。第1篇文章研究了M2性巨噬細胞外泌體來源的miR-690對于改善小鼠胰島素敏感性的作用，外泌體miRNA研究發(fā)表在cell metab上不容易，大家可以拿來學(xué)習(xí)借鑒一下；第2篇文章介紹了一種單細胞外囊泡分析策略；第4篇文章探討了自噬與細胞外囊泡釋放特定蛋白之間的調(diào)控關(guān)系；第7篇文章探討了不同的標(biāo)記方法對細胞外囊泡體內(nèi)定位特征的影響；第9篇文章介紹了肺癌細胞利用細胞外囊泡轉(zhuǎn)移EGFR來產(chǎn)生藥物耐受。感興趣的文章可以找來讀讀原文。
1. MiR-690, an exosomal-derived miRNA from M2-polarized macrophages, improves insulin sensitivity in obese mice.
MiR-690是M2極化巨噬細胞的外泌體來源miRNA，可改善肥胖小鼠的胰島素敏感性。
[Cell Metab] IF=21.567 PMID：33450179
摘要：胰島素抵抗是2型糖尿病和肥胖癥的主要病理生理特征，而抗炎M2樣巨噬細胞對于維持正常的代謝穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。在這里，我們顯示M2極化的骨髓源性巨噬細胞（BMDMs）分泌含miRNA的外泌體（Exos），當(dāng)給予肥胖小鼠時，可改善葡萄糖耐量和胰島素敏感性。他們的miRNA內(nèi)容物的清除阻礙了M2 BMDM Exos增強胰島素敏感性的能力。我們發(fā)現(xiàn)，miR-690在M2 BMDM Exos中高度表達，并且在體內(nèi)和體外均起胰島素增敏劑的作用。在miRNA耗盡的BMDM中表達miR-690模擬物會產(chǎn)生相似的Exos，該Exo概括了M2 BMDMExos對代謝表型的影響。Nadk的mRNA是miR-690的真正靶標(biāo)，Nadk在調(diào)節(jié)巨噬細胞炎癥和胰島素信號傳導(dǎo)中起作用。綜上所述，這些數(shù)據(jù)表明miR-690可能是一種新的治療代謝性疾病的胰島素敏化劑。2.Single-vesicle imaging and co-localization analysis for tetraspanin profiling of individual extracellular vesicles.
單囊泡成像和共定位分析單個細胞外囊泡的四跨膜蛋白。
[J Extracell Vesicles] IF=14.976 PMID：33456726摘要：細胞外囊泡（EVs）是分泌的納米級囊泡，其中包含細胞蛋白，脂質(zhì)和核酸。盡管人們認為細胞外囊泡具有生物學(xué)上的多樣性，但當(dāng)前的分析無法充分描述這種多樣性，因為大多數(shù)方法都是細胞外囊泡群體的研究方法，不可避免地會平均各種細胞外囊泡的信息。在這里，我們描述了單個囊泡分析，它使用全內(nèi)反射顯微鏡直接可視化單個EV的標(biāo)記表達，并分析它們的共定位以研究EV亞群。單囊成像和共定位分析成功地說明了細胞外囊泡的多樣性，并揭示了四跨素表達的不同模式。分析的應(yīng)用表明，從不同的常規(guī)EV分離純化方法獲得的EV餾分之間存在相似性和相異性。這項研究中開發(fā)的分析方法將為調(diào)查單個細胞外囊泡的特性提供一種新的可靠工具，并且分析的結(jié)果可能會增加對細胞外囊泡特性的了解。3.Casein-enhanced uptake and disease-modifying bioactivity of ingested extracellular vesicles.
酪蛋白配制的胞外囊泡被攝取的能力增強并且表現(xiàn)出更好的疾病改善效果。
[J Extracell Vesicles] IF=14.976 PMID：33456725摘要：心臟基質(zhì)細胞的細胞外囊泡（EVs）已作為治療候選藥物開發(fā)，在胃腸外給藥時可改善營養(yǎng)不良的肌肉功能，但口服給藥仍未經(jīng)測試。我們發(fā)現(xiàn)酪蛋白是母乳中的主要蛋白質(zhì)，可增強源自心臟的細胞外囊泡的攝取和生物活性，改變血細胞中的基因表達并增強患有肌肉營養(yǎng)不良的mdx小鼠的肌肉功能。因此，口服施用的EV在體內(nèi)被吸收并發(fā)揮改變疾病的生物活性。用酪蛋白配制細胞外囊泡可增加攝取并顯著擴大潛在治療應(yīng)用的范圍。4.Autophagy blockade limits HER2+breast cancer tumorigenesis by perturbing HER2 trafficking and promoting release via small extracellular vesicles.
