2可以經(jīng)過巖藻糖修飾（a=1）。隨后，在連接了毒素/載荷的BCN官能團(tuán)通過非金屬催化的點(diǎn)擊反應(yīng)與抗體綴合物中片段分子2的疊氮基團(tuán)反應(yīng)，形成一種ADC藥物。

對(duì)于ADC藥物DAR比值的優(yōu)化，也主要集中在HydraSpace?和Linker上的操作。比如，在專利描述中，通過化學(xué)合成手段，可以實(shí)現(xiàn)DAR1、DAR2或DAR4的選擇；也能夠通過選擇性化學(xué)合成順序?qū)崿F(xiàn)不同機(jī)制分子與BCN類官能團(tuán)的連接。

在表現(xiàn)形式上，就實(shí)現(xiàn)了Synaffix網(wǎng)站的演示結(jié)果。

在技術(shù)應(yīng)用上，GlycoConnect?和HydraSpace?也不是完全必須同時(shí)采用，也是可以基于應(yīng)用場景選擇性使用。

在合作中，雖然進(jìn)行了授權(quán)，但ADC Therapeutics、Mersana Therapeutics似乎也在進(jìn)行技術(shù)的優(yōu)化和升級(jí)；不過，產(chǎn)品的外在表現(xiàn)上，仍然具有一定的相通性。ADC Therapeutics，作為近期成功將首個(gè)CD19抗體偶聯(lián)藥物推向市場的企業(yè)，可以說應(yīng)該也是具有了自己獨(dú)特的ADC技術(shù)見解；然而，在實(shí)體瘤領(lǐng)域，公開的信息顯示，ADC Therapeutics更多的應(yīng)用了Synaffix的ADC技術(shù)。

Mersana Therapeutics的多個(gè)臨床產(chǎn)品也具有相似的技術(shù)特征。同時(shí)，Mersana 也有多個(gè)自己的ADC技術(shù)平臺(tái)，包括Dolaflexin，該平臺(tái)利用其專有的可生物降解、高度生物相容的水溶性聚合物Fleximer，能夠?qū)崿F(xiàn)攜帶多個(gè)藥物分子，藥物分子通過優(yōu)化的可裂解的接頭連接至Fleximer支架，而不是直接與抗體偶聯(lián)，然后通過不可裂解的接頭與抗體偶聯(lián)。

隨著ADC技術(shù)的發(fā)展，ADC藥物也在持續(xù)突破。從應(yīng)用上來說，不同的ADC技術(shù)和平臺(tái)，形成了互補(bǔ)。根據(jù)特定的疾病領(lǐng)域和具體靶標(biāo)，可以選擇合適的ADC技術(shù)或產(chǎn)品策略，從而實(shí)現(xiàn)提高療效、降低毒性等目的。

即使通過授權(quán)引進(jìn)ADC技術(shù)，也可以持續(xù)進(jìn)行優(yōu)化和升級(jí)?；蛟S，這也是ADC Therapeutics、Mersana Therapeutics等引進(jìn)Synaffix公司ADC技術(shù)的考量。

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