前言：化學(xué)合成藥物中不可避免地會(huì)使用有機(jī)溶劑，但工藝中有的有機(jī)溶劑并不能完全去除掉，這些殘留溶劑對(duì)人體健康和環(huán)境又有可能造成損害，國(guó)際協(xié)調(diào)大會(huì)（ICH）對(duì)殘留溶劑的分類和限量都做了規(guī)定，詳見公眾號(hào)轉(zhuǎn)載的文章“ICH常用有機(jī)溶劑分類及殘留限度”。

對(duì)于溶劑殘留的檢測(cè)首先要明確可能會(huì)有的殘留溶劑，這些溶劑的分類以及檢測(cè)要求。

確定可能的殘留溶劑：

殘留溶劑的檢測(cè)首先要明確有可能會(huì)有哪些溶劑殘留，也就是溶劑有可能在哪個(gè)環(huán)節(jié)帶入，從原料、制備工藝、處方各個(gè)方面都需要考慮可能的殘留溶劑，再根據(jù)殘留溶劑的類型確定殘留溶劑的殘留量限值。

殘留溶劑的分類及研究原則：

1. 第一類溶劑是指人體致癌物、疑為人體致癌物或環(huán)境危害物的有機(jī)溶劑，應(yīng)盡量避免使用，如果使用的話，則需要嚴(yán)格控制殘留量，且任何步驟使用，均需要進(jìn)行殘留量的檢測(cè)；

2. 第二類溶劑是指有非遺傳毒性致癌（動(dòng)物實(shí)驗(yàn)）、或可能導(dǎo)致其他不可逆毒性（如神經(jīng)毒性或致畸性）、或可能具有其他嚴(yán)重但可逆毒性的有機(jī)溶劑。這類溶劑建議限制使用，應(yīng)對(duì)合成過(guò)程中使用的全部第二類溶劑進(jìn)行殘留量研究；

3. 第三類溶劑是指GMP或其他質(zhì)量要求限制使用，對(duì)人體低毒的溶劑。可僅對(duì)終產(chǎn)品精制過(guò)程中使用的這類溶劑進(jìn)行殘留量研究；

氣相方法開發(fā)：

對(duì)于溶劑殘留檢測(cè)通常用氣相色譜來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，在某些情況也會(huì)用到高效液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用等，而殘留溶劑的氣相色譜檢測(cè)方法的開發(fā)相對(duì)簡(jiǎn)單，適用范圍廣。藥典中有給出殘留溶劑的一般建議方法，本文不贅述，但實(shí)際運(yùn)用中不同的溶劑需要再調(diào)整，小編根據(jù)實(shí)際的氣相色譜使用經(jīng)驗(yàn)中氣相色譜方法開發(fā)需要注意的點(diǎn)進(jìn)行總結(jié)：

1. 進(jìn)樣方式：

推薦使用的是頂空進(jìn)樣和溶液進(jìn)樣，溶液進(jìn)樣有很大的溶劑峰，氣相色譜一般都使用低沸點(diǎn)的溶劑，這樣會(huì)對(duì)低沸點(diǎn)的溶劑殘留檢測(cè)造成很大的干擾，所以一般溶液進(jìn)樣用于高沸點(diǎn)的溶劑檢測(cè)，頂空進(jìn)樣用于低沸點(diǎn)的溶劑檢測(cè)。

頂空進(jìn)樣時(shí)，通常用水作溶劑，水溶液中溶劑容易揮發(fā)到頂空氣體中，增加檢測(cè)靈敏度；對(duì)于一些極性組分，可以利用鹽析作用來(lái)增加揮發(fā)性；如果非水溶性藥品，可使用N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜等為溶劑。簡(jiǎn)而言之就是頂空進(jìn)樣中，應(yīng)盡量讓有機(jī)溶劑從樣品中揮發(fā)出來(lái)，才能使檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度增加。

頂空溫度的選擇的原則是必須讓待測(cè)組分都能從樣品中揮發(fā)到頂空中，兼顧樣品中物質(zhì)的熱穩(wěn)定性，以免帶入干擾物質(zhì)。平衡時(shí)間也是和溫度相對(duì)應(yīng)的，溫度越高，平衡時(shí)間越短；一般情況使用藥典建議的就可以。

2.色譜柱的選擇：

頂空進(jìn)樣一般選用毛細(xì)管色譜柱，溶液進(jìn)樣選擇合適的分流比也可以選擇毛細(xì)管色譜柱，毛細(xì)管柱分離效率高，氣相色譜柱固定液的選擇根據(jù)“相似相溶”的原理，以待分析的化合物的極性選擇合適的色譜柱，相同極性的色譜柱之間可替換，小編以前實(shí)驗(yàn)室常備的是HP-WAX和HP-5的色譜柱，基本滿足大部分的分析需求，常用的色譜柱見下表:

氣相色譜柱柱子根據(jù)實(shí)際需要，柱子越長(zhǎng)越長(zhǎng)分離效率越高，但時(shí)間長(zhǎng)，柱子內(nèi)徑增大，會(huì)使柱效下降。

3.載氣：

載氣的選擇一般是根據(jù)檢測(cè)器和分離要求決定的，氣相色譜一般使用N₂作為載氣，氣質(zhì)聯(lián)用時(shí)使用He作為載氣，對(duì)于分離要求高的會(huì)使用H₂作為載氣，但H₂作載氣的時(shí)候用于ECD檢測(cè)器。

4.進(jìn)樣口溫度：

進(jìn)樣口的溫度是根據(jù)樣品的沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性、進(jìn)樣量、柱溫等綜合考慮，不一定要達(dá)到沸點(diǎn)，但要保證樣品能隨著載氣進(jìn)入色譜柱而不析出來(lái)，進(jìn)樣量小的時(shí)候可以降低進(jìn)樣口溫度，一般高于柱溫10~50℃。

5.升溫程序：

升溫程序類似于液相色譜的洗脫程序，起始溫度和升溫速率對(duì)分離的影響比較大，起始溫度低有助于提高分離，升溫速率低也是，但過(guò)低峰形變寬，所以需要綜合考慮。相對(duì)液相洗脫程序要容易得多。但終止溫度需要保證樣品都能夠隨著載氣流出，以免影響下一針的干擾。

6.檢測(cè)器：

定量常用的檢測(cè)器是FID，TCD也是通用型的檢測(cè)器，但靈敏度相對(duì)較低。FPD和NPD適合含硫和含氮溶劑的檢測(cè)，含鹵素的溶劑，如氯仿等適合用ECD檢測(cè)。

參考：

1.化學(xué)藥物溶劑殘留研究的技術(shù)指導(dǎo)原則

2.中國(guó)藥典2015版

3.現(xiàn)代香味分析技術(shù)及應(yīng)用.謝建春