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前言 經(jīng)口灌胃給藥是動物實驗中最為常用的一種給藥方式,尤其常用于生理、藥理、免疫等多學科的實驗動物建模,藥物毒理、藥效、劑量確定等研究中。該法操作簡便,用藥劑量準確,灌服溶液或混懸液均可,可反復給藥,適用于小鼠、大鼠、家兔等多種實驗動物。灌胃給藥看似簡單,實則大有學問,初學者常常因操作手法不當而傷到小鼠氣道或食道,甚至創(chuàng)傷小鼠內(nèi)臟引起小鼠死亡,導致實驗失敗。在此我們一起來看看灌胃給藥注射技巧和經(jīng)驗。 灌胃給藥法: 使用灌胃針將藥物溶液或混懸液直接灌入動物胃內(nèi)的給藥方式。 小鼠灌胃給藥示意圖 (來自丁香園) 藥物循環(huán)途徑: 食管→胃→小腸→小腸毛細血管→空回腸靜脈→腸系膜上靜脈→肝門靜脈→肝→肝靜脈→下腔靜脈→右心房→右心室→血液循環(huán)。 特點: 操作簡便:灌服溶液或混懸液均可,只需保證藥物均勻穩(wěn)定,可反復給藥 安全性高:各種給藥方式中,口服給藥是最安全的; 可給藥體積大:小鼠:0.5-1ml,大鼠:3-8ml; 生物利用度低:藥物經(jīng)胃腸道吸收,存在胃腸道、肝臟首過代謝,生物利用率相對較低; 實驗動物受傷風險:容易對動物造成一定程度機械和心理影響。 常用實驗動物一次最大灌胃量 (來自《心血管病實驗動物學》) 灌胃給藥工具: 針頭呈倒水滴型的金屬灌胃針配注射器。根據(jù)針管和針頭尺寸分為不同型號,且有直頭和彎頭兩類。 不同型號小鼠、大鼠灌胃針圖示 (來自淘寶網(wǎng)) 一般根據(jù)小鼠年齡選擇不同型號灌胃針,如裸鼠或5周齡以下幼鼠可使用6號,體重小于30g的小鼠使用8號或9號,體重大于30g的小鼠使用12號。 不同型號灌胃針長度、直徑及適用范圍(來自淘寶網(wǎng)) 實驗操作: 1. 實驗準備:灌胃前應禁食4~8小時,避免太多胃內(nèi)容物阻礙灌胃注射以及影響藥物吸收速率。 2. 藥品吸?。焊鶕?jù)小鼠體重計算好給藥量,灌胃針和注射器安裝好,吸取藥品放在一旁備用。 3. 小鼠捉拿和固定:通過抓取尾巴捉拿小鼠,盡可能避免刺激動物,抓尾巴的部位不宜太靠近尾端。將小鼠放在粗糙面上,用左手(這里視操作者為右撇子)拇指和食指抓住鼠耳和頭頸部皮膚,用左手手掌及小指無名指夾住尾部,使其頭、頸和身體(口腔和食管)成一直線,腹部面朝上,注意要固定牢不能讓其亂動,且對頸部皮膚不宜拉得太緊。若抓取不得當,切記要放開重抓,以免后續(xù)操作出問題。 4. 進針給藥:右手持注射器從一側(cè)嘴角進針入口腔,避開牙齒,經(jīng)舌面緊沿上腭徐徐插入食管下段,動作輕柔避免損傷食道,如遇阻力,可輕微上下滑動,待小鼠吞咽時賁門肌肉松弛感覺阻力消失有落空感,緩慢推進,一般當針插入小鼠3~4cm,即灌胃針3/4時,回抽注射器無空氣逆流表明針頭已進入胃內(nèi),即可注射。如動物掙扎強烈,呼吸困難或進針阻力很大,應馬上停止進針將針拔出,待動物恢復平靜后再次嘗試。注射完畢,松開小鼠觀察如無呼吸異常,可確定灌胃成功。 大、小鼠灌胃操作是實驗動物給藥的基本技能,初學者一定要多加練習,熟練掌握正確的操作方法和技巧才可以進行試驗。遇到各種情況找到原因,總結(jié)摸索,找到適合自己的技法。 參考文獻: [1]王寧萍,趙建寧,楊志偉.一種改進的小白鼠灌胃給藥法[J].寧夏醫(yī)學院學報,1999(01):60-61. [2]方遠書,何忠平,裘穎兒.實驗小鼠的灌胃給藥技巧[J].山東畜牧獸醫(yī),2014,35(10):90. [3]戴支凱.大鼠及小鼠灌胃給藥操作方法探討[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2015,31(11):1738-1740. [4]霍勇主編.《心血管病實驗動物學》.人民衛(wèi)生出版社, 2011 [5]常用小型實驗動物灌胃給藥技術(shù)方法介紹 丁香通 2008 [6]灌胃給藥后,為何我的小鼠頻繁死亡?邦耀實驗室 2018 |
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