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人工授精是以種豬的培育和商品豬的生產(chǎn)為目的而采用的最簡(jiǎn)單有效的方法,是進(jìn)行科學(xué)。 養(yǎng)豬、實(shí)現(xiàn)養(yǎng)豬生產(chǎn)現(xiàn)代化的重要手段。人工授精是先進(jìn)的繁殖技術(shù)的的代表,受到許多大規(guī)模豬場(chǎng)的重視。在這里,與人工受精的朋友一起探討現(xiàn)代化豬場(chǎng)人工授精地開(kāi)展。 一、到底什么是人工授精技術(shù) 人工授精就是利用科學(xué)的采精方法采取公豬的精液,經(jīng)過(guò)品質(zhì)檢查、稀 或保存等適當(dāng)?shù)奶幚?,再用器械將處理好的精液適時(shí)的輸?shù)侥肛i的生殖道內(nèi),以代替公母豬直接交配而使用的配種種方法。 二、 人工授精的優(yōu)越性 1 、人工授精能最大限度的發(fā)揮公畜的種用價(jià)值,提高了公豬的配種效能。 2、 由于人工授精能有效地提高公畜的利用率,因此就有可能對(duì)種公畜進(jìn)行嚴(yán)格的選擇保留最優(yōu)秀的個(gè)休用于配種,從而加速了育種工作的步伐,成為增殖良種家畜和改良畜種的有力手段。 3、 由于人工授精減少了公豬的飼養(yǎng)頭數(shù),從而節(jié)約了飼養(yǎng)管理費(fèi)用,降底了生產(chǎn)成本。 4、 人工授精使用檢查合格的精液,心保證質(zhì)量,也便于掌握配種,并可提供完整的配種記錄,及時(shí)發(fā)現(xiàn)和治療不孕的母豬,因此有肋于消滅母畜不孕和提高受胎率。 5、 人工授精避免了公母豬的直接接觸,同時(shí)按操作規(guī)程處理精液和輸精,因此可防止各種疾病和傳播。在人工受精中可以由輸精傳染的疾病有:口蹄疫、非洲豬瘟、水泡病、偽狂、細(xì)小病毒等,故對(duì)人工授精的公豬應(yīng)進(jìn)行必要疾病檢測(cè)。 6、 可以克服公母豬因體格相差太大不易交配或生殖道某些異常不易受胎的困難。也可以克服個(gè)別母豬不愿意與個(gè)別公豬交配的問(wèn)題。 7 、 經(jīng)保存的精液便于運(yùn)輸、交流和檢疫。 8 、人工授精也是胚胎移植和處理同期發(fā)情技術(shù)中一項(xiàng)配套技術(shù)措。 9、有利于防疫 10 、有利于提高商品豬的品質(zhì)。 三: 人工授精的發(fā)展概況 豬人工授精的研究,是從公元老派780年意大利科學(xué)家司科拜倫瑾尼第一次對(duì)母豬進(jìn)行人工授精獲得成功后,在世界各地便開(kāi)始了家畜的人工授精試驗(yàn)。在美國(guó)人工授精技術(shù)的應(yīng)用開(kāi)始于20世紀(jì)70年代,普及率目前達(dá)到場(chǎng)30——50%:有專業(yè)人士估計(jì),21世紀(jì)初,美國(guó)人工授精的普及率達(dá)到80%以上。歐洲的豬人工授精技術(shù)的發(fā)展,是在公元1967年新西蘭暴發(fā)口蹄后才逐步加速的。我國(guó)的人工授精技術(shù),從50年代開(kāi)試驗(yàn),到60年代以后轉(zhuǎn)入應(yīng)用,并在少省份推廣普及,主要以外國(guó)品種的種豬與地方豬雜交為主,但是由于技術(shù)不成熟,設(shè)備簡(jiǎn)單,觀念沒(méi)有根本改變而導(dǎo)致了這時(shí)人工授精的失敗。到了90年代,在華南的廣東,`廣西等省,區(qū),人工授精技術(shù)逐步被大型豬場(chǎng)所認(rèn)可和使用,并呈現(xiàn)良好的發(fā)展勢(shì)頭。 四、 人工授精公豬的選擇和管理 俗語(yǔ)說(shuō)的好:“母豬好,好一窩,公豬好,好一坡?!边@句話有力的說(shuō)明了,雖然母豬在后裔的傳中各占50%的影響力,但在正常自然交配情況下,一頭公豬可和20—25頭母豬配種,在人工授精中一頭公豬可與80—150頭母豬配種。在人工授精的優(yōu)點(diǎn)中有一點(diǎn)就說(shuō)明了,如果公豬有其它的傳缺陷,那么它所帶來(lái)的負(fù)面影響也是很大。 人工授精公豬的選擇:用于人工授精的公豬要求符合本品種特證、體質(zhì)健壯、結(jié)構(gòu)勻稱、性欲旺盛、性優(yōu)秀。初選公豬要求射精量超過(guò)平均水平(250m1),精子活力達(dá)80%以上,畸型率不超過(guò)去時(shí)18%,精子的密度不低于是1.8億/m1。 公豬的淘汰: (1):有更優(yōu)良的公豬時(shí)。 (2):精液檢查品質(zhì)不行的公豬,活力低于0.6,密度達(dá)不到中級(jí)水平的公豬。 (3):健康有問(wèn)題的公豬。 (4):過(guò)分的公豬。 (5):年邁過(guò)老的公豬。 公豬的使用:后備公豬必須在9月齡體重在130公斤以上,投入采精的使用,青年公豬每周采精1—2次,成年公豬采精2—3次,固定采精頻率。 