你遇到過嗎？

今天化驗(yàn)結(jié)果出來了，25羥基維生素D2偏低，大夫讓打針，有沒有一樣的寶寶？這種情況必須要打針嗎還是吃藥也可以？

25-羥基維生素D2、25-羥基維生素D3是哈？

維生素D(vitamin D)是一類脂溶性維生素，屬固醇類衍生物，是包括人類在內(nèi)的高等動(dòng)物生命必需的重要營(yíng)養(yǎng)素。維生素D主要的生理功能是調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣、磷代謝并維持血漿鈣、磷水平穩(wěn)定，參與個(gè)體牙齒和骨骼的正常生長(zhǎng)發(fā)育。維生素D主要包括五種化合物， 分別為維生素D1、D2、D3、D4和D5，家族成員中最重要的是D2和D3，通常所說的維生素D即指這兩種形式。

血清25羥維生素D水平也可作為維生素D營(yíng)養(yǎng)狀況的客觀指標(biāo)，維生素D與健康的定量關(guān)系研究發(fā)展迅速。目前判斷成人維生素D營(yíng)養(yǎng)狀況的標(biāo)準(zhǔn)為：維生素D缺乏為血清25-(OH) D水平<50nmol/L（1 nmol/L = 0.4 ng/ml）、不足為50～75nmol/L、充足為>75nmol/L。

血清25羥維生素D在調(diào)節(jié)激素分泌、調(diào)節(jié)免疫功能、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和分化等方面的臨床意義。

維生素D過多常由于過量攝入維生素D引起。其臨床表現(xiàn)為疲勞、無力、食欲缺乏、惡心、嘔吐、腹瀉等，嚴(yán)重者可有生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、高熱、脫水、癲癇發(fā)作等，可引起腎、腦、肺、胰腺等臟器有異位鈣化灶和腎結(jié)石。 

維生素D作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，既可預(yù)防及治療疾病，又不會(huì)引起廣泛的免疫抑制作用，并且在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)其對(duì)MS有一定的預(yù)防作用。Munger等對(duì)美國(guó)7萬軍方人員的研究發(fā)現(xiàn)，MS患者脫髓鞘的發(fā)生與維生素D3水平的季節(jié)性波動(dòng)一致，且口服維生素D3后可減少M(fèi)S的發(fā)生。在一項(xiàng)長(zhǎng)達(dá)20年，以18.7萬名美國(guó)女性為對(duì)象的研究發(fā)現(xiàn)服用含有維生素D的復(fù)合維生素片的人發(fā)生MS的比例比不服用維生素片劑的婦女低40%。曬太陽是人類產(chǎn)生維生素D的主要方法，研究人員發(fā)現(xiàn)離赤道越遠(yuǎn)的地方罹患MS的人數(shù)越多。在美國(guó)一項(xiàng)大型的研究中也發(fā)現(xiàn)，居住在較高緯度地區(qū)的婦女，診斷出MS的比例是居住在南方地區(qū)婦女的3.5倍。

本文推薦了最先進(jìn)的分析技術(shù)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行測(cè)定。

由于測(cè)定方法的樣品來自體液血液或尿液，因此樣品前處理是一個(gè)技術(shù)活。最近ISOLUTE? PLD 除蛋白和磷脂板比傳統(tǒng)的蛋白沉淀技術(shù)，ISOLUTE? PLD 大幅改了提取清潔度。

第一步：破碎

第二步：混勻

第三步：洗脫

放大PLD

洗脫目標(biāo)物

正壓3psi或-2bar真空下約5分鐘，如果樣品含有高顆粒物可以適當(dāng)增加壓力或真空條件。

萃取后處理

使用Biotage? SPE Dry (40 °C ，40 L/min)或TurboVap? (40°C ，1.0 bar). 空氣或氮?dú)鈿饬鞔蹈奢腿∫骸?/span>

定容

用100uL30/70甲酸銨（2mM）100μl，0.1%甲酸水/甲醇定容。

UPLC的條件

儀器：Waters Acquity UPLC 

質(zhì)譜的條件

Quattro Premier XE三重四極桿，ESI電噴霧離子源

色譜圖

三分鐘完成25-羥基維生素D2和D3分析，如圖。

回收率

使用血清和處理過的血清，在不同濃度2-00ng/mL下測(cè)試，高重現(xiàn)的回收率>70%。如下圖。

PBS/BSA校正曲線

使用PBS/BSA，在不同濃度1-100ng/mL的校正曲線測(cè)定25-羥基維生素D2和D3，具有非常好的相關(guān)系數(shù)，r2 > 0.99。圖略。

Chromsystems 校正曲線

使用已經(jīng)校正的血清標(biāo)準(zhǔn)（采購(gòu)自Chromsystems），在0-69ng/mL的濃度下，測(cè)定25-羥基維生素D2和D3，具有非常好的相關(guān)系數(shù)，r2 > 0.99。圖略。

DEQAS外部質(zhì)量評(píng)估方案

本方法最后經(jīng)5個(gè)DEQAS血清樣品萃取測(cè)試，一起與Chromsystems校正因子進(jìn)行優(yōu)化。DEQAS標(biāo)準(zhǔn)至少80%的結(jié)果落在所有實(shí)驗(yàn)室修剪平均的 或-25%以內(nèi)。圖略。

訂貨信息

貨號(hào)：918-0050-P01 ，ISOLUTE? PLD 固定孔板 數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：121-9600 Biotage  VacMaterTM-96 樣品處理歧管 數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：PPM-96，Biotage PRESSURE 96 正壓歧管，數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：SD-9600-DHS-EU，Biotage? SPE Dry樣品濃縮系統(tǒng)220/240V 數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：C103264，TurboVap  96樣品蒸發(fā)儀220/240V 數(shù)量：1個(gè)

本文來自：Application Note AN842.V.1：Extraction of 25-hydroxy Vitamin D from Serum Using ISOLUTE?  PLD Prior to LC-MS/MS Analysis 

VA和VE的測(cè)定

2分鐘固萃5分鐘質(zhì)譜分析，24小時(shí)竟然......

關(guān)于綠綿科技

北京綠綿科技有限公司(簡(jiǎn)稱：綠綿科技)以體現(xiàn)客戶服務(wù)最高價(jià)值為宗旨，以專業(yè)精神和技能為廣大實(shí)驗(yàn)室分析工作者提供樣品前處理、樣品制備及分析、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)精確分析和管理的全面解決方案，致力于協(xié)助客戶提高分析檢測(cè)的效率和水平。主要代理產(chǎn)品：LabOS實(shí)驗(yàn)室運(yùn)營(yíng)系統(tǒng)、Lumtech半制備/制備液相色譜、MassWorks準(zhǔn)確質(zhì)量測(cè)定及分子式識(shí)別、New Objective納噴離子源、GE生命科學(xué)設(shè)備、凝膠凈化前處理、在線固相萃取、濃縮儀、氮吹儀、電噴霧離子遷移譜、全柱成像毛細(xì)管等電聚焦電泳儀、實(shí)驗(yàn)室氮?dú)鈿錃饪諝獍l(fā)生器、Agilent中端氣相液相、生物耗材、Buffer緩沖液、固相萃取耗材。

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