譚張奎¹， 周廣文¹， 張妍¹， 朱偉¹， 吳小雪²， 熊夢欣¹， 黃詩怡¹， 向楠^3*

（1.湖北中醫(yī)藥大學 中醫(yī)臨床學院，武漢 430065；2.湖北省婦幼保健院，武漢 430065；3.湖北中醫(yī)藥大學 第一臨床學院，武漢 430065）

［摘要］  目的：研究補腎化痰方在防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中對免疫T細胞亞群輔助性T細胞17（Th17）/調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）平衡的影響。方法：6月齡SD雌性大鼠60只，按隨機數(shù)字表分為假手術(shù)組，模型組，戊酸雌二醇組（0.184 mg·kg^-1），補腎化痰方低、中、高劑量組（4.7，9.4，18.8 g·kg^-1），除假手術(shù)組外，其他組均采用手術(shù)切除卵巢，制作絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型。術(shù)后1周灌胃給藥，模型組和假手術(shù)組以等體積的生理鹽水灌胃，1次/d，灌胃12周后取材。運用微計算機斷層掃描技術(shù)（Micro CT）檢測大鼠骨量及骨微結(jié)構(gòu)；采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測血清中叉頭框蛋白p3（Foxp3），維甲酸相關(guān)核孤受體γt（RORγt）含量；實時熒光定量聚合酶鏈式反應（Real-time PCR）檢測骨組織中Foxp3，RORγt mRNA表達，蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測骨組織中Foxp3，RORγt蛋白表達量；運用流式細胞抗原檢測，分析并比較各組Th17，Treg細胞的數(shù)量。結(jié)果：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠骨量降低、骨小梁顯著減少（P<0.01）；骨微結(jié)構(gòu)破壞，血清中Foxp3濃度顯著降低，RORγt濃度顯著升高（P<0.01），骨組織中Foxp3 mRNA及蛋白表達降低，RORγt mRNA及蛋白表達顯著升高（P<0.01），骨組織中Treg細胞數(shù)量減少（P<0.01），Th17細胞數(shù)量增加，且Th17/Treg值顯著升高（P<0.01）；與模型組比較，各給藥組骨量明顯增加（P<0.05，P<0.01），血清中Foxp3濃度升高，RORγt濃度顯著降低（P<0.01），骨組織中Foxp3 mRNA及蛋白表達明顯升高（P<0.05，P<0.01），但低劑量組mRNA差異無統(tǒng)計學意義，RORγt mRNA及蛋白表達明顯降低（P<0.05，P<0.01），骨組織中Treg細胞數(shù)明顯升高，Th17細胞數(shù)量明顯降低（P<0.05，P<0.01），且Th17/Treg顯著降低（P<0.01）。結(jié)論：補腎化痰方可以提高去卵巢大鼠骨量，改善骨微結(jié)構(gòu)，并使骨組織中Treg細胞數(shù)量增加而Th17細胞數(shù)量減少。進而推論補腎化痰方可能通過調(diào)節(jié)Th17/Treg平衡，而發(fā)揮防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的作用。

［關(guān)鍵詞］  絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥；補腎化痰方；骨免疫；輔助性T細胞17（Th17）/調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）； 微計算機斷層掃描技術(shù)

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