接上【技術篇】淺談無菌檢驗隔離器系統(tǒng)驗證之（一）

3.性能驗證

PQ是核實隔離器系統(tǒng)的功能是符合操作者的要求。PQ過程完成后，滅菌周期是適合的，排出口的滅菌劑被檢測是適合的，所有的PQ過程的數(shù)據(jù)應該被統(tǒng)計，分析，存檔。

清洗確認，在通常情況下，對于無菌檢驗來說，清潔不是關鍵的，但是，殘留的產(chǎn)品可能會對檢驗有影響，有殺菌效果產(chǎn)品的殘留對檢驗結(jié)果的影響尤其顯著，在檢測低水平污染時，這些殘留的物質(zhì)會對檢測產(chǎn)生影響。由于粉末容易擴散，殺菌性粉末產(chǎn)品的殘留對檢驗結(jié)果的影響是重要的。對于無菌檢驗隔離器系統(tǒng)和操作者的要求來說，沒有肉眼可見污染這種清洗水平是合適的。清洗方法、周期、設備、清洗隔離器中所用的材料記錄在文件中。

無菌驗證，隔離器內(nèi)表面、隔離器內(nèi)的設備、拿進隔離器的各種物料都應當去除微生物。隔離器表面、無菌檢驗設備、檢驗物品的滅菌和產(chǎn)品接觸部位或者產(chǎn)品藥物成分接觸部位的滅菌是不同的。隔離器滅菌可以用過度滅菌的log降低值來評估實現(xiàn)。如果超過滅菌周期，無菌保證水平不再被確定。隔離器滅菌操作完成之后，通過空氣過濾系統(tǒng)的維持，好的物品傳遞技術的采用，更重要的是：經(jīng)過無菌處理的隔離器手套完整性的保持，隔離器的無菌性被保證。

通過陰性分數(shù)法或者過度殺滅法可以證實，用于隔離器、試驗物品、無菌檢驗用設備的滅菌方法可以使某種合適的、高抗性的生物指示劑的微生物數(shù)下降6個log降。使用足夠數(shù)量的生物指示劑進行試驗可以從統(tǒng)計學上證明滅菌效果是可以再現(xiàn)的以及滅菌劑的分布是合適的。隔離器內(nèi)設備和物品滿載時，需要用更多的指示劑進行試驗。因此，沒有一個或者更多的足夠量的傳感器來測量殺菌劑的濃度時，增加生物指示劑的放置是可以考慮的。在連續(xù)三次滅菌試驗中，六個log降的殺菌能力是證明可以滅菌的。

操作者建立隔離器再次滅菌的周期。這個周期可以是短短的幾天，也可以是幾周的時間，建立的依據(jù)是無菌保持能力（看隔離器內(nèi)部環(huán)境無菌保持）

4.包裝完整性確認

一些材料對殺菌劑有影響，這些材料能抑制微生物的生長。我們關注的是殺菌劑在產(chǎn)品包裝上的穿透（能力），在一些輔助設施例如過濾裝置和管道的穿透力、在一些能夠和產(chǎn)品、培養(yǎng)基、無菌試驗的稀釋劑接觸的材料上的穿透力。在滅菌過程中，操作者有責任核實包裝物、培養(yǎng)基、輔助物品在被批準使用的滅菌過程中沒有受到影響。帶旋轉(zhuǎn)帽的管狀容器、膠塞密封的小瓶、卷曲的褶皺已經(jīng)被證明能夠降低殺菌劑的穿透力。金屬箔包裝并且密封的容器能夠防止殺菌劑的進入；然而，這些情況也能夠?qū)е乱恍┍砻娌槐粶缇?/span>

在多數(shù)情況下，在進行無菌檢驗之前，操作者使用殺菌劑處理產(chǎn)品包裝表面來減少進入隔離器物品的生物負荷量。操作者有責任通過驗證證明：使用殺菌劑處理產(chǎn)品包裝這個過程，存在于產(chǎn)品內(nèi)部的低水平的微生物污染沒有受到殺菌劑的影響，不會影響到檢驗的檢出限度。建議用化學和微生物試驗來檢測包裝物對污染的抵制能力。經(jīng)過隔離器全部的滅菌過程后，殺菌劑對于細菌和真菌的抑制情況的驗證需要進行（參照無菌檢驗《71》）。對于醫(yī)療裝置的包裝、藥品的包裝和密封系統(tǒng)包裝的要求都是一致的。

不論無菌檢驗用培養(yǎng)基還是環(huán)境控制用的培養(yǎng)基，在無菌檢驗時，都必須符合需氧菌、厭氧菌、真菌的生長促進試驗（無菌檢驗《71》）。

5.隔離器內(nèi)部環(huán)境的無菌保持

在一個無菌周期內(nèi)，隔離器系統(tǒng)保持內(nèi)部環(huán)境無菌的能力必須被驗證。隔離器系統(tǒng)出現(xiàn)故障或者隔離器內(nèi)部的偶然污染情況下的微生物必須被檢測。微生物檢測通常包括一個例行的取樣程序，它可以包括，例如，滅菌后的第一天和無菌保持期的最后一天。放置在隔離器中的培養(yǎng)基被證明是無菌的。

隔離器內(nèi)部可以使用平面接觸雙碟或者棉簽搽拭監(jiān)控。然而，因為培養(yǎng)基殘留會使隔離器產(chǎn)生染菌的風險，因此，最好在檢驗完成后進行檢測。如果試驗中有培養(yǎng)基殘留，細心地從隔離器內(nèi)部清理干凈。空氣取樣和培養(yǎng)基檢測雙碟可以使用，但它們在檢測隔離器內(nèi)部非常低水平的污染時不是很靈敏。

最可能污染的途徑是檢驗用具和樣品進入隔離器的過程。驗證所有進入隔離器內(nèi)部的物品是無菌的這一點是關鍵的，也應當定期檢查墊圈，確保其完整，避免微生物的進入。手套和半身衣是另一個可能產(chǎn)生污染的來源。因為操作者戴著手套處理無菌檢驗物品，所以手套是應當特別關注的，手套上微小的破損很難檢查出來，手套在使用時，在拉伸情況下，手套上微小的破損可以體現(xiàn)出來（注意：培養(yǎng)基接觸法檢測手指菌落的方法，在檢測低水平的污染時靈敏度是不足的。用0.1%的蛋白胨水溶液浸泡手套，將溶液過濾，然后將濾膜放在生長培養(yǎng)基碟子上檢測，這個方法可以檢測出其他方法檢測不出的泄露。）

隔離器內(nèi)部進行連續(xù)的塵埃粒子檢測是理想的，這樣可以快速檢測到過濾器的泄露。第二個選擇是使用便攜式的塵埃粒子檢測器進行周期檢測。塵埃粒子檢測取樣不能對隔離器內(nèi)部的無菌環(huán)境產(chǎn)生風險。

四．培訓和安全

因為無菌檢驗操作在潔凈室進行，操作者針對隔離器專門程序進行培訓。所有的培訓記錄和操作者操作的評估應有一個單獨的記錄并且存檔。對所有進行操作或者維護隔離器的人員進行必要的安全培訓是必須的。

人員使用殺菌劑的安全性必須被評估。使用殺菌劑的直接區(qū)原材料的安全數(shù)據(jù)或者一個類似安全數(shù)據(jù)文件是必要的。貯藏和安全方面的預防措施應當符合規(guī)定。在隔離器使用之前，隔離器和所有連接的通道安全檢查應當被執(zhí)行。