diewisch歷史唯物主義者昨天 14:25
CRISPR-Cas9是一種多功能的rna引導(dǎo)的基因組編輯工具。 在這里,我們證明了在CRISPR RNA (crRNA)中用DNA核苷酸部分替換RNA核苷酸可以在人類細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)有效的基因編輯。當(dāng)同時(shí)使用crRNA和sgRNA以及多個(gè)引導(dǎo)序列時(shí),這種部分DNA替換策略可以保持目標(biāo)活性。部分DNA置換也適用于另一個(gè)CRISPR系統(tǒng)Cpf1的crRNA。 我們發(fā)現(xiàn),通過對(duì)離靶點(diǎn)裂解的聚焦分析、錯(cuò)配耐受性的測(cè)量以及對(duì)離靶點(diǎn)的全基因組譜分析,引導(dǎo)序列中的部分DNA置換顯著減少了離靶點(diǎn)基因組的編輯。以Cas9-sgRNA復(fù)合物的結(jié)構(gòu)為指導(dǎo),crRNA的3 '端大部分可以被DNA核苷酸取代,而5 '和3 ' -DNA取代的crRNA可以實(shí)現(xiàn)高效的基因組編輯。 Cas9在DNA-RNA嵌合體的引導(dǎo)下,可以提供一種通用的策略來降低人類細(xì)胞和非目標(biāo)基因組編輯的成本。 |
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