1.        載體構(gòu)建

CFDA：有關(guān)表達(dá)載體詳細(xì)資料，包括基因的來源、克隆和鑒定，表達(dá)載體的構(gòu)建、結(jié)構(gòu)和遺傳特性。應(yīng)說明載體組成各部分的來源和功能，如復(fù)制子和啟動子來源，或抗生素抗性標(biāo)志物。提供至少包括構(gòu)建中所用位點的酶切圖譜。應(yīng)提供宿主細(xì)胞的資料，包括細(xì)胞株（系）名稱、來源、傳代歷史、檢定結(jié)果及基本生物學(xué)特性等。詳細(xì)說明載體引入宿主細(xì)胞的方法及載體在宿主細(xì)胞內(nèi)的狀態(tài)（是否整合到染色體內(nèi)）及拷貝數(shù)。應(yīng)提供宿主和載體結(jié)合后的遺傳穩(wěn)定性資料。

FDA:同上，需強(qiáng)調(diào)一點：Animal sourced materials, need to know the risk and the quality。

2.        細(xì)胞株克隆篩選（monoclonality）：

CFDA：最好有證明單細(xì)胞的圖像，向FDA靠攏。

FDA:明確MCB細(xì)胞是從＜1cell/well出來的，常規(guī)是0.5~0.75cell/well。Cellmetric圖像依據(jù)。 Monoclonality is not for Phase 1, suggest to plan it in the early stage so that you don’t have to spend too much effort trying to characterize the cell banks。

在沒有客觀圖像證明之前這些都是理論上的單克隆，這是之前相對最好的可接受的方法吧。所以要求至少兩輪<0.5cell /well的篩選標(biāo)準(zhǔn)~

3.        細(xì)胞庫的檢測及穩(wěn)定性

CFDA：建立GMP兩級庫，檢測符合Ch.P.的要求，外檢庫有MCB/WCB/EOPC，常規(guī)檢測機(jī)構(gòu)中檢院、武漢大學(xué)（現(xiàn)在已經(jīng)成立了公司，分出來了）；

FDA:同中國，也可以只建立MCB。Phase1的樣品允許從MCB里出。常規(guī)做法就是按部就班建好2級GMP庫，做好檢測，BLA時比較順利。檢測機(jī)構(gòu)常見的：bioreliance等。

雙報：直接找國外檢測機(jī)構(gòu)檢測，CDE接受國外檢測機(jī)構(gòu)對細(xì)胞庫的檢測數(shù)據(jù)。

FDA在IND階段不要求穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，細(xì)胞庫（MCB和WCB）的穩(wěn)定性在一期臨床階段不用做，到三期以后再做，EOPC數(shù)據(jù)在3期做，所以如果是雙報項目：外檢有MCB/WCB/EOPC/UPB(FDA:檢1批，CFDA:3批，對于unprocessed bulk 檢測，只是臨床批次和商業(yè)化批次設(shè)置該檢測，動物實驗批次不用進(jìn)行UPB檢測。ICHQ5A提到，要至少檢測三批中試規(guī)?；蚴巧虡I(yè)規(guī)模的UPB， Actually 3 batches may not be enough, need to talk to FDA if you want to take it off. It says AT LEAST 3 BATCHES.)

首先CFDA和FDA對細(xì)胞株的穩(wěn)定性都有要求的（可以參照ICHQ5b/d），但不同的是FDA可以只用MCB。至于你說的PCB內(nèi)部做到60代穩(wěn)定性，如果這60代是是指60天左右估計可能會有很大風(fēng)險，如果60代是指連續(xù)傳代60次（大約180天左右）風(fēng)險會小一些，但以后建MCB和WCB時穩(wěn)定性還是要做的。

關(guān)于篩選加壓和不加壓好像也沒有明確的說法，我們雙報的時候是加壓和不加壓做的，最后不加壓兩個月是不穩(wěn)定的?？催^一些資料以前用的是DHFR篩選系統(tǒng)，是在生產(chǎn)罐子前N-1代撤掉篩選劑。

4.        工藝開發(fā)：

PD部分中美沒有太大差異，如果有平臺工藝，在平臺工藝的基礎(chǔ)上進(jìn)行研發(fā)和工藝摸索即可。

5. IND批次設(shè)置

?CFDA:毒理批+IND3批，或者是直接IND3批，毒理樣品出自IND批次，原液、成品考察穩(wěn)定性。?FDA：毒理批（do the in-use stability for the tox batch based on the nonclinical CRO’s recommendation，與實際給藥方案相關(guān)）+GMP1批。毒理批工藝要有代表性，與IND批工藝一致，原液、成品考察穩(wěn)定性（時間：Depending on the indication and the duration of the clinical study。In-use stability is a case by case depending on the dosage form, and how it is administered），規(guī)模自行設(shè)計，能夠滿足phase1樣品需求及留樣研究需求。?6. 主要原料、輔料、藥包材、DS、DP：?CFDA：滿足Ch.P.要求。對于輔料，若藥典無收錄，可以選用USP、EP標(biāo)準(zhǔn)的輔料。?FDA：DS、DP的檢測不一定都參照US標(biāo)準(zhǔn)， For Phase 1, safety related such as bioburden, sterility, endotoxin, subvisible particles need to be USP. Excipients for DP recommends to be USP。?雙報：雙報用的輔料建立內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，滿足中美要求。其他原料無差異。要求有供應(yīng)商審計系統(tǒng)。培養(yǎng)基廠家出具animal free statement。 If it is not, you need to tell what animal component you have.?7. 申報資料：?CFDA:28號令附件3的要求，進(jìn)行1-31號資料的準(zhǔn)備?FDA：eCTD資料編輯及提交，CTD框架結(jié)構(gòu)都不陌生， M4Q.內(nèi)容銜接比國內(nèi)資料要緊實。?