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HIV疫苗進(jìn)展講座

 水共山華 2014-11-19
200 多年前,英國(guó)醫(yī)生 Edward Tenner 從牛痘中制備活疫苗用于防治天花獲得成功。受此啟發(fā),自 1983 年首次發(fā)現(xiàn) HIV 并于 1987 年研制出第一個(gè)愛滋病侯選疫苗,嘗試了所有已知疫苗的構(gòu)建方法,并進(jìn)行了無(wú)數(shù)次體內(nèi)和體外試驗(yàn),試圖尋找有效的愛滋病疫苗。

一、
  研制 AIDS 疫苗的困難所在

縱觀愛滋病疫苗的研究歷史,可以總結(jié)出疫苗研制中存在如下困難:1、 HIV-1 HIV-2 兩種病毒。二者的外殼蛋白無(wú)免疫交叉反應(yīng),前者有不同的亞型,主要是非洲 AIDS 的病原,HIV-2 主要是北美及其他地區(qū)的病原,不同地區(qū)需要不同的疫苗;2、個(gè)體在感染 HIV 后,該病毒在人體內(nèi)不斷發(fā)生基因變異;3、HIV 是經(jīng)生殖道及血液傳播,因而有效的疫苗應(yīng)同時(shí)誘導(dǎo)黏膜免疫及系統(tǒng)免疫;4、HIV 既是 cell—free 病毒又是 cell-associated 病毒,有效的疫苗既能誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生又能誘導(dǎo)細(xì)胞介導(dǎo)性免疫反應(yīng)。

二、
  AIDS 病疫苗的研制現(xiàn)狀

1、
活載體疫苗

不僅可引起細(xì)胞免疫(
CD+CTL),還可模擬 HIV 的天然構(gòu)象,且具有良好的安全性而倍受重視。其中以金絲雀痘疫苗(canary——pox virus)作為載體的侯選疫苗更受青睞。近年對(duì)重組金絲雀痘的構(gòu)思進(jìn)行了廣泛的人體試驗(yàn)。這些研究顯示重組金絲雀痘具有免疫原性及安全性,能誘導(dǎo) 70%的接種者產(chǎn)生抗體,30%的接種者產(chǎn)生可檢測(cè)到的 CTL 應(yīng)答。美國(guó) AIDS 疫苗評(píng)價(jià)小組 022 科學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告小組對(duì)金絲雀痘病毒 -env-gag-pro 聯(lián)合重組 rgp120 亞單位的免疫原性進(jìn)行研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn) 42 名接受金絲雀痘病毒 -env-gag-pro 重組疫苗的受試者,有 26 名產(chǎn)生了 CD8+ 細(xì)胞免疫,而在 17 名只接受金絲雀痘病毒或 rgp120 疫苗的受試者只有 3 名產(chǎn)生了上述應(yīng)答。rgp120 的免疫接種者并沒有增強(qiáng) CD8CTL 對(duì) HIV-1 包膜蛋白的應(yīng)答,但卻極大增強(qiáng)了對(duì) HIV-MN 株所產(chǎn)生的中和抗體的效價(jià)及應(yīng)答頻率。金絲雀痘病毒 -env-gag-pro 與 rgp120 的重組疫苗使 91%的受試者產(chǎn)生中和抗體,62%受試者產(chǎn)生了 CD8+T 細(xì)胞的免疫應(yīng)答。另外,可作載體的痘類病毒還有牛痘病毒、腺病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、流感病毒、a-病毒(semtiki 森林病毒和委內(nèi)瑞拉貓腦炎病毒)可做載體的菌類則有分枝桿菌、沙門菌、志賀菌、李斯特菌。痘類病毒最早應(yīng)用的是對(duì)消滅天花作出主要貢獻(xiàn)的牛痘病毒。有研究顯示,重組牛痘病毒在非人類靈長(zhǎng)目動(dòng)物中可誘發(fā)針對(duì) HIV 及 SIV 強(qiáng)烈的 CTL 應(yīng)答。牛痘病毒可在免疫抑制人群中播散,有時(shí)導(dǎo)致致命性的腦炎。修飾的牛痘病毒安卡拉株的安全性大為提高,可誘發(fā)較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。現(xiàn)今,最有前景的活載體疫苗則是基因缺失性腺病毒,可用做基因治療的載體。血清5型腺病毒不論是在小鼠和非人類靈長(zhǎng)目中都顯示了強(qiáng)有力的免疫原性。

2、誘導(dǎo)黏膜和全身免疫的疫苗的研究進(jìn)展

因 HIV 是經(jīng)生殖道和血液傳播,如何阻斷這兩條途徑成為理想疫苗應(yīng)具有的條件。直腸和子宮腔的黏膜上皮,可能是感染的最早部位,這些組織或者宮頸或尿道中的淋巴細(xì)胞或巨噬細(xì)胞都有可能被感染細(xì)胞或游離病毒首先感染。Belgakov 等用合成的多決定簇的 HIV 的 HIV 多肽并以霍亂毒素作為佐劑行直腸內(nèi)免疫,發(fā)現(xiàn)在腸道黏膜局部和全身均引起長(zhǎng)時(shí)間 CTL 記憶,而全身性免疫時(shí)僅在脾生產(chǎn)了特異性 CTL。因此認(rèn)為用合成型的 HIV 多肽疫苗進(jìn)行腸道內(nèi)局部免疫可保護(hù)小鼠免受能表達(dá) HIV-1ⅢBgp160 的重組牛痘病毒的感染。

3、免疫增強(qiáng)和高效接種

一些輔助刺激因子與免疫刺激序列,細(xì)胞因子如粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF),IFN-
y,IL-2,IL-4 等和趨化因子如倍它趨化因子、脂質(zhì)體、佐劑等對(duì)于免疫增強(qiáng)和高效接種的作用進(jìn)行了很多實(shí)驗(yàn)性的研究,開拓了 HIV 疫苗的研究領(lǐng)域。

4、DNA 疫苗及包膜亞單位疫苗

基因槍與電穿孔接種的發(fā)展無(wú)疑為以后實(shí)現(xiàn) DNA 疫苗的無(wú)針免疫提供了新的發(fā)展道路。采用基因槍接種 DNA 疫苗(編碼 HIVgp120 或 SIVgp120)誘導(dǎo)的 gp120 特異性抗體終點(diǎn)滴度可提高 10 倍。最近發(fā)展的接種后電穿孔刺激,可以顯著減少接種次數(shù),降低接種量(低至 1 微克),并使質(zhì)粒 DNA 的攝取和表達(dá)水平提高 100 倍以上。Bay-ballk 等研究顯示,對(duì) CD4+ 細(xì)胞功能受限的 AIDS 患者進(jìn)行免疫,電穿孔是極為有用的方法。另外,還有包膜亞單位疫苗。Pitisuttithum P 將 gp120Thaie 與 SF2 制成重組疫苗,結(jié)果發(fā)現(xiàn) 84%和 82%受試者對(duì)上述兩種抗原產(chǎn)生了中和性抗體。值得一提的是,這種亞單位聯(lián)合疫苗已被證明無(wú)效。如 2003 年 VAXGEN 公司在泰國(guó)進(jìn)行的人體實(shí)驗(yàn)。

三、評(píng)價(jià)與展望

人們總是習(xí)慣認(rèn)為阻止病毒感染人體的疫苗才市有效的疫苗,任何不符合此要求的疫苗都是不完善的。阻止 HIV 感染,抗原必須能誘導(dǎo)針對(duì) HIV 多樣性的抗體?,F(xiàn)今我們還不能誘導(dǎo)這樣的免疫反應(yīng)。用一些新免疫原如質(zhì)粒 DNA、重組基因缺陷型腺病毒、細(xì)胞因子擴(kuò)增型 DNA、重組 MVA 等對(duì)猴進(jìn)行免疫接種,發(fā)現(xiàn)他們對(duì)高度致病性 AIDS 病毒的控制能力得到增強(qiáng)。這些疫苗沒有誘導(dǎo)出中和抗體,卻誘導(dǎo)出病毒特異性 CTL 應(yīng)答,并使接種此類疫苗的動(dòng)物病毒復(fù)制得到部分控制,而高水平病毒復(fù)制會(huì)加速疾病的進(jìn)展。接踵此類疫苗后感染 HIV,其病程進(jìn)展會(huì)有所減慢,并在他們的分泌物中,復(fù)制性病毒也會(huì)減少,因?yàn)楦腥菊邆魅窘o未感染者的可能性與感染者血中或分泌物中的病毒含量有關(guān)。因而 CTL 誘導(dǎo)性免疫會(huì)減慢 HIV 在人群中的傳播,尤其對(duì)那些缺乏醫(yī)療設(shè)施、HIV 感染者無(wú)法得到抗病毒藥物的地區(qū)來(lái)說(shuō)意義重大。
雖然在短時(shí)間內(nèi)不能獲得能阻止 HIV 感染的疫苗,但有一點(diǎn)應(yīng)該確信,研究出減緩病情進(jìn)展的疫苗仍是有可能的。

