德國(guó)的藥企多為家族企業(yè)或私有企業(yè)，如今享譽(yù)全球的拜耳、格蘭泰、勃林格殷格翰、費(fèi)森尤斯和默克或多或少都是從家族企業(yè)發(fā)展而來(lái)，歷史向上可追溯很多代，有些藥廠的歷史甚至可以追溯到德意志第二帝國(guó)時(shí)期。德國(guó)制藥業(yè)發(fā)跡于第一次工業(yè)革命后期，蒸汽機(jī)的出現(xiàn)使得采礦業(yè)和冶金業(yè)等需要大量人力的重工業(yè)得以飛速發(fā)展，從而推動(dòng)了化工行業(yè)的進(jìn)步。可以說(shuō)，德國(guó)制藥業(yè)與化工行業(yè)是密不可分的。然而隨著兩次世界大戰(zhàn)的戰(zhàn)敗，以及冷戰(zhàn)時(shí)期德國(guó)的分裂，使得德國(guó)制藥業(yè)并沒(méi)能跟上時(shí)代的潮流。20世紀(jì)70年代，生物技術(shù)開始進(jìn)入制藥行業(yè)，而當(dāng)時(shí)，拜耳、默克、勃林格殷格翰還在鉆研化學(xué)合成藥，費(fèi)森尤斯則專耕于大輸液產(chǎn)品，另一個(gè)大廠格蘭泰則陷于臭名昭著的“反應(yīng)?！笔录凶灶櫜幌尽缀醮髲S們都沒(méi)有太把生物技術(shù)當(dāng)回事兒，而本文的主角——Rentschler在1974年就成立了生物技術(shù)部門，并于1979年開始進(jìn)行重組細(xì)胞株的開發(fā)。

圖1 Rentschler公司發(fā)展歷史（版權(quán)為作者所有）

Rentschler公司自稱為一家中型生物制藥公司，總部位于德國(guó)的勞普海姆鎮(zhèn)上，總面積超過(guò)4萬(wàn)平米。作為生物技術(shù)的先鋒，其能提供基于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的代工開發(fā)和生產(chǎn)。目前已為全球100多個(gè)客戶提供了外包服務(wù)，經(jīng)手了超過(guò)200個(gè)不同的分子，運(yùn)行了超過(guò)350批生產(chǎn)，其中30%為連續(xù)培養(yǎng)模式?，F(xiàn)任管理層主要來(lái)自安進(jìn)，勃林格殷格翰和默克等大廠。

下面我們來(lái)從幾個(gè)維度考察一下Rentschler的實(shí)力具體如何：硬件設(shè)施、技術(shù)儲(chǔ)備和領(lǐng)導(dǎo)力。

首先是硬件設(shè)施，3x 3000L不銹鋼反應(yīng)器，2x 2000L和2x 1000L一次性生物反應(yīng)器，支持灌流培養(yǎng)（ATF-10配合XDR-1000），?KTAprocess，最大80cm內(nèi)徑層析柱，60000瓶量的罐裝和凍干線[1]。

圖2 2012年獲獎(jiǎng)設(shè)施，左起分別為XDR-50, XDR-200和XDR-1000一次性生物反應(yīng)器（來(lái)自Rentschler官網(wǎng)）

直觀感受，確實(shí)如其自稱的是個(gè)中型體量的CDMO公司，但是體量不大，質(zhì)量卻很出色。2012年德國(guó)總部更是獲得了年度設(shè)施獎(jiǎng)。硬件設(shè)備都來(lái)自知名供應(yīng)商。2015年更是與GE Healthcare官宣了其新產(chǎn)線的落成[2]，因?yàn)槠洳粌H在當(dāng)年購(gòu)買了XDR-50, XDR-200, XDR-500和XDR-2000, 更是第1000臺(tái)?KTAprocess的客戶，且所有這些設(shè)備在6個(gè)月內(nèi)就交付并完成了調(diào)試。后續(xù)又與GE Healthcare 聯(lián)合發(fā)布了White Paper，看來(lái)GE Healthcare會(huì)作為Rentshler的長(zhǎng)期合作伙伴[3]。

圖3 2015年擴(kuò)充的2000L生產(chǎn)線，右起分別為XDR-50, XDR-200, XDR-500和XDR-2000一次性生物反應(yīng)器（來(lái)自Rentschler官網(wǎng)）

2016年其又?jǐn)U充了一個(gè)2000L一次性生物反應(yīng)器，筆者暫未了解到其品牌信息，不過(guò)根據(jù)其彩頁(yè)中宣稱的“不同類型的一次性生物反應(yīng)器”字眼來(lái)看，也可能不是XDR，希望有知情人能夠后臺(tái)留言一下。