公豬的運(yùn)動(dòng):公豬除了在欄內(nèi)運(yùn)動(dòng)外,應(yīng)盡量趕到戶外運(yùn)動(dòng),上下午各一次,每天行程一公里,夏季(氣溫高于30℃)時(shí),在早、晚涼爽時(shí)進(jìn)行,冬季(氣溫低于10℃時(shí))可在中午運(yùn)動(dòng)一次,下雨天及氣溫低于5℃應(yīng)在走產(chǎn)道內(nèi)運(yùn)動(dòng)。 防暑降溫:嚴(yán)格做好公豬復(fù)季防暑,冬季保溫工作,同時(shí)適當(dāng)注意室內(nèi)采光和濕度控制。種公豬在33℃的高溫環(huán)境下處理72小時(shí),其精精品質(zhì)受到嚴(yán)重的影響。表現(xiàn)出精子活動(dòng)力下降、總精子數(shù)和活精子數(shù)減小、畸型精子增加,因而使與配母豬的妊娠率下降,胚胎成活率低。從影響時(shí)間來(lái)看,處理58天后精液品質(zhì)才恢復(fù)一正?!,F(xiàn)在人工授精站采用水簾降溫設(shè)施,其操作程序如下:檢查設(shè)備是否處于正常,包括水泵、水簾、風(fēng)機(jī)、水源、及電路是否正常。在復(fù)季窒內(nèi)氣溫高于29℃時(shí),開(kāi)啟水簾降溫設(shè)施,效果視氣溫而定:當(dāng)外界氣溫在35℃以上時(shí),可降下7—9℃:當(dāng)外界氣溫在35—29℃,可以降下5℃左右。 防止公豬咬架:公豬好斗,如偶爾相遇也是會(huì)打架。采取辦法有:用發(fā)情的母豬引誘或用木板將其隔開(kāi),也可以用水猛沖公豬的眼部將其攆走。 五、在生產(chǎn)中公豬精液的規(guī)律性的變化 環(huán)境季節(jié)溫度對(duì)公豬精液品質(zhì)有較大的影響??傮w上季節(jié)溫度對(duì)精子活力、密度和的效精子數(shù)和影劇院響較大,對(duì)采精量的影響相對(duì)較小。6—8月份高溫天氣精子活力、密度和有較精子數(shù)均下降,并一直后續(xù)影響到11—12月份。 六、公豬的采精 (一) 公豬的采精方法 1、電刺激法 是將兩級(jí)的探棒插入公豬直腸并以低電壓脈沖刺激生殖道的肌肉誘發(fā)射精。這種采精的方法對(duì)精子無(wú)害,但精液比自然交配的精液要稀且成功率不高,此法適用于因腿傷不能爬母豬臺(tái)且種用價(jià)值較高的公豬公豬采精。 2、假陰道采精法 采用模擬母豬陰道環(huán)境的的假陰道,當(dāng)公豬爬跨發(fā)情母豬或假母豬臺(tái)時(shí),將公豬陰莖導(dǎo)入假陰道內(nèi),并采集精液。這種方法比較方便,但公豬射精時(shí)間比較長(zhǎng)而且采得的精液中可能會(huì)被尿液或細(xì)菌污染,加之假陰道使用后需要非常仔細(xì)的清洗和消毒,費(fèi)時(shí)費(fèi)力,故現(xiàn)在已很少用。 3、徒手采精法 采精時(shí)用帶手套的直接握住陰莖,使用合適的力度采取公豬精液的一種采精方法。由于此方法簡(jiǎn)單而且相對(duì)衛(wèi)生安全,所以在生產(chǎn)中一般采用此采精方法?,F(xiàn)在就詳細(xì)介紹徒手采精方法。 (二) 公豬的采精步驟 1、 采精室的準(zhǔn)備:每天采精后必須對(duì)采精窒進(jìn)行一次清洗、消毒,并打開(kāi)窗戶使之干燥 。 2、用具的準(zhǔn)備:用消毒外科紗布套好集精杯,連同集精杯、載玻片及稀用的玻棒、溫度計(jì)、盛有37℃稀液的量杯放入37℃怛溫箱中預(yù)溫。 3、采精公豬準(zhǔn)備: a) 用來(lái)采精的公豬體表必須干凈,臟的地方必須進(jìn)行清洗。 b) 清洗公豬陰莖外部并用0.7%的鹽水沖洗,包皮有積尿的公豬應(yīng)先擠凈尿液,清洗污垢清洗過(guò)程中,對(duì)公豬陰部進(jìn)行按摩。 4、采精的準(zhǔn)備工作:采精員先用清水將雙手清洗干凈,后用37℃的鹽水沖凈,冷天采精人員雙手用溫水暖熱 5、采精操作 1) 將公同豬趕至采精窒,讓公豬親切、嗅聞假母豬臺(tái),以增強(qiáng)公豬的情欲。 2) 采精人員蹲于假母豬臺(tái)后則,與公豬同方向。 3) 待公豬爬上假母豬臺(tái)、陰莖伸出時(shí),用手握住陰莖的龜頭部,并趁公豬前擁之勢(shì),拉出陰莖,手握陰莖部位,要露出螺旋部1厘米。注意不要強(qiáng)拉出陰莖以免拉傷陰莖。特別指指出:公豬陰莖對(duì)溫度的敏感不及對(duì)壓力的敏感,所以掌握適當(dāng)?shù)膲毫κ遣删晒Φ年P(guān)鍵。 1) 手心呈握拳狀,力量多用在食指和中指上。注意:在公豬射精時(shí),手用的力量只是不讓陰莖從手中脫為準(zhǔn),以利于采到精更多、質(zhì)量較好的精液:而且在射精時(shí),手最好不要?jiǎng)赢?dāng)公豬完成一次射精時(shí),右以每隔3—5秒有節(jié)奏的握動(dòng)一次,以刺激公豬開(kāi)始一落的射精。 2) 公豬精液的收集:公豬射精分2—3個(gè)射精,甚至更多。公豬先射出的第一部 分是膠體,含精量少,而且有尿道內(nèi)雜物,因此第一部分精液不收集。第清亮精液射出后,第二部分是精子數(shù)量多,質(zhì)量好,顏色呈乳白色,不透明的濃精,我們主要收集這一部分精液。第三部分精液為清的膠體,精子量少,該部分精液也不收集。收集精液時(shí)應(yīng)小心,避免被任何臟物污染。 3) 公豬射完畢后,陰莖自然會(huì)軟下來(lái),要讓其自然收回包皮,不能推陰莖,防止挫傷陰莖。 4) 采精時(shí),人員,場(chǎng)地要相對(duì)移定,環(huán)境相對(duì)安靜。 5) 采完精后,先將采精上的過(guò)濾紗布去掉,然后用蓋子蓋住精液袋,通過(guò)與化驗(yàn)室的窗口交給化驗(yàn),輕輕地將公豬趕回原欄。 七、化驗(yàn)室的精液品質(zhì)檢查 1、外觀檢查 (1)射精量:在天平上可以直接稱取精液的重量,一般公豬射精為150—500m1,成年公豬射精不低200m1.。 (2)色澤:正常精液的顏色應(yīng)為灰色或乳白色。若呈粉紅(有血液)、黃綠色(有膿或炎癥)、褐色(被污染)等顏色均為不正常顏色,這樣的精液是不合格的精液。 (3)氣味:稍有腥味,若有其它的氣味均為不合格。 2、顯微鏡粗細(xì) (1)在30—38℃帶恒溫水的顯微鏡下,用經(jīng)灑精燈火焰消毒過(guò)的接種環(huán)取一滴精液于載玻上通過(guò)CCD攝像管連接電視,用10 的物境、目鏡觀察精液的上中下三層精液樣本2—3個(gè)視野,判斷直線運(yùn)動(dòng)的精子占總子數(shù)的比率,評(píng)出該精液的活率。 (2)精子的密度的粗評(píng)按精子空隙大小評(píng)定。密為精子旋轉(zhuǎn),精子之間容納不下一個(gè)精子的頭距(+++表示):稀為淡精液,可以有一個(gè)精子長(zhǎng)度距離(+表示):中間型在二者之間(++表示)。 A、用血球計(jì)數(shù)板測(cè)量精液的密度: I、顯微鏡放大100~250倍尋找血細(xì)包計(jì)數(shù)板上的計(jì)算窒(計(jì)算窒為25個(gè)大方格,每個(gè)方格中又劃分為16個(gè)小方格。計(jì)算窒的面積為1平方毫米,高度為0.1毫升米) II、根據(jù)不同家畜精子的密度的不同,分別采用紅細(xì)管(如牛、)白細(xì)管(如豬、馬)吸取精液樣品。 III、用3%NACL溶液稀樣并致死精子,使于觀察計(jì)數(shù)。 IV、將稀后的精子滴入計(jì)算窒內(nèi)。 V、顯微鏡放大400—600倍抽樣觀察計(jì)算5個(gè)大方格(即80個(gè)小方格),內(nèi)的精子數(shù)(抽樣觀察的5個(gè)大方格,應(yīng)位于一條對(duì)角線上可取四角加中央5個(gè)大方格)。 VI、將5個(gè)大方格內(nèi)的精子總數(shù)代入計(jì)算公式,換算出每一毫升原精子內(nèi)的精子數(shù)。1毫升原精子內(nèi)的精子數(shù)=5個(gè)大方格內(nèi)的精子數(shù)×5(等于整個(gè)計(jì)算窒25個(gè)大方格內(nèi)精子數(shù))×10(等于1立方毫米內(nèi)精子數(shù))×1000(等于被檢稀精子樣品精子數(shù))×被檢精液的稀倍數(shù)) VII、 為了保證精子計(jì)數(shù)的準(zhǔn)備性,在采用此法時(shí)特別注意以幾點(diǎn): 一是: 原精液樣品的吸取與稀要做到準(zhǔn)備無(wú)誤,滴入的精液不要太多也不要太少,切不可以滴入太多而外溢,也不可以太少以致窒內(nèi)出現(xiàn)空泡。 二是: 為了既不漏也不重復(fù)計(jì)數(shù),因此計(jì)算每一個(gè)大方格內(nèi)的精子順序由上而下,由左之至右,再由右至左進(jìn)行。 而計(jì)算每一個(gè)小方格內(nèi)的精子時(shí),皆以精子頭部為準(zhǔn)。凡頭部落在方格內(nèi),左限線上和上限線者,均為本方格內(nèi)的精子數(shù),反之,凡屬頭部落在右限線上和下限線上,以及頭部一不落在本方格內(nèi)的精子數(shù),均不計(jì)入本方格內(nèi),簡(jiǎn)而言之,即以謂對(duì)壓經(jīng)線的精子是數(shù)頭不數(shù)尾,數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右。 三是: 為了減少誤差,每份精液都應(yīng)陳取兩個(gè)樣本,求其平均數(shù)。 B、利用精子計(jì)數(shù)器計(jì)算精子密度: 取具有代表性的鮮精0.3毫升,取2.7毫升充分溶解的稀液,混勻,在歸零的計(jì)算器中測(cè)量出比色血的讀數(shù),得出計(jì)算表中的豎軸讀數(shù),在計(jì)算表中讀出軸讀數(shù),再在精子密度對(duì)照表中找出零要的密度的原精液量(m1),除以該份精液的活率,即得出每份精液零要的原精量。(具體操作詳見(jiàn)其說(shuō)明書(shū)) C、根據(jù)對(duì)精液的外觀檢查和精子活力顯微鏡觀察,確定該精液能不能用。 3、精子活力的評(píng)定: 精子活力和表示有兩種方法:一種是歐美習(xí)慣用法,由世界衛(wèi)生組織和國(guó)際識(shí)+,++、+++表示,在我國(guó)沿用前蘇聯(lián)的方法,以0—9級(jí)表示。 