自噬阻斷通過干擾HER2轉(zhuǎn)運并促進通過小細胞外囊泡的釋放來限制HER2 +乳腺癌的腫瘤發(fā)生。
[Dev Cell] IF= 10.092 PMID：33472043摘要：自噬調(diào)節(jié)是一種新興的癌癥治療策略。通過刪除必需的自噬基因或破壞其自噬功能，我們通過直接調(diào)節(jié)致癌驅(qū)動因子確定了HER2 +乳腺癌腫瘤發(fā)生的機制。FIP200介導(dǎo)的自噬的破壞降低了MMTV-Neu小鼠腫瘤細胞表面HER2的表達，并消除了乳腺腫瘤的發(fā)生。HER2表面表達降低是由于其轉(zhuǎn)運過程變成了從高爾基體轉(zhuǎn)運到內(nèi)吞途徑而不是質(zhì)膜造成的。自噬抑制作用導(dǎo)致HER2在與腔內(nèi)小泡相關(guān)的早期和晚期內(nèi)體中積累，并從小細胞外小泡（sEVs）中的腫瘤細胞釋放。sEVs釋放的HER2增加與腫瘤細胞表面水平降低有關(guān)。阻斷sEV的分泌可恢復(fù)腫瘤細胞中的HER2水平。我們的結(jié)果表明自噬在促進HER2 +乳腺癌中的腫瘤發(fā)生中的作用。這表明阻斷自噬可以作為目前治療HER2相關(guān)藥物耐受的腫瘤的潛在替代療法。5.Molecular Identification of Tumor-Derived Extracellular Vesicles Using Thermophoresis-Mediated DNA Computation.
分子標(biāo)記腫瘤細胞外囊泡的熱泳介導(dǎo)DNA計算。
[J Am Chem Soc] IF=14.612 PMID：33455159摘要：腫瘤來源的細胞外囊泡（tEV）的分子譜分析為非侵入性癌癥診斷提供了廣闊的前景。然而，反映不同細胞起源的EV表型的異質(zhì)性挑戰(zhàn)了tEV的靈敏而準(zhǔn)確的鑒定。在這里，我們介紹由熱泳介導(dǎo)的tEVs檢測的DNA計算設(shè)備。該策略利用基于適配子的邏輯門，在單個EV上使用多個蛋白質(zhì)生物標(biāo)記作為輸入和熱泳累積，以放大輸出信號，從而對tEV進行高度靈敏和特異的分析。利用該平臺，我們證明了在臨床隊列中（n = 30）對乳腺癌（BC）患者和健康捐獻者的辨別率高達97％。此外，通過tEVs評估的分子表型與BC患者組織活檢的結(jié)果一致。細胞外囊泡上的熱泳介導(dǎo)的分子計算為準(zhǔn)確檢測和分類癌癥提供了新的機會。6. Cigarette smoke induces miR-132 in Th17 cells that enhance osteoclastogenesis in inflammatory arthritis.
香煙煙霧誘導(dǎo)Th17細胞中miR-132，增強炎癥性關(guān)節(jié)炎中破骨細胞的生成。
[Proc Natl Acad Sci U S A] IF=9.412 PMID：33443169摘要：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種慢性炎癥性疾病，其特征在于關(guān)節(jié)破壞和嚴(yán)重的發(fā)病率。吸煙（CS）會加劇RA的發(fā)病率和嚴(yán)重程度。盡管涉及Th17細胞和芳烴受體（AhR），但CS誘導(dǎo)RA發(fā)育的機制仍不清楚。在這里，使用轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，我們顯示在存在AhR激動劑或富含CS的培養(yǎng)基中，在Th17細胞中特異性誘導(dǎo)了microRNA-132。如此誘導(dǎo)的miRNA-132被包裝到Th17產(chǎn)生的細胞外囊泡中，并充當(dāng)促炎介質(zhì)，通過下調(diào)COX2來增加破骨細胞生成。在體內(nèi)，在小鼠關(guān)節(jié)炎模型中對miR-132進行敲除可減少關(guān)節(jié)中破骨細胞的數(shù)量。臨床上，RA患者比健康個體表達更高水平的miR-132。吸煙進一步增加了mi-132的水平?？傊?，這些結(jié)果揭示了迄今尚未得到的機制，CS可以通過這種機制加重RA并進一步推進對環(huán)境因素對慢性炎性疾病發(fā)病機制的影響的了解。7.Selection of Fluorescent,Bioluminescent, and Radioactive Tracers to Accurately Reflect Extracellular Vesicle Biodistribution in Vivo.