河南省上蔡縣中醫(yī)院在 2000 6 月~2003 7 月間,對(duì) 60 例艾滋病(AIDS)患者使用虛實(shí)并治且以補(bǔ)虛為主的中醫(yī)療法進(jìn)行治療,取得總有效率 86.7% 的滿意效果。

艾滋?。?/span>AIDS)是艾滋病毒(HIV)感染引起的后天免疫缺陷綜合征,其潛伏期由數(shù)月至半年,最長(zhǎng)可達(dá) 10 年之久。由于上蔡縣是 HIV/AIDS 的高發(fā)區(qū),病源較多,故對(duì) HIV/AIDS 救治工作開展較早。

研究人員將
60 例診斷為 AIDS 及艾滋病相關(guān)綜合征(ARC)的患者分肺胃陰虛型(18 例)、脾胃虛損型(26 例)、脾腎兩虧型(9 例)、熱盛痰蒙型(7 例)4 個(gè)證型進(jìn)行中醫(yī)藥治療。其中,肺胃陰虛型以參苓白術(shù)散、百合固金湯加減合生脈飲,或六味地黃丸治療。脾胃虛損型以補(bǔ)中益氣湯、小柴胡湯、溫膽湯加減,并配服香砂六君子丸。脾腎兩虧型以四君子湯合四神丸加減,或同時(shí)服用金匱腎氣丸或十全大補(bǔ)丸等。熱盛痰蒙型以安宮牛黃丸、鉤藤飲加減。每日 1 劑,日兩次。

結(jié)果表明,受治艾滋病患者中有
52 例全身癥狀或?qū)嶒?yàn)室檢查(包括病毒載量、CD4T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)),較治療前有很大改善,總有效率為 86.7%。說(shuō)明中醫(yī)藥治療 AIDS ARC,確實(shí)能改善癥狀、體征,提高機(jī)體免疫功能,減少機(jī)會(huì)性感染,明顯提高患者的生存質(zhì)量,延長(zhǎng)生命期,且療效顯著,無(wú)明顯毒副作用。

研究人員認(rèn)為,中醫(yī)藥治療
AIDS 的關(guān)鍵是必須遵循虛實(shí)并治以補(bǔ)虛為主的原則,即《內(nèi)經(jīng)》虛者補(bǔ)之,損者益之的原則,不同病期攻補(bǔ)偏重不同。早期患者辨證屬毒熱較盛,肺胃氣陰兩虛,可給予清熱解毒之品如金銀花、連翹、黃芩、田基黃、蒲公英等,但同時(shí)還要養(yǎng)陰潤(rùn)燥益氣,佐以祛邪而不傷正的藥物,如生地黃、沙參、麥冬、天花粉、太子參等。中期患者肺脾氣虛,應(yīng)以補(bǔ)益脾氣藥為主,如黃芪、黨參、山藥、枸杞子、甘草,適當(dāng)加入淡滲利濕之品,如茯苓、白術(shù)、薏苡仁、澤瀉、車前子等。中晚期 AIDS 患者應(yīng)補(bǔ)脾腎,溫陽(yáng)益陰,如菟絲子、五味子、山茱萸、熟地黃、杜仲等藥,宜補(bǔ)而不宜瀉。艾滋病患者虛證雖可表現(xiàn)在氣血陰陽(yáng)的不足,但其中氣虛,陰津虧損更為突出,雖有熱證卻多呈虛熱征象。機(jī)會(huì)性感染早期也可見邪熱毒邪入侵,但切不可寒涼過(guò)甚。補(bǔ)虛扶正可提高機(jī)體抗病能力,調(diào)整免疫功能,應(yīng)貫穿于治療的全過(guò)程。

AIDS 的治療應(yīng)著重于早、中期患者,即有輕度癥狀或有血象改變的早期患者,或中期 ARC 者,這樣才有可能達(dá)到控制疾病發(fā)展的目的。對(duì)晚期 AIDS 患者出現(xiàn)感染時(shí),因其自身免疫系統(tǒng)功能已趨衰竭,即使使用扶正補(bǔ)劑,也往往是虛不受補(bǔ),患者常很快死亡。再者,晚期患者隨病情加重而血瘀證加重,正如中醫(yī)所說(shuō)久病人絡(luò)之表現(xiàn),治療中適當(dāng)加入丹參、牡丹皮、當(dāng)歸、川芎、赤芍、姜黃等活血化瘀之品對(duì)改善癥狀,緩解疼痛十分有效。