今年年初，Rentschler又完成了對(duì)Shire位于麻省Milford市的GMP設(shè)施的收購(gòu)，終于在美國(guó)本土有一個(gè)CDMO基地了，2006年其只是在美國(guó)成立代理公司承接美國(guó)業(yè)務(wù)，并未建設(shè)工廠[4]。

再來(lái)看其技術(shù)儲(chǔ)備。2014至2018年，Rentschler在期刊上發(fā)表了26篇論文，面向客戶推出了17篇應(yīng)用文獻(xiàn)，在各大生物制藥論壇上發(fā)表了58場(chǎng)演講。內(nèi)容涵蓋分子構(gòu)建、細(xì)胞株優(yōu)化、灌流培養(yǎng)工藝、病毒去除方法、層析工藝優(yōu)化、SPR技術(shù)和制劑。Rentschler對(duì)一次性技術(shù)的應(yīng)用案例還被收錄在了由中國(guó)食品藥品國(guó)際交流中心組織編寫的《國(guó)際制藥一次性使用系統(tǒng)應(yīng)用及技術(shù)指南》一書中。

下面我們快速看幾篇比較有意思的文獻(xiàn)，更多內(nèi)容請(qǐng)各位讀者自行前往Rentschler官網(wǎng)查閱。如果有讀者感興趣，可以底下留言，后面小編可以把大家感興趣的文獻(xiàn)著重拿出來(lái)解析。

1. 高密度細(xì)胞建庫(kù)應(yīng)用于快速擴(kuò)種[5]

通過(guò)ReadyToProcess WAVE 25波浪式生物反應(yīng)器及灌流細(xì)胞培養(yǎng)袋，將24天的擴(kuò)種時(shí)間縮短至10天左右，同時(shí)保持一致的細(xì)胞密度、細(xì)胞活力和表達(dá)量。 

圖4 快速擴(kuò)種路線

2. 通過(guò)SPR技術(shù)（Biacore）測(cè)定一種IgG對(duì)CD16和GD2的結(jié)合常數(shù)作為ADCC效應(yīng)的替代評(píng)估方案[6]

使用Biacore C將GD2偶聯(lián)在CM05芯片上，讓IgG流過(guò)芯片，計(jì)算其與GD2的結(jié)合常數(shù)；

使用Biacore T200將蛋白A固定化在CM05芯片上，讓IgG流過(guò)芯片，讓CD16流過(guò)芯片，計(jì)算其與CD16的結(jié)合常數(shù)。

 

圖5 上：IgG與GD2的結(jié)合；下：IgG與CD16的結(jié)合

3. 通過(guò)STORY方法優(yōu)化親和層析填料和得率[7]

減少層析填料體積，提高cycle數(shù)，將裝填高度降低以縮短cycle時(shí)間。從空間和時(shí)間兩個(gè)層面對(duì)工藝成本進(jìn)行平衡?？梢怨?jié)省約900,000歐元的成本。

 

圖6 上：兩種方法的填料成本；下：層析工藝流程

4. 應(yīng)用不同的工藝路線生產(chǎn)復(fù)雜分子：長(zhǎng)效融合蛋白及雙抗[8]

案例一：長(zhǎng)效凝血因子VII

圖7 左：不同糖基化融合片段的分子構(gòu)建；右：不同的下游工藝路線

案例二：CTLA-4 Fc片段融合的貝拉西普

圖8 上：該分子能結(jié)合CD80和CD86；下：上游工藝及補(bǔ)料策略

5. 一次性技術(shù)的優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì)[9]

在操作、公用系統(tǒng)和維護(hù)方面，對(duì)于一個(gè)普遍的mAb工藝來(lái)說(shuō)，全部使用一次性設(shè)備可以降低>20%的操作成本和>10%的人力成本。對(duì)于CDMO來(lái)說(shuō)，一般2000L以上的規(guī)模不是經(jīng)常會(huì)遇到，因此最近出現(xiàn)的4000L SUB（來(lái)自ABEC）并不是十分需要。因?yàn)楝F(xiàn)代工藝完全可以通過(guò)優(yōu)化或新技術(shù)來(lái)提高效率和產(chǎn)量，以盡可能避免2000L以上規(guī)模的生產(chǎn)要求。