按歐美的表示方法是:取10—100微升原精液,置干凈的載玻片上,用22平方毫米的蓋玻片蓋上,在400倍光鏡下觀察10不同視野下必須有100個(gè)以上的精子,分別記錄活動(dòng)的狀況,以0—4級(jí)統(tǒng)計(jì)精子的運(yùn)動(dòng)方向,活動(dòng)力強(qiáng)弱,分別計(jì)錄各級(jí)活動(dòng) 精子的百分率。 0、“0”無(wú)精子運(yùn)動(dòng),為死精。 1、“+”精子運(yùn)動(dòng)較差,為顫動(dòng)或擺運(yùn)。 2、“++”精子運(yùn)動(dòng)尚可,可見(jiàn)向前運(yùn)動(dòng),但速度很慢。 3、“+++”粗子運(yùn)動(dòng)很好,向前運(yùn)動(dòng)較快‘ 4、“++++”精子運(yùn)動(dòng)極好,迅速向前運(yùn)動(dòng)。 精子運(yùn)動(dòng)力與受精力關(guān)系密切。在豬人工授精中原精活力低于于國(guó)內(nèi)目前習(xí)慣評(píng)定0.7級(jí),相當(dāng)于歐美以及日本和臺(tái)灣“+++”,冷凍精液解凍后不低于3級(jí)(++),即目前習(xí)慣上的0.6級(jí).精子的運(yùn)動(dòng)力的測(cè)定在豬人工授畏中尚缺統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn).在生殖生物學(xué)中規(guī)定人和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)如下: 取原精液通過(guò)玻璃管脫棉,取12—20滴精液用50m1 12.9%檸檬酸鈉溶液稀釋。讓混合液,(標(biāo)本)在方形小杯直至得到一條水平其線,標(biāo)本以分光光度計(jì)在254nm吸光度下分折,當(dāng)?shù)瘟魍V?,光度?od)減少,就測(cè)得全部精子的運(yùn)動(dòng)力。運(yùn)動(dòng)力以SMI表示。 SMI=(開(kāi)始時(shí)間od值—30秒時(shí)的od值)/開(kāi)始時(shí)的od值 對(duì)每一個(gè)樣本作三次測(cè)定,求其平均值。從生殖生物學(xué)研究證明,每一個(gè)體都有一個(gè)重復(fù)性很高的,(非常移定的)的SMI 值,對(duì)于種豬而言,急迫需要研究個(gè)體的SMI值及其生殖力的關(guān)系 WHO規(guī)定由以色列發(fā)明的精子計(jì)數(shù)算板為國(guó)際準(zhǔn)備板,如果計(jì)算一百萬(wàn)個(gè)精子,以時(shí)間計(jì)算檢查射出的精液中,每一100個(gè)精子穿過(guò)一個(gè)計(jì)算窒孔(其容積為每邊0。05毫米,深0。02毫米),則精子運(yùn)動(dòng)速度(V)按下式求出: V=N/G.TCOS45° 精子運(yùn)動(dòng)速度平均值N,精子通過(guò)孔(G)的數(shù)目此此即0.05*0.03=0.001平方毫米,精子的密度(D)100個(gè)精子穿孔的時(shí)間(T): COS45°在公式中的作用是表示精子不完全是垂直線通過(guò)的,如果N=100個(gè)精子,則公計(jì)算如下: V=14,00/(T).(D). 如果(T)是以秒計(jì)數(shù),精子密度(D*100萬(wàn)/m1)則A值等于每秒若干U。如果豬精液密度為160*106個(gè)/毫升,那么100個(gè)精子通過(guò)(G)孔,需時(shí)間為: V=140,000/(7*160)=125微米/秒 精子運(yùn)動(dòng)力是生殖力的重要一項(xiàng)屬性,沒(méi)有高活性運(yùn)動(dòng)的精子,其受精力是非黨低的。 4、 精子形態(tài)的檢查 (1)、 取精液體本一滴與,10%的福馬林相混合均勻,蓋上蓋玻片在相差顯微鏡 400—600倍下觀察。 (2)、、取10m1試管內(nèi)盛伊紅染液 (1%)1 m1,加入0.2 m1,置于37℃水浴鍋中怛溫浸染20分鐘,取一滴伊紅染后的的精液,再滴加一滴5%苯胺黑或苯胺蘭混勻染色后抹片,用顯微鏡在640或800倍下觀察,死精液為紅色,活精子不為紅色,活精子不著色.每個(gè)抹片觀察200個(gè)以上的精子,得到活率.然后觀察分類計(jì)數(shù),正常頭、大頭、小頭、梨形頭、雙頭、雙頸、雙尾、無(wú)頭、斷尾、折尾、卷尾、頸和中含有原生質(zhì)滴以及稚形未成熟的精子等。正常形態(tài)精子在鮮精中應(yīng)不低于82%,保存過(guò)的精液正常精子的不低于80%。 5、精子對(duì)1%氯化鈉的抵抗力 此法由前蘇聯(lián)1934年提出,被稱為精子抗菌素力試驗(yàn)。方法是采用定量的精液(0.02毫升),每次加10m1的1%的氯化鈉溶液,混勻后鏡檢精子活力直至全部精子失去運(yùn)動(dòng)能力為此.最后按以下公式計(jì)算抗菌素力 抗力系數(shù)=加入氯化鈉溶液的總量÷所取原精液的量 為縮短時(shí)間,可以改為逐級(jí)擴(kuò)大稀的方法,一般要求在15分鐘內(nèi).測(cè)定時(shí)的室溫應(yīng)保持18~25℃. 抗力系數(shù)的高低,反映了精子容忍偏高滲溶液和高倍稀能力,豬的抗力系數(shù)為2000~5000. 八、精液的稀釋與分裝 (1)好的稀液應(yīng)具備的條作 1、好的稀液應(yīng)具備的條件 2、具有良好的緩沖能力具有與精液幾乎一樣的滲透 3、具有良好的衛(wèi)生條件 4、具有良好的抗菌素繁殖的能力 5、具有精子能生存的ph值,且有肋于精子的保護(hù) 6、具有良好 的抗制細(xì)菌生長(zhǎng)的能力防止細(xì)菌對(duì)精子的威害 稀液的準(zhǔn)備:常用的稀劑的KIEV、BTS、20RPVA。 (2)稀液的配制的的基本原則 配制稀液的各種原料品質(zhì)要純凈,一般要選則化學(xué)純或分折純制劑,同時(shí)要使用分析天平或電子天平嚴(yán)格按配方準(zhǔn)確稱量.不能以人用的口服葡萄糖代替化學(xué)純分折純的葡萄糖:不能未知含糖量的奶粉代替新鮮奶液;卵黃要取新鮮雞蛋,并且不應(yīng)混入蛋白或卵黃膜等雜物:稀用水最好ph值為7天左右的中性新鮮純凈蒸餾水,不要以普通開(kāi)水代替:對(duì)新購(gòu)進(jìn)的抗菌藥物,最好在大批使用前進(jìn)行效果試驗(yàn),證明對(duì)精子無(wú)害才可以安全使用. 配制和分裝稀的的一切藥物品用具,事先都必須刷洗干凈和嚴(yán)格消毒. 配制稀液的各種藥物原料用水溶解后要進(jìn)行過(guò)濾,以盡可能除去雜物異物.然后采用隔水沸消毒或高壓消毒. (3)配制好的稀液如不現(xiàn)用,應(yīng)注意密封保存不受污染.卵黃,奶類,抗菌素等必須成分應(yīng)在臨用時(shí)添加. (4)稀液的主要成分和作用 a、稀劑 主要用以擴(kuò)大精液的容量,因此,此類物質(zhì)在稀中的劑量,必須保證每個(gè)稀液與精液具有相同或相似的滲透壓. b、營(yíng)養(yǎng)試劑 營(yíng)養(yǎng)劑主要是提供營(yíng)養(yǎng),以補(bǔ)充精子在代謝過(guò)程中消耗的能原,由于精子代謝只是單純的分解作用,而不能通過(guò)同化作用將外界物質(zhì)轉(zhuǎn)化為自身成分.因此,為了補(bǔ)充精子的能量消耗,只可能使用最簡(jiǎn)單的能量物質(zhì),一般多采用葡萄糖\果糖\乳糖等糖類以及鮮奶及奶制品\卵黃等. c、保護(hù)劑 保護(hù)劑主要是保護(hù)精子免受各種不良外界環(huán)境因素的危害.所以,保護(hù)劑以可以分多種成分: 緩沖物質(zhì) 緩沖物質(zhì)是用以保護(hù)精液適當(dāng)?shù)?ph值.貯存于附睪中的精液呈酸性而有利于抑制精子的活動(dòng)和代謝.但在射精過(guò)程中會(huì)與減性的副性腺會(huì)必物相混合而變?yōu)槿鯗p性,因而激發(fā)了精子活動(dòng)和加速精子的代謝過(guò)程,在精子代謝過(guò)程中,由于代謝產(chǎn)物(如乳酸和碳酸)的積累,ph又會(huì)發(fā)生偏酸性變化會(huì)影響精液品質(zhì),甚至使精子自身酸中毒而發(fā)生不可逆的變性.因此,需要在稀液中加入適量的緩沖劑,以保持精液相對(duì)恒定的ph值.常用作緩沖劑的物質(zhì)擰檬酸鈉,灑石酸鉀鈉,磷酸二氫鉀的磷酸氫二鈉等.近年來(lái)在各種家畜精液稀液中常采用tris,這是一種減性沖劑,對(duì)精子代謝酸中毒和酶活動(dòng)反應(yīng)具良好的緩閃電戰(zhàn)作用. 非電解質(zhì)或弱電解質(zhì) 具有降低精清中電解質(zhì)濃度的作用,副性腺體分泌物的電離度,比附睪中的精液高10倍,因些比射出的精液的精清中電離度也很高.這一方面在生理上具有激發(fā)精運(yùn)動(dòng)作用,而有利于精子和卵子的受精過(guò)程的完成:但同時(shí)又會(huì)促進(jìn)精子的早衰,破環(huán)精子脂蛋白膜,使精子失去電荷而凝聚,以至不利于精液保存.為此,有必要在稀液中加入適當(dāng)?shù)姆请娊赓|(zhì)或弱電解質(zhì),以降低精清中的電解質(zhì)濃度.一般常用的非電解質(zhì)為各種糖類\弱電解質(zhì)\如胱氨酸等.此外因豬精液的副防冷刺激物質(zhì)性腺分泌物多,可以在稀后再作適當(dāng)?shù)南♂? d、防止刺激物質(zhì) 具有防止精子冷休克的作用。在保存精液時(shí),常是降溫處理,尤其是從20℃以上急劇降到0℃時(shí),由于冷刺激,會(huì)使精子遭受冷休克而喪失活力。這是因?yàn)榫觾?nèi)的縮醛脂融點(diǎn)較高,低溫下容易凝結(jié),從而到導(dǎo)致精子的代謝不能進(jìn)常進(jìn)行而造成成可逆的冷休克死亡。因此,在低溫保存稀液需要添另防冷休克的物質(zhì),其中有卵磷脂的效果最好。因?yàn)槁蚜字娜邳c(diǎn)低,在低溫下不易凍結(jié),進(jìn)入精子的體內(nèi)后,可可以替代縮醛磷脂的防止冷休克的作用。 e、 抗凍物質(zhì) 具有抗冷凍危害的作用精液在冷凍保存的過(guò)去時(shí)程中,精子內(nèi)外環(huán)境的水分,必將經(jīng)力由液態(tài)到因態(tài)的轉(zhuǎn)化過(guò)程,從而導(dǎo)致精子遭受凍害而死亡,而抗凍物質(zhì)有肋于減輕或消除這種危害。一般常用的抗凍物質(zhì)有甘油,、二基砜(DMSO)trso\N三羥基基—2-氨基烷磺酸(TES)等 f、抗菌物質(zhì) 具用抗菌素作用,在人工授精過(guò)程中,即使努力改善環(huán)境衛(wèi)生條件和嚴(yán)格操作規(guī)程,雖然能減少細(xì)菌微生物對(duì)精液和稀液的污染,但很難做無(wú)菌,而精液和稀液都是營(yíng)養(yǎng)豐富的物質(zhì),是細(xì)菌微生物孳生的適宜環(huán)境, 這些細(xì)菌微生物的污染,不僅直接下來(lái)影響精子的生存,而且是引起母畜生殖道污染,不孕和早期胚胺的原因之一。因此,在稀液中有必要添加一定數(shù)量抗菌物質(zhì),常用有青霉素,鏈霉素,林可霉素,多粘霉素,慶大霉素,氯霉素 g、其它添加劑 (1) 酶類 如果氧氫化酶能分解精子代謝過(guò)程中的產(chǎn)生的有害物質(zhì)一過(guò)氧化氫,消除其危害,從而具有提高精子活力的作用:B-淀粉酶則有促進(jìn)精子獲能,提高受胎率的作用。 (2)維生素類 如維生素B1、B2、B12、C、E等,具有保護(hù)精子活率,提高受胎率的作用。 (3) 激素類 如催產(chǎn)素類,PG、等具有促進(jìn)母畜生殖道嚅動(dòng),有利于精子運(yùn)行從而提高受胎率的作用 h、 其它添加成分 如CO、已酸、植物汁液等可調(diào)節(jié)精液的PH值,有利于精液的常溫保存,EDTA具有保護(hù)精子抗冷休克的作用,又可通過(guò)改變細(xì)胞膜滲透力,降低果糖分解和精子的活力從而延長(zhǎng)精子壽命并護(hù)特受精能力,鑒于有氧環(huán)境的精子的有害作用在于脂類氧化形成有毒草物質(zhì),故在稀液中加入抗氧劑。 九、稀液的種類及其選擇依據(jù) 目前已有的各種家畜精液稀種類很多,正大試驗(yàn)尚未公開(kāi)的也很多,但根據(jù)其性質(zhì)和用大致可分為下列4類: (1) 現(xiàn)用稀液 適用于采精后立即稀輸精,以單純擴(kuò)大精液溶量,增加輸精耕細(xì)作母畜為目的,此類稀液常以簡(jiǎn)單而等滲的糖類和奶液為主休,如5%的葡萄糖,0。9%的nacl等。 (2) 常溫保存的稀液 適用于精液在常溫下作短期保存,具有以糖類和弱酸鹽為主休的ph偏低(弱酸性)的特點(diǎn)。 (3) 低溫保存稀液 適用于精液低溫保存,具有含卵黃或奶液為主體的抗休克 的特點(diǎn)。 適用于精液超低溫冷嘲熱諷凍保存,具有甘油、二基亞砜(DMSO)等為主體的抗凍特點(diǎn)。在實(shí)踐中究意選用何種配方稀液,一般應(yīng)根據(jù)以下幾點(diǎn)出合判斷;家率種類不同,稀液各不相同,精液的保存方法不同,稀液也不相同,應(yīng)選擇實(shí)際稀效果好,藥物來(lái)原廣,生產(chǎn)成本低,配制程序單簡(jiǎn)和貯藏使用方便的具有方綜合優(yōu)點(diǎn)的稀液配方。 (4) 精液的稀釋 精液采到后,盡快進(jìn)行稀,(一般不能超過(guò)期30分鐘),并應(yīng)減少與空氣和各種器皿的接觸,沒(méi)有經(jīng)過(guò)鏡檢的精液不能進(jìn)行稀,所以在采精前一定要作好各種準(zhǔn)備工作,但在稀過(guò)程中一定要注意以下事項(xiàng): 采精前做好采精及稀釋的各種準(zhǔn)備 各種設(shè)備,儀器、用具、及操作臺(tái)等都應(yīng)是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格消毒,干燥。 各種需要用的物品及器具應(yīng)都有要加溫。采精杯,采精袋,過(guò)濾紙?jiān)跍囟葹?7℃的干燥箱中預(yù)熱,稀液、溫度計(jì)、燒杯在水溫為37℃的水浴鍋中預(yù)熱。 精液采到后,盡快稀,根據(jù)外觀檢查及各種試實(shí)驗(yàn)窒檢查確定精液的稀倍數(shù),確保每份精液中有效精子的數(shù)量不少于30億。 將稀液于精液升到同一溫度,其中溫差不能超過(guò)1℃,過(guò)冷過(guò)熱都會(huì)造成精液品質(zhì)下降稀液將稀液液沿玻棒或溫度計(jì)緩慢引流到精液中(不能將精液倒入稀液中 )速度不能太快,避免給精子所在環(huán)境改變太大引起精子死亡,原精在鏡檢后,先將精液以1:1的比例稀,然后再重復(fù)檢查密度得活力,第一次稀完之的3—5分鐘再進(jìn)行后的稀釋;每稀完一次,都要緩慢的將精液的袋中的精液與稀釋液充分混勻。在稀釋過(guò)程中一定要注意精液溫度的下降速度,不能對(duì)精液造成低溫打擊。 十、精液的包裝 ①精液稀釋完成后,可以立即進(jìn)行包裝。包裝一般有兩種方法: 用包裝機(jī)包裝,在現(xiàn)代化的人工授精中,大多使用這種方法,值得注意是一定要注意精液在開(kāi)始包裝時(shí),吸液管中不能有其它污物和其他液休及吸液管的溫度不能大太低,可用加溫的稀釋液對(duì)吸液管進(jìn)行預(yù)熱。 