選擇熒光，生物發(fā)光和放射性示蹤劑以準(zhǔn)確反映體內(nèi)細胞外囊泡的生物分布。
[ACS Nano] IF=14.588 PMID：33470092摘要：在體內(nèi)追蹤細胞外囊泡（EV）而不影響其生物分布的能力是其成功開發(fā)為藥物遞送載體和治療劑的關(guān)鍵要求。在這里，我們評估了五種不同的光學(xué)示蹤劑和核示蹤劑對細胞外囊泡體內(nèi)生物分布的影響。Expi293F EV使用非共價熒光染料DiR進行標(biāo)記，或使用111indium-DTPA進行共價修飾，或通過融合至EV標(biāo)記CD63的熒光（mCherry）或生物發(fā)光（螢火蟲和NanoLuc熒光素酶）蛋白進行生物工程改造。為了專門研究示蹤劑的作用，我們比較了來自相同細胞來源并通過相同途徑以相同劑量全身給藥于荷瘤BALB / c小鼠的EV。 111In和DiR是對EV體內(nèi)成像最敏感的示蹤劑，通過對器官進行離體成像和組織裂解物分析，可以最準(zhǔn)確地量化囊泡的生物分布。具體而言，與CD63融合的NanoLuc改變了EV分布，導(dǎo)致了肺中的高積累，表明為了跟蹤目的而對EV進行基因修飾可能會損害其生理生物分布。血液動力學(xué)分析表明，電動勢從循環(huán)中迅速清除，半衰期在10分鐘以下。我們的研究表明，對于包括藥代動力學(xué)分析在內(nèi)的完整的定量生物分布研究，放射性是最準(zhǔn)確的EV追蹤方法?？傊覀兲峁┝藷晒?，生物發(fā)光和放射性方法的全面比較，其中包括細胞外囊泡的雙重標(biāo)記，以實現(xiàn)小鼠細胞外囊泡運輸?shù)臏?zhǔn)確時空分辨率，這是開發(fā)細胞外囊泡療法的重要步驟。8.miR103a-3p in extracellular vesicles from FcεRI-aggregated human mast cells enhances IL-5 production by group 2 innate lymphoid cells.
來自FcεRI聚集的人類肥大細胞的細胞外囊泡傳遞miR103a-3p增強了先天淋巴樣細胞的IL-5產(chǎn)生。
[J Allergy Clin Immunol] IF= 10.228 PMID：33465368摘要：肥大細胞（MCs）是IgE介導(dǎo)的過敏性炎癥的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。細胞來源的細胞外囊泡（EV）包含生物活性化合物，例如microRNA（miRNA）。細胞外囊泡可以將信號傳輸?shù)绞荏w細胞，從而采用新型的細胞間通信機制。然而，尚不清楚MC衍生的EV是否參與FcεRI介導(dǎo)的過敏性炎癥。我們試圖研究衍生自FcεRI聚集的人類MC的EV對人類2組先天性淋巴樣細胞（ILC2s）功能的影響。在有和沒有IgE的情況下，將人類培養(yǎng)的MC致敏1小時，然后與抗IgE抗體（Ab），IL-33或單獨的培養(yǎng)基一起孵育24小時。使用ExoQuick-TC分離MC上清液中的EV。將ILC2與衍生自FcεRI聚集的MC的EV共培養(yǎng)可顯著增強IL-33刺激的ILC2中IL-5的產(chǎn)生并持續(xù)上調(diào)IL-5 mRNA的表達，但IL-13的產(chǎn)生和IL-13 mRNA的表達沒有變化。在與衍生自抗IgE Ab刺激的MC的EV共同培養(yǎng)的IL-33刺激的ILC2中，miR103a-3p的表達上調(diào)。將miR103a-3p模擬物轉(zhuǎn)導(dǎo)至ILC2，可顯著增強IL-33刺激的ILC2產(chǎn)生的IL-5。miR103a-3p通過下調(diào)蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5（PRMT5）mRNA來促進GATA3精氨酸殘基的去甲基化。通過使用siRNA技術(shù)降低ILC2s中PRMT5的表達，會導(dǎo)致IL-33刺激的ILC2s上調(diào)IL-5的產(chǎn)生。此外，特應(yīng)性皮炎患者血清中的EV中miR103a-3p表達明顯高于非特應(yīng)性健康對照受試者的EV。由于MC衍生的miR103a-3p激活I(lǐng)LC2，嗜酸性變應(yīng)性炎癥可能會加劇。9. Intercellular transfer of exosomal wild type EGFR triggers osimertinib resistance in non-small cell lung cancer.
