痰標本的涂片染色鏡檢和培養(yǎng)基分離培養(yǎng)是呼吸系統(tǒng)感染病原學診斷的常用方法，對診斷呼吸系統(tǒng)感染具有很高的價值。

痰涂片革蘭染色鏡檢能初步判定病原菌的種類，細菌培養(yǎng)則是診斷感染病原菌。涂片與培養(yǎng)結(jié)果相互結(jié)合，可指導臨床作出正確的判斷，但兩者有時也會出現(xiàn)一陰一陽相互矛盾的情況。

遠在北京出差的組長在工作群里發(fā)了一段聊天記錄，是一位呼吸內(nèi)科的醫(yī)生對患者痰涂片結(jié)果有異議。大致內(nèi)容是該患者第一天送檢的灌洗液幾乎就是純痰，非常濃，但涂片鏡檢結(jié)果卻是陰性的，臨床對此涂片結(jié)果有異議。

第二天臨床又送檢了該患者的灌洗液進行復查，想讓我們幫忙多關(guān)注一下，看看涂片是否真的未找到細菌并查找原因。當天中午時刻該患者的標本送來了。標本雖是灌洗液，但是性狀很濃，幾乎就是濃痰。

在培養(yǎng)操作完成之后立即涂片，干燥固定后染色鏡檢，鏡下找到革蘭陰性桿菌1+，隨后該份灌洗液標本的細菌培養(yǎng)結(jié)果為銅綠假單胞菌，而第一天送檢的細菌培養(yǎng)也培養(yǎng)出假單胞菌。

該案例中，引起醫(yī)生產(chǎn)生困惑的是送檢的明明是濃痰，為何涂片卻是陰性？對于該患者第一份標本涂片陰性而培養(yǎng)陽性的情況，我們從以下幾方面給臨床醫(yī)生進行解答：

1.標本中細菌含量少未達到涂片鏡檢的下限或挑取涂片時未選到正確的痰液；

2.培養(yǎng)操作過程可能受到外界污染，培養(yǎng)出來的細菌是污染菌；

3.檢驗技術(shù)人員涂片鏡檢不夠細致，水平所限，導致漏檢。

通過與其溝通，得知該患者入院后予頭孢美唑+依替米星及哌拉西林他唑巴坦抗感染，病情得到緩解，考慮不能排除假單胞菌引起感染的可能。

此外，膿性標本不管是濃痰還是膿液，其中的膿細胞可能是白細胞吞噬掉細菌后中毒而亡的尸體。細菌被白細胞吞噬后，其釋放出某些抑菌成分會抑制細菌的進一步繁殖，從而導致培養(yǎng)結(jié)果陰性。通過分析解答，醫(yī)生表示理解并感謝。

此案例值得反思的另外一個問題是，當碰到涂片陽性而培養(yǎng)陰性的情況時，我們又該如何解答。

微生物室可能都應該接到過這樣來自臨床醫(yī)生的詢問：為什么我送檢的XX標本培養(yǎng)不出細菌，結(jié)果是無細菌生長的。針對這樣的情況，這樣的詢問，我們可以從以下大概幾個方面進行解答：

1.涂片所見細菌可能為厭氧菌，在有氧環(huán)境下不能生長；

2.患者留取標本前使用了抗生素以致病原菌受到抑制，不能生長；

3.標本留取后未及時送檢培養(yǎng)導致細菌死亡；

4.少數(shù)特殊細菌體外生長需要時間長如奴卡菌和馬爾尼菲藍狀菌，而常規(guī)培養(yǎng)時間為48小時，這也會導致培養(yǎng)為假陰性；

5.某些條件要求高的細菌如L型細菌需要特殊培養(yǎng)基而在普通培養(yǎng)基上無法生長。

當然，臨床更多應結(jié)合患者的病情及其他相關(guān)檢查，綜合做出判斷。

對于涂片與培養(yǎng)結(jié)果不相符的標本，應從多方面分析，并結(jié)合臨床癥狀判斷原因。堅持培養(yǎng)前對標本質(zhì)量控制是提高培養(yǎng)真正陽性率的條件之一，是培養(yǎng)結(jié)果可靠的重要手段。此外，通過與臨床之間的互動溝通，可以提升微生物的業(yè)務水平，更好的為臨床解答疑惑。

【參考文獻】

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