手工包裝:用溫度計(jì)或玻棒緩慢的裝精液到入輸精瓶中。 包裝好后,要對(duì)精液粘好標(biāo)簽,以便區(qū)分精液的號(hào)碼,也可以用不同顏色輸精瓶分開(kāi) ②精液的保存 保存前處理,稀釋后精液從33—35℃緩慢降到17℃(約2個(gè)小時(shí))或用幾層毛巾包被值接放置17℃的冰箱中,保存溫度一般為16—18℃,常用17℃保存過(guò)程中要求每12小時(shí)將精液混勻一次,防止精液沉淀而引起死亡,保存時(shí)間是根據(jù)稀釋液的組成不同而定,常用稀釋液的精液一般保存不超過(guò)3天,17℃冰箱可用普通冰箱改造而成,室溫低于17℃時(shí)可用燈泡加熱來(lái)維持溫度,要求小風(fēng)扇使箱內(nèi)溫度均勻。 ③精液的運(yùn)輸 對(duì)于遠(yuǎn)距離購(gòu)精液的豬場(chǎng),運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程是一個(gè)關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。保溫或防暑條件是做得好的,運(yùn)到幾千里之外,精子活力等還較強(qiáng),使用效果還是很好,母豬受胎率和產(chǎn)子數(shù)也很高: 做得不好的,就是同場(chǎng)內(nèi)不同時(shí)間、地點(diǎn)使用,死精率也很高,使用效果很差。高溫的復(fù)天,一定要在雙層泡沫箱中放入冰塊,(17℃怛溫)再放精進(jìn)行運(yùn)輸,以防止天氣過(guò)熱,死精太多,嚴(yán)寒的季節(jié),要用保溫用的怛溫乳膠或棉花等在保溫箱內(nèi)保溫。在精液的運(yùn)輸過(guò)程中,還要注意地方是一定要注意精液的防震。 十一、輸精 輸精是人工授精最后一關(guān),也是最關(guān)鍵的一關(guān),輸精效果的好壞,關(guān)系到母豬的情期受胎率和產(chǎn)子數(shù)的高低,而輸精管插入母豬的生殖道部位的正確與否,又是輸精的關(guān)鍵。 1、發(fā)情母豬的鑒定 發(fā)情周期,青年母豬初情期后未配種則會(huì)表現(xiàn)出特有的情周期活動(dòng),這種特有的情周期活稱為發(fā)情周期。 一般把第一次排卵至下一個(gè)排卵間隔時(shí)間稱為一個(gè)發(fā)情周期。母豬的一個(gè)正常發(fā)情周期限為20—22天。 發(fā)情行為鑒定: 母豬發(fā)情行為主要是由于雌激素與小量孕酮共同作用大腦中樞系統(tǒng)與下腦,從而引起性中樞興奮的結(jié)果,母豬在發(fā)情初期,可能吸引公豬,并對(duì)公豬產(chǎn)生興趣,但拒絕與公豬配種,陰門(mén)腫脹外,變?yōu)榉踷z紅色,并排出少量云霧狀的粘液,隨著發(fā)情特續(xù)母豬主動(dòng)尋找公豬,表現(xiàn)興奮,對(duì)外界刺激繁感。 在發(fā)情盛期時(shí),除陰道門(mén)腫脹外,背部僵硬,并發(fā)出特征性的鳴叫。在沒(méi)有公豬時(shí),也會(huì)接受其它母豬的爬跨:有公豬時(shí)立刻站立不動(dòng),兩耳豎立,若有所思呆立,若有人用手按壓母豬的背腰部時(shí),母豬站立不地動(dòng),這種發(fā)情時(shí)對(duì)壓背產(chǎn)生的特證的反應(yīng)為靜立反射,這是準(zhǔn)確確定母豬發(fā)情的一種方法。 2、輸精步驟: 母豬外陰部清洗消毒:先用清潔水將母豬陰戶清洗干凈,然后用消過(guò)毒的0.7%的鹽水進(jìn)行沖洗。 ①配種人員及輸精管的消毒:配種人員在進(jìn)行人工授精前,應(yīng)剪去指四通八達(dá)甲,雙手先用清水洗凈再用鹽水沖洗。 輸精管應(yīng)為一次性,對(duì)精子無(wú)害的輸精管或用經(jīng)高溫消毒的多次輸精管。 ②精管的使用方法。 打開(kāi)母豬陰戶,輕緩的將輸精管向上旋進(jìn)母豬子宮頸,注意不要插進(jìn)尿道而進(jìn)膀胱。 在輸精管插入時(shí)時(shí),輕輕捻轉(zhuǎn)輸精管和用手按壓母豬的背部,使母豬有舒適的快感。 當(dāng)輸精管插不進(jìn)時(shí),輸精管后退1cm即可輸精。 輸精人員在輸精時(shí)用手按摩母豬陰部及乳房或者騎在母豬背上刺激母豬子宮收縮,防止輸精倒流。 ③ 輸精時(shí)握精液的手一定要暖和,干燥,不能給精子造成溫度打擊而死亡,影響受精能力。 ④輸精速度應(yīng)緩慢,時(shí)間最好掌握在3—5分鐘,輸完精后,輸精管應(yīng)還在陰道內(nèi)停留幾分鐘,以防精液倒流。 可進(jìn)行授精前藥物處理,在母豬站立反應(yīng)后,立即注射HCG500—1000TU或LHRH20微克,注射后44—8小時(shí)第一次輸精。 在輸精過(guò)程中,配種的所有員工不能抽煙及貼有膏藥產(chǎn)生刺激氣味。 十二、人工授精的資料記錄。 統(tǒng)計(jì),分折作好各批精液檢查記錄檢查結(jié)果。 用好每頭母豬輸精記錄,包抱括豬年齡胎次,體況,發(fā)育情況,上胎產(chǎn)子情況,輸精異常情況和等。 