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首先,我們必須認(rèn)識(shí)到,血栓與止血試驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤的發(fā)生大多來自分析前,因此保證止凝血試驗(yàn)標(biāo)本的質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的是非常重要的。凝血檢測(cè)項(xiàng)目的標(biāo)本準(zhǔn)備三、標(biāo)本運(yùn)輸及儲(chǔ)存
1、年齡:以年齡不同所確定的參考范圍解釋新生兒和嬰兒的止凝血試驗(yàn)結(jié)果非常重要,有很多學(xué)者報(bào)道了年齡與性別對(duì)血小板功能和凝血活性的影響。2、身體狀態(tài),疾病、月經(jīng)期、妊娠期、貧血和紅細(xì)胞增多癥等。3、藥物:國(guó)外學(xué)者曾研究了門診病人服用藥物對(duì)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響。用一種藥時(shí),受藥物干擾的實(shí)驗(yàn)占有的百分比為7 %;服用兩種藥時(shí),百分比為16.17 %;服用三種或四種藥時(shí),百分比為66.17 %;當(dāng)病人服用5 種藥時(shí),受干擾的實(shí)驗(yàn)所占的百分比為100 %。當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果與臨床狀態(tài)不符且患者無其它并發(fā)癥,實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控合格時(shí), 可考慮一下藥物的影響。各檢驗(yàn)結(jié)果間的相關(guān)性上鑒別,如FIB與PT、APTT和TT之間,F(xiàn)DP與D-二聚體之間存在有一定的相關(guān)性,當(dāng)這種相關(guān)性出現(xiàn)異常時(shí),可考 慮一下藥物干擾。
4、生活習(xí)慣:吸煙可使血漿纖維蛋白原、vWF和其他凝血因子水平增加,并可使凝血酶生成及血小板激活增加; 要戒煙呀!5、季節(jié)變化:清晨血小板最易激活,心肌梗死的發(fā)病率最高;寒冷季節(jié),血凝活性增加,使心肌梗死和猝死的發(fā)病率增加。6、ABO血型:O型血患者較其他血型患者血漿vWF和因子Ⅷ活性低。
1、患者在采血前應(yīng)處于靜息狀態(tài)或抽血前有15-30分鐘的休息。 劇烈活動(dòng)可激活血小板和凝血系統(tǒng)。2、采血技術(shù)或采血過程的影響。采血應(yīng)做到一針見血。當(dāng)壓脈帶時(shí)間超過一分鐘,一方面引起血細(xì)胞和血凝蛋白濃度增高;另一方面可引起血凝系統(tǒng)因子Ⅷ和組織纖溶酶源激活劑(t-PA)釋放和活化。采集完畢后立即與抗凝劑混勻,同時(shí)要避免用力振搖。3、采血的部位:標(biāo)本采集嚴(yán)禁在輸液管中采血,特別是輸入肝素時(shí)或附近進(jìn)行。4、血凝管影響 血凝管的使用要標(biāo)準(zhǔn)化即使用硅化玻璃管,可避免內(nèi)源性接觸途徑的激活。普通玻璃管影響最大的是Ⅷ因子的活性,可使其明顯降低。 醫(yī)院一定要選用質(zhì)量合格的血凝管產(chǎn)品。5、抗凝劑濃度的影響。美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)的血凝實(shí)驗(yàn)指南H21-A3推薦血凝試驗(yàn)的抗凝劑為枸櫞酸鈉,配制濃度為3.13%(0.105mol/L)或3.2%(0.109mol/L),它能有效地阻止因子Ⅴ和Ⅷ的活化。如果患者的Hct大于55%或低于20%應(yīng)使用下述公式校正枸櫞酸鈉的用量:抗凝劑量(ml)=0.00185×血量(ml) ×(100-患者紅細(xì)胞比容)。實(shí)驗(yàn)表明:肝素、膽紅素、甘油三酯對(duì)試驗(yàn)均有干擾,當(dāng)血紅蛋白> 150mg/ L ,肝素> 1 mg/ L ,總膽紅素> 19.6mg/ dL ,甘油三酯> 1022mg/ dL時(shí)尤為顯著.
1)、標(biāo)本需要在室溫下運(yùn)送,因低溫會(huì)損傷血小板,活化因子Ⅶ和因子Ⅺ,使PT,APTT結(jié)果縮短。2)、新采集的標(biāo)本,最好在2h內(nèi)將血漿分離出來。
3)、當(dāng)前不能做的標(biāo)本,冷凍在-20℃的冰箱內(nèi)。 4)、需要存放較長(zhǎng)時(shí)間的標(biāo)本冰凍存于-80℃的冰箱內(nèi)。5)、冰凍的血漿融化時(shí)不能靜置于室溫中逐漸融化,這樣會(huì)有纖維蛋白遇冷沉淀蛋白析出,應(yīng)放在37℃水浴中輕輕搖動(dòng),使其迅速溶化。
凝血因子中,以因子Ⅴ和Ⅷ在離體后會(huì)隨時(shí)間的延長(zhǎng)而變性失活,這種失活可隨溫度的升高而加速。從而導(dǎo)致標(biāo)本因從采集到分析時(shí)間延長(zhǎng)而使PT和APTT時(shí)間延長(zhǎng)。標(biāo)本存放的溫度和時(shí)間的不同,可影響凝血因子活性。有文獻(xiàn)記載,32℃保存血漿6h、12h、24h,Ⅷ因子活性可分別消失50%、60%、95%。即使保存在4℃也分別消失5%、55%、70%。APTT在存放后檢測(cè)結(jié)果與即時(shí)測(cè)定結(jié)果相比均有延長(zhǎng)趨勢(shì)。有文獻(xiàn)報(bào)道Ⅴ因子活性在32℃,在6h、12h、24h分別消失25%、40%、80%,而在4℃則僅損失0%、5%、10%。血液離體即開始變化,隨存放方式和時(shí)間不同,凝血因子逐漸消耗或激活,特別是V、Ⅷ、Ⅸ因子消耗和Ⅶ 因子的激活較為明顯.
標(biāo)本常見錯(cuò)誤對(duì)凝血結(jié)果的影響
(1)穿刺不熟練,多次穿刺造成組織因子釋放,觸發(fā)外源凝血途徑活化;(2)不適當(dāng)?shù)睦鋬龊腿诮庋獫{,造成因子Ⅶ的冷激活;2、引起凝固時(shí)間延長(zhǎng)的錯(cuò)誤:(2)不適當(dāng)?shù)睦鋬龊腿诮庋獫{造成凝血因子的降解;3、引起APTT時(shí)間延長(zhǎng)的錯(cuò)誤:(2)標(biāo)本管未蓋塞子而導(dǎo)致CO2丟失,因而血漿pH發(fā)生改變,pH 的變化引起因子Ⅴ的變化。4、引起APTT時(shí)間縮短的錯(cuò)誤:(1)用玻璃管儲(chǔ)存血漿引起因子Ⅻ的激活;(2)標(biāo)本針和試劑針位置偏移,位置偏移造成的樣本與試劑的量不準(zhǔn)確。
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