非小細胞肺癌外泌體野生型EGFR的細胞間轉(zhuǎn)移觸發(fā)了osimertinib耐藥性。
[Mol Cancer] IF=15.302 PMID：33461557摘要：表皮生長因子受體（EGFR）突變的肺癌構(gòu)成了非小細胞肺癌（NSCLC）的主要亞組，奧西替尼是一線治療藥物。但是，大多數(shù)接受奧西替尼治療的患者最終會在一年內(nèi)復(fù)發(fā)。奧西替尼耐藥的潛在機制在很大程度上尚待探索。通過差速離心進行外泌體分離。進行共培養(yǎng)測定以通過細胞活力和凋亡測定來探索藥物敏感性的改變。進行免疫熒光和流式細胞術(shù)以觀察外泌體的形成或吸收。外泌體分泌通過納米顆粒追蹤分析或ELISA測量。建立小鼠異種移植腫瘤模型以評估外泌體對體內(nèi)奧西替尼敏感性的影響。外泌體野生型EGFR蛋白的細胞間轉(zhuǎn)移可在體外和體內(nèi)賦予對osimertinib敏感的EGFR突變癌細胞藥物抗性。EGFR突變的敏感性細胞和EGFR非突變的抗性細胞的共培養(yǎng)可促進EGFR突變的癌細胞中的奧西替尼耐藥表型，而條件培養(yǎng)液中外泌體的耗盡或通過中和抗體的阻斷可抑制外泌體EGFR的表型。從機制上講，奧西替尼通過上調(diào)RabGTPase（RAB17）促進外泌體的釋放。敲低RAB17導(dǎo)致外泌體分泌減少。此外，外泌體可通過網(wǎng)格蛋白依賴性內(nèi)吞作用被EGFR突變的癌細胞內(nèi)化，然后被包裹的外泌體野生型EGFR蛋白激活下游PI3K / AKT和MAPK信號通路并觸發(fā)奧西替尼耐藥。外泌體野生型EGFR的細胞間轉(zhuǎn)移促進了NSCLC中的osimertinib耐藥性，這可能代表了osimertinib的新型耐藥機制，并提供了靶向外泌體以預(yù)防和逆轉(zhuǎn)osimertinib耐藥性的概念證明。10.Recombinant extracellular vesiclesas biological reference material for method development, data normalization and assessment of (pre-)analytical variables.
重組細胞外囊泡作為生物學(xué)參考材料，用于方法開發(fā)，數(shù)據(jù)歸一化和（分析前）分析變量評估。
[Nat Protoc] IF=10.419 PMID：33452501摘要：細胞外囊泡（EV）的診斷和治療用途正在廣泛研究中，可能會帶來社會效益。參考資料是開發(fā)，改進和評估受監(jiān)管的細胞外囊泡應(yīng)用性能以及定量和客觀數(shù)據(jù)解釋的寶貴資源。我們已經(jīng)設(shè)計了重組EV（rEV）作為生物參考材料。rEV具有與樣品EV相似的生化和生物物理特性，并在整個分析過程中充當(dāng)內(nèi)部定量和定性對照。在進行EV分析之前，在體液中摻入rEV可以繪制出EV應(yīng)用的技術(shù)差異，并促進實驗室內(nèi)和實驗室間的研究。該策略是對我們先前發(fā)布的策略的擴展（Tulkens等，2020），描述了rEV的生產(chǎn)，分離和質(zhì)量保證，它們在體液中的稀釋和添加以及基于互補熒光，核酸的檢測步驟酸和蛋白質(zhì)測量。我們證明了使用rEV進行方法開發(fā)，數(shù)據(jù)歸一化和分析前變量的評估。具有標(biāo)準(zhǔn)實驗室和基本EV分離/表征經(jīng)驗的研究人員可以采用該方案，并且需要約4-5 d。11.Unsupervised Machine Learning-Based Clustering of Nanosized Fluorescent Extracellular Vesicles.
基于無監(jiān)督機器學(xué)習(xí)的納米熒光細胞外囊泡的聚類。
[Small] IF=11.459 PMID：33448084摘要：細胞外囊泡（EV）是生物納米顆粒，在細胞間通訊中起重要作用。EV不同群體的表型特征變化是潛在的疾病標(biāo)志物，具有直接的臨床診斷意義。然而，目前嚴(yán)重缺乏用于量化EV生物標(biāo)志物含量的可靠方法，并且由于其固有的異質(zhì)性，因此需要單粒子方法。在這里，多色單分子分析顯微鏡用于檢測單個細胞外囊泡上存在的多個生物標(biāo)記。作者對記錄的信號進行分類，并應(yīng)用基于機器學(xué)習(xí)的t分布隨機鄰居嵌入算法對所得的多維數(shù)據(jù)進行聚類。作為原理的證明，作者使用該方法評估EV的純度和炎癥狀態(tài)，并比較通過不同純化方法分離的細胞培養(yǎng)物和血漿來源的EV。然后，該方法應(yīng)用于識別發(fā)炎的內(nèi)皮細胞釋放的細胞間粘附分子1特異性EV亞組，并證明載脂蛋白a1是識別血漿中典型脂蛋白污染的極佳標(biāo)記。該方法可廣泛應(yīng)用于標(biāo)準(zhǔn)共聚焦顯微鏡，從而既可對患者血漿EV制劑進行標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量評估，又可在健康和疾病中對多種EV生物標(biāo)志物進行診斷分析。
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