人工授精的評(píng)分 母豬靜立反射的情況: 1分 總是不停的移動(dòng) 2分 只有一點(diǎn)或稍有移動(dòng) 3分 靜立反射情況很好,一點(diǎn)也不移動(dòng) 子宮頸鎖住輸精管程度的評(píng)分 1分 沒(méi)有被鎖住的感覺(jué) 2分 松散的 輕微的鎖住 3分 鎖得很緊 精液倒流的情況 1分 倒流很多 2分 只有一點(diǎn)倒流 3分 沒(méi)有倒流 十三、提高繁殖力的措施 1、選擇繁殖力高公母豬做種畜 同一品種繁殖力存在差異,對(duì)公豬來(lái)說(shuō),射精量,精液品質(zhì)。配種能力及受胎率有差異。選擇公豬時(shí),應(yīng)參考祖先生產(chǎn)能力,然后對(duì)期本身有關(guān)繁殖性能方面做全面的檢查。如睪丸外形,硬度,周徑,彈性,副性器官的形態(tài),大小,陰莖勃起時(shí)能伸出包皮:性反射時(shí)間,性行為序列,射精量,密度,活力等。 2、 科學(xué)的飼養(yǎng)管理 加強(qiáng)種畜的飼養(yǎng)管理是保證正常繁殖力的物質(zhì)基礎(chǔ),任何選進(jìn)的繁殖技術(shù)都不能代替良好的飼養(yǎng)管理。 3、保證公豬優(yōu)良的精液品質(zhì) (1)飼養(yǎng)好公豬,使期保持好良好的繁殖性能,對(duì)人工接授用的精液,要嚴(yán)格進(jìn)行質(zhì)量檢查,質(zhì)量關(guān)或不合格的精液禁止使用配種。 做好發(fā)性和鑒定適時(shí)配種 (2)發(fā)情鑒定是掌握適時(shí)配種的前提,是提高繁殖力的重要環(huán)節(jié),通過(guò)發(fā)情鑒定,使母豬能在最佳時(shí)期輸精,是人工授精成功的關(guān)鍵。 4、減少胚胎死亡和防止流產(chǎn) 胚胎死亡是影響產(chǎn)仔數(shù)和繁殖力的一個(gè)很重要因素。母豬在胚胎著床期,受精卵處于游離狀態(tài),此時(shí)期最易發(fā)生胚胎的死亡和流產(chǎn),因此這一時(shí)期母豬的護(hù)理致關(guān)重要。 5、做好繁殖組織和管理工作 提高家畜繁殖力是技術(shù)工作和組織管理工作相互配合的綜合技術(shù),不單純是技術(shù)問(wèn)題,所以,必須有嚴(yán)格的組織措施相配合。 6、建立一支有事業(yè)心的技術(shù)隊(duì)伍,定期培訓(xùn),及時(shí)經(jīng)驗(yàn)交流 7、做好各種繁殖記錄 十四、理代規(guī)?;i場(chǎng)人工授精的發(fā)展方向 在保證人工授精的效果同時(shí),減少輸入母豬的精子數(shù)量,降低輸精次數(shù),飼養(yǎng)超級(jí)公、母豬、增加檢情力度,適時(shí)配種,節(jié)約成本是理代人工授精的發(fā)展方向。 A、減少輸精的精子數(shù)有利于提高人工授精的繁殖成績(jī)。 輸精劑量與其有效精子數(shù)與配種效果的影響 從上表可以看出,在人工授精實(shí)際工作中,并不是我們想象那樣輸入母豬體內(nèi)的精液成績(jī)就越好,相反的100m1中含有25億有精子的分娩率及產(chǎn)仔數(shù)都優(yōu)于其它輸精方法。可見(jiàn)減少輸入精子的數(shù)量對(duì)人工授精的成績(jī)不是減退,而是有所提高。 同時(shí),減少輸精次數(shù),適時(shí)配種有利于提高人工授精的生產(chǎn)成績(jī)。 某豬場(chǎng)3年內(nèi)人工授精的基本情況分析表 由上表可以看出,本交、全部人工授精及減少配種次數(shù),對(duì)人工授精的成績(jī)(活健壯仔、分娩率)都有提高。隨著人工授精水平的不斷提高,可以逐漸減少到一次輸精,而繁殖成績(jī)維持在比較高的成績(jī)。使用混精對(duì)母豬的輸精,有利于提高人工授精的成績(jī)。 由上表可以看出,混精優(yōu)于單精. B、科學(xué)的使用保存的精液。 使用保存的精液輸入效果分折表 科學(xué)的使用保存過(guò)的精液,對(duì)人工授精的成績(jī)沒(méi)有影響。但隨著保存捍間不斷增加,精液的品質(zhì)不斷不降,會(huì)對(duì)繁殖的成績(jī)?cè)斐梢欢ǖ挠绊憽K?,在人工授精的開(kāi)展中,一定要科學(xué)使用保存的精液。 在現(xiàn)代規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)中,人工授精代表選進(jìn)的繁殖技術(shù),有著自然交配不可比擬的優(yōu)越性。廣泛的科學(xué)的開(kāi)展應(yīng)用人工授精適時(shí)的對(duì)母豬輸精配種及作好其他相關(guān)性工作,可以使豬場(chǎng)母豬繁殖成績(jī)超越本交,達(dá)到優(yōu)良水平,以上是筆者近幾年開(kāi)展規(guī)?;i場(chǎng)人工授精的工作的一些體會(huì),存在很多不足之處,希望廣達(dá)人工授精的朋友能夠多多批評(píng)指正。 猜你喜歡 |
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