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5月11日，在山東濰坊舉辦的《2016全國(guó)蔬菜重要病蟲(chóng)害與生理障礙防控實(shí)用技術(shù)高級(jí)培訓(xùn)班》中，北京市農(nóng)林科學(xué)院植保所李興紅研究員闡述了近年蔬菜流行的病毒病種類(lèi)、檢測(cè)與防控技術(shù)，詳細(xì)介紹了最近流行的蔬菜病毒病、植物病毒檢測(cè)技術(shù)、病毒病的防治技術(shù)等幾方面，下面是小編根據(jù)李興紅研究員的講課內(nèi)容整理而成，與大家一起分享。 蔬菜病毒病近幾年逐年嚴(yán)重，新的病毒病也不斷出現(xiàn)。熟悉蔬菜病毒病的種類(lèi)和檢測(cè)技術(shù)，對(duì)于病毒病的防控是十分必要的。 （一）番茄黃花曲葉病毒 20世紀(jì)90年代以來(lái)，由于全球氣候變暖和煙粉虱的空前擴(kuò)展，該病害在40多個(gè)國(guó)家大面積暴發(fā)并逐年加重。自2005年開(kāi)始，番茄黃化曲葉病在我國(guó)呈由南向北趨勢(shì)迅速蔓延，在廣東、廣西、浙江、上海、江蘇、河南、山東、河北等地大面積暴發(fā)給當(dāng)?shù)胤焉a(chǎn)造成了極其嚴(yán)重的損失。該病是2008年新傳入北京的，2009年近3萬(wàn)畝番茄遭受毀滅性損失。 染病番茄植株矮化，頂部葉片發(fā)黃、變小，葉片邊緣上卷，番茄整個(gè)生長(zhǎng)點(diǎn)簇縮在一起。生長(zhǎng)發(fā)育早期，染病植株無(wú)法正常開(kāi)花結(jié)果；生長(zhǎng)發(fā)育后期染病植株僅上部葉和新芽表現(xiàn)癥狀，結(jié)果數(shù)減少，果實(shí)變小。 該病毒為中國(guó)番茄黃化曲葉病毒，屬于雙生病毒科，是一類(lèi)植物DNA 病毒，在自然條件下由煙粉虱傳播。 （二）番茄斑萎病毒 發(fā)病植株幼葉變?yōu)榍嚆~色，嚴(yán)重時(shí)，葉片出現(xiàn)黑色斑點(diǎn)，葉背面沿脈呈紫色，有的生長(zhǎng)點(diǎn)死掉；莖端形成褐色壞死條紋斑；青果時(shí)，果實(shí)上出現(xiàn)褪綠環(huán)斑，但顏色比較淺。成熟時(shí)，變?yōu)榧t色或黃色的環(huán)斑，輪紋明顯。 該病由薊馬傳播，特別是西花薊馬，是重要的傳播介體。目前在我國(guó)寧夏、天津、廣西、云南等地均檢測(cè)到該病的發(fā)生。 （三）番茄褪綠病毒 感病葉片表現(xiàn)嚴(yán)重脈間失綠，變脆，影響光合作用，邊緣輕微上卷，且局部出現(xiàn)紅褐色壞死小斑點(diǎn)。果實(shí)變小，并提前轉(zhuǎn)色，失去商品價(jià)值。 我國(guó)該病毒病害于2010 年前后在山東設(shè)施蔬菜產(chǎn)區(qū)即有發(fā)生，壽光當(dāng)?shù)夭宿r(nóng)稱(chēng)之為“黃頭”，2013 年起該病害在山東各地保護(hù)地普遍發(fā)生和流行，普遍減產(chǎn)30%以上。目前山東、北京、南京、河北及天津都有發(fā)生的報(bào)道。 主要由煙粉虱、白粉虱、銀葉粉虱和紋翅粉虱。不能汁液摩擦傳播。 （四）辣椒病毒病 辣椒病毒病癥狀涵蓋了花葉、斑駁、畸形、蕨葉、葉斑、脫落、整株叢簇、矮化、果實(shí)斑駁等癥狀。 辣椒病毒病的病原比較多，據(jù)報(bào)道，全世界自然侵染辣椒的病毒30余種，國(guó)內(nèi)目前報(bào)道的有10種，其中，TMV、CMV發(fā)病率最高、分布最廣、為害最大的辣椒病毒病主導(dǎo)毒源。辣椒輕斑駁病毒在新疆、北京地區(qū)發(fā)現(xiàn)。 煙草花葉病毒和辣椒辣椒輕斑駁病毒主要以接觸傳播為主；黃瓜花葉病毒病主要以蚜蟲(chóng)、接觸傳播。 （一）生物學(xué)測(cè)定 通過(guò)鑒別寄主法可定性、定量測(cè)定病毒。 （二）電鏡觀察 1、負(fù)色法 從發(fā)病組織擠出汁液，做成制片，直接在電鏡下觀察其立體形態(tài)或?qū)⒉《玖Ｗ犹峒兂鰜?lái)，進(jìn)行觀察。 2、超薄切片法 將發(fā)病組織做成超薄切片，在電鏡下觀察細(xì)胞中的病毒 粒子和內(nèi)含體。 3、免疫電鏡法 可在病組織汁液中加抗體，抗體可誘捕病毒粒子進(jìn)行觀察。 （三）血清學(xué)檢測(cè)方法 1、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA） ELISA原理是把抗原(Antigen)和抗體(Antibody)的免疫反應(yīng)和酶的高效催化作用結(jié)合在一起，酶標(biāo)抗體（或抗抗體）與相應(yīng)抗原反應(yīng)時(shí)形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物，酶遇到相應(yīng)的底物時(shí)產(chǎn)生顏色反應(yīng)，它具有靈敏度高（檢測(cè)1-10 ng/ml抗原）、特異性強(qiáng)，既能定性又能定量的測(cè)定抗體或抗原，且不需要使用同位素和復(fù)雜的設(shè)備，適于測(cè)定大量樣品，且對(duì)人體基本無(wú)害的優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蔬菜病毒的檢測(cè)。 2、斑點(diǎn)免疫（DIBA）檢測(cè)方法 DIBA的優(yōu)點(diǎn)在于采用硝酸纖維素膜(Nitrocellulose membrances，NCM)代替ELISA的酶聯(lián)板，NCM對(duì)蛋白質(zhì)的親和力比酶聯(lián)板高，反應(yīng)過(guò)程較少存在泄漏和解吸現(xiàn)象。 3、膠體金免疫試紙條檢測(cè)方法 膠體金免疫法利用膠體金顆粒標(biāo)記抗體（IgG）分子，而形成穩(wěn)定的抗體(IgG)-膠體金復(fù)合物。通過(guò)抗原與抗體間特異性反應(yīng)，抗體(IgG)-膠體金復(fù)合物就可以和抗原結(jié)合，生成抗原-抗體(IgG)-膠體金復(fù)合物，使該區(qū)域顯示一定的顏色，從而實(shí)現(xiàn)特異性的免疫診斷。膠體金免疫試紙條具有檢測(cè)方便、結(jié)果快捷直觀特點(diǎn)，適合田間病毒檢測(cè)。 （四）分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù) 1、RT-PCR 原理：根據(jù)已知核酸序列設(shè)計(jì)引物、體外擴(kuò)增 2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR 原理：它是一種在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。 3、核酸斑點(diǎn)雜交 原理：堿基互補(bǔ)配對(duì)，與探針結(jié)合。 4、基因芯片技術(shù) 原理：將無(wú)數(shù)預(yù)先設(shè)計(jì)好的寡核苷酸、cDNA、基因組DNA在芯片上做成點(diǎn)陣，與樣品中同源核酸分子進(jìn)行雜交，對(duì)樣品的序列信息進(jìn)行高效的解讀和分析，大規(guī)模獲取相關(guān)同時(shí)檢測(cè)的特點(diǎn)。 （一）選用抗病品種 選用抗病品種對(duì)番茄黃化曲葉病毒、煙草花葉病毒、黃瓜花葉病毒等病毒病的發(fā)生有重要預(yù)防作用。 （二）加強(qiáng)栽培措施 選用穴盤(pán)基質(zhì)育苗；注意定植時(shí)期的選擇，盡量錯(cuò)開(kāi)傳病媒介昆蟲(chóng)高發(fā)期；注意采用遮蔭措施；注意田間農(nóng)事操作，尤其對(duì)于一些接觸傳染的病毒病有重要預(yù)防作用；在發(fā)病初期，及時(shí)拔除病株，以防進(jìn)一步擴(kuò)散傳病。 （三）傳播媒介的防治 注意提前預(yù)防病毒病的傳播媒介，如蚜蟲(chóng)、粉虱、薊馬?？刹捎梅老x(chóng)網(wǎng)、銀膜、粘蟲(chóng)板及藥劑防治等方法進(jìn)行預(yù)防。 （四）抗病毒劑的應(yīng)用 目前，我國(guó)用于防治病毒病的制劑主要有鹽酸嗎啉呱及復(fù)配制劑（60%）、寧南霉素、香菇多糖、氨基寡糖、葡聚烯糖、幾丁聚糖、低聚糖素、氯溴異氰脲酸、混合脂肪酸、混脂·硫酸銅、烷醇·硫酸銅等。 |
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來(lái)自： 雨露plngq5r52x > 《農(nóng)藥》
