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1、倒平板

（1）培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻至50℃左右才能倒平板。

（2）左手拿培養(yǎng)皿，右手拿錐形瓶，左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開。

（3）整個操作在酒精燈火焰旁進行，避免雜菌污染。

（4）平板冷卻以后需要倒置，其原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。

（5）如果倒平板時，培養(yǎng)基濺在培養(yǎng)皿蓋與培養(yǎng)皿底之間的部位，這個平板應(yīng)該丟棄。

2、平板劃線操作

（1）第一次劃線灼燒滅菌的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基，每次劃線之前都需要灼燒滅菌的目的是殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，劃線操作結(jié)束以后仍然需要灼燒接種環(huán)目的是避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。

（2）灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度過高殺死菌種。

（3）劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。

（4）劃線時用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。

3、反復(fù)使用式薄膜過濾器操作

（1）在使用完以后應(yīng)立即對其進行清洗處理。

（2）消毒時將濕態(tài)膜貼在支撐板上，蓋上密封墊圈，將貯液杯和支座螺紋稍旋緊，待消毒后在旋緊，以紗布包裹進行熱壓消毒，以免微孔濾膜破裂。

（3）薄膜過濾器蓋上有孔，可套針頭過濾器用以過濾外界空氣，以免污染。