一年24批生產(chǎn)的3000L不銹鋼線的成本大約為€250/g蛋白；而一年36批生產(chǎn)的2000L一次性線的成本約為€280/g蛋白。

最后再看Rentschler的領(lǐng)導(dǎo)力。

• 現(xiàn)任CEO Frank Mathias博士，25年以上的工業(yè)經(jīng)驗(yàn)。之前曾在施維雅和安進(jìn)慕尼黑分公司的CEO，同時(shí)擔(dān)任德國(guó)生物制藥促進(jìn)交流協(xié)會(huì)VFA的主席。來(lái)自德國(guó)本土的生物制藥人才資源應(yīng)該是有所保障的。

• 現(xiàn)任COO Ralf Otto博士，20年以上的工業(yè)經(jīng)驗(yàn)。之前在勃林格殷格翰負(fù)責(zé)細(xì)胞和生物制造板塊的整體運(yùn)營(yíng)，后又擔(dān)任勃林格位于美國(guó)加州弗里蒙特公司的副總裁。

• Thomas R?sch博士，生物制藥工程板塊副總，16年的工業(yè)經(jīng)驗(yàn)，參與設(shè)計(jì)、建設(shè)和改造了勃林格殷格翰位于德國(guó)和美國(guó)的多個(gè)生產(chǎn)和研究中心。

• Jesús Zurdo博士，工藝科學(xué)與創(chuàng)新板塊高級(jí)副總裁，15年工業(yè)經(jīng)驗(yàn)。分管CDMO業(yè)務(wù)中從細(xì)胞株構(gòu)建至制劑的所有工藝的開發(fā)和優(yōu)化。之前在龍沙公司（Lonza）擔(dān)任戰(zhàn)略創(chuàng)新總監(jiān)，負(fù)責(zé)新技術(shù)應(yīng)用及新劑型開發(fā)。他也是一系列新藥公司的聯(lián)合創(chuàng)始人，如Zyentia和Zapaloid，這些經(jīng)歷可以更好地吸引新藥公司的業(yè)務(wù)。

• Henning Gerschewski博士，生產(chǎn)科學(xué)與技術(shù)副總裁，15年工業(yè)經(jīng)驗(yàn)。分管CDMO業(yè)務(wù)的生產(chǎn)、開發(fā)和質(zhì)量工作。之前擔(dān)任勃林格殷格翰位于美國(guó)加州弗里蒙特公司的工藝轉(zhuǎn)移和單元操作平臺(tái)的總監(jiān)。

• Christian Hunzinger博士，項(xiàng)目管理高級(jí)副總裁，15年工業(yè)經(jīng)驗(yàn)。之前擔(dān)任Merck的CMC項(xiàng)目主管，通過(guò)與Pfizer的戰(zhàn)略聯(lián)盟，最終成功將Bavencio?(avelumab)推上市場(chǎng)。

可以看出這些管理層主要是來(lái)自于德國(guó)本土，其中勃林格殷格翰成為其最大的“高管市場(chǎng)”。勃林格作為全球最大的CDMO公司之一，從該公司走出的高管們，相信能在Rentschler發(fā)揮重大作用，將CDMO業(yè)務(wù)和技術(shù)革新推向更高的水平。

參考文獻(xiàn) (所有文章或新聞均來(lái)自Rentschler官網(wǎng)，點(diǎn)擊原文可鏈接到官網(wǎng)，進(jìn)入news板塊即可查看）

[1] cGMP Biomanufacturing. Flyer. Rentschler Biopharma.

[2] Rentschler Biotechnologie expands European manufacturing capabilities with GE Healthcare Life Sciences bioprocess technologies. News.

[3] Modular approaches for diverse molecules: Reinventing smart bioprocessing. White Paper.

[4] Rentschler Biopharma Completes Acquisition of U.S. Manufacturing Site. News.

[5] Marvin Kadisch, Lisa Wei?er, Kurt Russ. High-density cell banking for intensified seed trains.

[6] Marco Bareth, Stefan Stranner, et al. FcγRIII(CD16) and GD2 binding assay for an IgG using surface plasmon resonance (SPR; Biacore)  as a surrogate for evaluation of Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity (ADCC). 

[7] Marlene Holder, Sabrina Graser, et al. SCALE-UP OF AN AFFINITY CHROMATOGRAPHY TO 1000 L MANUFACTURING SCALE USING SPACE-TIME OPTIMIZED RESIN AND YIELD (STORY) APPROACH.

[8] Stefan R. Schmidt. Manufacturing of Complex Biobetters: Half-life Extended Fusion Proteins and Bispecifi c Molecules 

[9] Tina Lütke-Eversloh, Peter Rogge. Biopharmaceutical Manufacturing in Single-Use Bioreactors. Pham. Ind. 80, Nr. 2,281-284 (2018)