第四章 單克隆抗體與基因工程抗體的制備

（答案及解析見文末）

一、A1

1、陽性雜交瘤細(xì)胞常用的保存方法是（）。

A、4℃冰箱保存

B、37℃保存

C、-20℃保存

D、-30℃保存

E、液氮（-196℃）保存

2、培養(yǎng)骨髓細(xì)胞時(shí)為避免返祖，定期用于處理細(xì)胞的是（）。

A、PEG

B、TK

C、8-AG

D、HAT

E、ConA

3、制備單克隆抗體時(shí)為獲得經(jīng)過抗原免疫的B細(xì)胞通常采用（）。

A、B細(xì)胞體外培養(yǎng)

B、小鼠腹腔內(nèi)接種抗原

C、大白鼠體內(nèi)接種抗原

D、小鼠肌肉內(nèi)接種抗原

E、小鼠皮下注射B細(xì)胞

4、能在HAT培養(yǎng)基生長繁殖的細(xì)胞是（）。

A、小鼠脾細(xì)胞

B、小鼠骨髓瘤細(xì)胞

C、飼養(yǎng)細(xì)胞

D、雜交瘤細(xì)胞

E、以上都可以

5、免疫治療中，同時(shí)具有特異性結(jié)合Tc和腫瘤細(xì)胞的抗體是（）。

A、單鏈抗體

B、人源化抗體

C、雙價(jià)抗體

D、嵌和抗體

E、雙特異性抗體

6、單克隆抗體制備過程中用于阻斷瘤細(xì)胞通過正常途徑合成DNA的化合物是（）。

A、次黃嘌呤

B、胸腺嘧啶核苷

C、葉酸

D、聚乙二醇

E、甲氨蝶呤

7、人源化抗體是（）。

A、由鼠抗體的Fc與人抗體的Fab組成

B、由鼠體內(nèi)編碼人抗體的基因指導(dǎo)合成的抗體

C、由2個(gè)相串聯(lián)的人抗體Fab段連接而成

D、用鼠抗體CDR嵌如人抗體可變區(qū)而成

E、完全的人體合成抗體

8、制備單克隆抗體常選用小鼠的哪類細(xì)胞作為飼養(yǎng)細(xì)胞（）。

A、中性粒細(xì)胞

B、K細(xì)胞

C、肥大細(xì)胞

D、成纖維細(xì)胞

E、腹腔細(xì)胞

9、單克隆抗體的應(yīng)用不包括（）。

A、腫瘤的診斷

B、腫瘤的定位

C、血清Cl-含量測(cè)定

D、激素水平檢測(cè)

E、抗原物質(zhì)的提取及純化

10、單克隆抗體制備時(shí)作為細(xì)胞融合劑的是（）。

A、HAT

B、PEG

C、TK

D、DNA

E、ConA

答案部分

一、A1

1、

【正確答案】 E

【答案解析】克隆化培養(yǎng)后的陽性雜交瘤細(xì)胞應(yīng)及時(shí)凍存，最好保存在-196℃液氮中。

2、

【正確答案】 C

【答案解析】細(xì)胞在傳代過程中，部分細(xì)胞可能有返祖現(xiàn)象，應(yīng)定期用8-氮鳥嘌呤（8-AG）進(jìn)行處理，使生存的細(xì)胞對(duì)HAT呈均一的敏感性。

3、

【正確答案】 B

【答案解析】制備單克隆抗體時(shí)，可采用動(dòng)物體內(nèi)誘生方法：先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑，一周后將雜交瘤細(xì)胞懸液注射腹腔，1～2周后，無菌抽取腹水，離心取上清液即可。

4、

【正確答案】 D

【答案解析】細(xì)胞融合的選擇培養(yǎng)基中有三種關(guān)鍵成分：次黃嘌呤（H）、甲氨蝶呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T），所以取三者的字頭稱為HAT培養(yǎng)基。只有融合細(xì)胞具有親代雙方遺傳性能，才能在HAT培養(yǎng)基上長期存活與繁殖，如雜交瘤細(xì)胞。

5、

【正確答案】 E

【答案解析】雙特異性不同的兩個(gè)小分子抗體連接在一起可得到雙特異性抗體。雙特異性抗體能同時(shí)結(jié)合兩種抗原，因而可介導(dǎo)標(biāo)記物與靶抗原結(jié)合或某些效應(yīng)因子定位于靶細(xì)胞，在免疫學(xué)檢測(cè)中可簡(jiǎn)化操作步驟，提高檢驗(yàn)質(zhì)量；應(yīng)用雙特異性抗體介導(dǎo)的藥物殺傷效應(yīng)可用于腫瘤等的治療。

6、

【正確答案】 E

【答案解析】甲氨蝶呤（A）是葉酸的拮抗藥，可阻斷瘤細(xì)胞利用正常途徑合成DNA。

7、

【正確答案】 D

【答案解析】人源化抗體主要指鼠源單克隆抗體以基因克隆及DNA重組技術(shù)改造，重新表達(dá)的抗體，其大部分氨基酸序列為人源序列取代，基本保留親本鼠單克隆抗體的親和力和特異性，又降低了其異源性，有利于人體。

8、

【正確答案】 E

【答案解析】制備單克隆抗體常選用小鼠的腹腔細(xì)胞作為飼養(yǎng)細(xì)胞。先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑，一周后將雜交瘤細(xì)胞懸液注射腹腔，1～2周后，無菌抽取腹水，離心取上清液即可。

9、

【正確答案】 C

【答案解析】單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中用于：①作為診斷試劑，用于診斷各類病原體，目前這是McAb應(yīng)用最多的領(lǐng)域之一；②腫瘤特異性抗原和相關(guān)抗原的檢測(cè)。用于腫瘤的診斷、分型及定位；③檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物，用于區(qū)分細(xì)胞亞群和細(xì)胞分化階段；④抗原微量成分的檢測(cè)及對(duì)酶類、激素、維生素、藥物等的檢測(cè)；⑤在防治工作中如惡性腫瘤的治療，“生物導(dǎo)彈”的研制等都有廣泛前景；⑥研究工作中用作“探針”，確定大分子生物物質(zhì)在細(xì)胞中的分布及位置；⑦用于抗原物質(zhì)的提取及純化。

10、

【正確答案】 B

【答案解析】單克隆抗體制備時(shí)最佳的融合效果應(yīng)是最低程度的細(xì)胞損傷而又產(chǎn)生最高頻率的融合。聚乙二醇（PEG1000～2000）是目前最常用的細(xì)胞融合劑，一般應(yīng)用濃度為40%（W/V）。

來源：中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng)