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去偽存真——痢疾的病原學(xué)診斷偶遇

 板橋胡同37號 2018-07-15
 

痢疾的病原學(xué)診斷在基層醫(yī)院主要靠傳統(tǒng)的糞便的分離培養(yǎng)、生化反應(yīng)鑒定和血清學(xué)鑒定,也有免疫學(xué)法和快速PCR檢測。我進(jìn)行血清學(xué)鑒定時偶遇兩種不同的結(jié)果:福氏志賀氏菌1a型和福氏志賀氏菌2a型,通過加熱法去偽存真,最終鑒定為福氏志賀氏菌2a型,主要是福氏志賀氏菌2a型有K抗原,從而干擾正常的鑒定。

案例經(jīng)過


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患者,男,84歲,腹痛、腹瀉2天于2018年5月22日入院,每天解稀水樣便10余次,糞便中見黏液、膿血,便后臍周疼痛明顯,伴惡心、心悸、出汗、納差。查體:T:39.1℃,P:120次/分,R:20次/分。輔助檢查:5月22日,WBC:4.79×109/L,NEUT%:81.2%,PCT1.93ng/mL,5月23日WBC:7.05×109/L,NEUT%:84.2%,PCT1.73ng/mL,CRP:108.49mg/L,糞便常規(guī):褐色,稀,RBC1+,WBC3+,隱血試驗(yàn)陽性。5月23日送糞便細(xì)菌培養(yǎng)。

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5月23日微生物室接到患者細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本,按照細(xì)菌室的SOP文件規(guī)范操作。挑粘液、膿血的大便接種血平板、麥康凱平板、SS平板等腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基,37℃孵育18—24小時,5月24日挑取無色半透明的可疑菌落,做革蘭氏染色、氧化酶試驗(yàn)、動力試驗(yàn),接種克氏雙糖斜面鑒定,同時做藥敏定量試驗(yàn)。

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5月25日生化反應(yīng)為:分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。VP試驗(yàn)陰性,不分解尿素,硫化氫陰性,氧化酶陰性,不能利用枸櫞酸鹽作為碳源,動力試驗(yàn)陰性。提示為志賀氏菌,隨后用志賀氏菌屬診斷血清(國(食)藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2013第3401529號,批號:20170101,效期2019.01.19)做玻片凝集實(shí)驗(yàn)確定菌群和菌型。志賀氏菌屬四種多價血清強(qiáng)凝集,福氏志賀氏菌多價血清強(qiáng)凝集,福氏志賀氏菌群血清3.4強(qiáng)凝集,福氏志賀氏菌群血清6無凝集,福氏志賀氏菌群血清7凝集,福氏志賀氏菌血清Ⅰ型和Ⅱ型均強(qiáng)凝集(重復(fù)做了3次,結(jié)果都是強(qiáng)凝集。用生理鹽水做陰性對照試驗(yàn):結(jié)果均不凝集,用標(biāo)準(zhǔn)菌株做陽性對照試驗(yàn)顯示強(qiáng)凝集),福氏志賀氏菌血清Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型均不凝集。用小試管做2麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙?管,用福氏志賀氏菌Ⅰ型和Ⅱ型診斷血清做玻片凝集實(shí)驗(yàn)均凝集(重復(fù)做了3次,結(jié)果都是凝集,用生理鹽水做陰性對照試驗(yàn):結(jié)果均不凝集)。在酒精燈上分別加熱5分鐘、10分鐘、15分鐘、20分鐘、25分鐘、30分鐘、60分鐘,同時按照標(biāo)準(zhǔn)的方法:用燒杯裝水加熱煮沸,將第8管細(xì)菌懸液放入燒杯中繼續(xù)加熱煮沸100℃1小時[1]。然后對上述已經(jīng)加熱處理過的8管細(xì)菌懸液重新進(jìn)行玻片法凝集實(shí)驗(yàn)。上述8個試管的試驗(yàn)結(jié)果均是福氏志賀氏菌群7無凝集、福氏志賀氏菌Ⅰ型無凝集而Ⅱ型強(qiáng)凝集。最終鑒定結(jié)果為福氏志賀氏菌2a型。

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臨床治療本例患者藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果:復(fù)方新諾明、頭孢曲松、頭孢他啶敏感,左氧氟沙星中介,氨芐西林、環(huán)丙沙星、氯霉素為耐藥。臨床醫(yī)生根據(jù)藥物敏感試驗(yàn)選用復(fù)方新諾明治療,患者痊愈出院。

案例分析
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典型的痢疾臨床表現(xiàn)主要有發(fā)熱、腹痛、腹瀉、里急后重、黏液膿血便,同時伴有全身毒血癥癥狀,嚴(yán)重者可引發(fā)感染性休克和(或)中毒性腦病。菌痢常年散發(fā),以夏秋季多見,是我國的常見病、多發(fā)病。兒童和青壯年是高發(fā)人群。而本例患者主要是高齡老人,無典型的里急后重癥狀,故糞便細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定是診斷感染性腹瀉的好方法。

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B群福氏志賀氏菌是四群中抗原結(jié)構(gòu)最復(fù)雜的、鑒定相對較困難,檢出率占志賀氏菌屬總數(shù)的95.52%,B群中以2、3型最多,占64.84%[2]。其中福氏志賀氏菌2a型和6型有K抗原,會影響血清學(xué)鑒定。志賀氏菌有K和O抗原而無H抗原。K抗原是自患者新分離的某些菌株的菌體表面抗原,不耐熱,加熱100℃1小時被破壞。K抗原在血清學(xué)分型上無意義,但可阻止O抗原與相應(yīng)抗血清的凝集反應(yīng)。而本例標(biāo)本的K抗原主要是引起假陽性凝集,應(yīng)當(dāng)引起足夠的重視,從而避免錯誤的鑒定結(jié)果。

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近年來,由于抗生素的濫用,導(dǎo)致細(xì)菌耐藥率升高,治療越來越困難。臨床治療必須根據(jù)常規(guī)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇療效好、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的抗生素進(jìn)行治療。

總結(jié)

志賀氏菌屬是一類革蘭氏陰性短小桿菌,是細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌。細(xì)菌性痢疾是一種常見的腸道傳染病,屬于國家法定乙類傳染病,主要包括:(1)A群痢疾志賀氏菌,(2)B群福氏志賀氏菌,(3)C群鮑氏志賀氏菌通稱鮑氏痢疾桿菌,(4)D群宋內(nèi)氏志賀氏菌。病原學(xué)診斷主要靠生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定。而血清學(xué)鑒定一定要做陰性陽性質(zhì)控對照試驗(yàn),以確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。


參考文獻(xiàn):

[1].朱忠勇,實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué),人民軍醫(yī)出版社:620-622.

[2].高旭峰,王玉福,阮志剛.惠民縣1200例感染性腹瀉病原學(xué)分析[J]. 職業(yè)與健康雜志,2011,17(12).


 

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