研究人員指出,用中藥治療
AIDS 尚未發(fā)現(xiàn)明顯的毒副作用,且確實(shí)能改善癥狀、體征,提高機(jī)體免疫功能,減少機(jī)會(huì)性感染,提高生存質(zhì)量,延長(zhǎng)生命期。所以,臨床上要堅(jiān)持使用中醫(yī)藥治療 AIDS,且應(yīng)深入研究,多方探討,總結(jié)規(guī)律。

附相關(guān)報(bào)道:

臺(tái)灣治療艾滋病中藥進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段


臺(tái)灣一家生物科技公司利用中草藥開發(fā)的治療艾滋病藥物,日前獲臺(tái)灣
衛(wèi)生署核準(zhǔn),并經(jīng)臺(tái)北 " 榮民總醫(yī)院 " 同意,進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。

臺(tái)灣科苗生物科技公司組織的一批醫(yī)學(xué)專家,經(jīng)過(guò) 12 年努力,研發(fā)出治療艾滋病的中藥配方,在德國(guó)和英國(guó)艾滋病研究中心試驗(yàn)后獲得認(rèn)可。該公司表示,如果在 6 個(gè)月內(nèi)完成臨床試驗(yàn),驗(yàn)證治療成效,即可上市。


參與研發(fā)該藥的醫(yī)師介紹說(shuō),目前治療艾滋病仍以三合一雞尾酒療法為主,但有副作用。新研發(fā)的藥品由龍葵等5種中草藥中提取特殊成份制成口服藥劑,副作用低于雞尾酒療法,治療時(shí)可降低藥物對(duì)正常細(xì)胞的損害,保護(hù)免疫系統(tǒng)。


據(jù)科苗生物科技公司介紹,新研發(fā)的中藥在德國(guó)艾滋病中心完成的動(dòng)物試驗(yàn)及人體外淋巴球試驗(yàn)顯示,使用該藥第三天可抑制 98%的艾滋病毒生長(zhǎng)的能力,第四天可以 100%抑制病毒復(fù)制,且對(duì)人體無(wú)毒。目前國(guó)際艾滋病治療權(quán)威何大一已同意加入臨床試驗(yàn)。


臺(tái)北
" 榮民總醫(yī)院 " 將利用該藥在半年內(nèi)對(duì) 60 位艾滋病毒感染者進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

中泰合作研制抗艾中藥制劑有望上市

從第六屆中泰衛(wèi)生合作聯(lián)委會(huì)會(huì)議上獲悉,由中國(guó)和泰國(guó)合作研制的一種抗艾滋病純天然藥物已通過(guò)三期臨床試驗(yàn),有望于年內(nèi)獲得泰國(guó)衛(wèi)生部頒發(fā)的批準(zhǔn)藥號(hào),并在泰國(guó)上市。


衛(wèi)生部有關(guān)負(fù)責(zé)人說(shuō),試劑的中方研究機(jī)構(gòu)
-- 中科院昆明植物研究所目前正在積極向國(guó)家藥監(jiān)部門申請(qǐng),希望通過(guò)艾滋病藥物快速審批通道,使該制劑早日在中國(guó)上市。

衛(wèi)生部常務(wù)副部長(zhǎng)高強(qiáng)在聯(lián)委會(huì)會(huì)議上說(shuō),希望中泰兩國(guó)衛(wèi)生醫(yī)藥科研人員進(jìn)一步加強(qiáng)合作,挖掘中醫(yī)藥的優(yōu)勢(shì),不斷完善研究成果,爭(zhēng)取使該藥物早日上市,造福兩國(guó)及全世界人民。


據(jù)國(guó)家中醫(yī)藥管理局國(guó)際合作司司長(zhǎng)沈志祥介紹,這種名為
" 復(fù)方 SH" 的制劑由五味中藥組方。泰國(guó)衛(wèi)生部經(jīng)過(guò) 3 次嚴(yán)格的臨床試驗(yàn)證明,該制劑能有效殺滅艾滋病病毒,使患者體內(nèi)病毒載量明顯下降,提高免疫細(xì)胞活性,增強(qiáng)人體機(jī)體免疫能力,無(wú)毒副作用。
中泰兩國(guó)近年來(lái)在衛(wèi)生醫(yī)學(xué)科學(xué)和藥品領(lǐng)域開展了卓有成效的合作。除艾滋病外,雙方的合作領(lǐng)域還涉及腫瘤藥物研究、草藥研究開發(fā)和精神衛(wèi)生等。

在 14 日上午的第六次聯(lián)委會(huì)會(huì)議上,中泰雙方?jīng)Q定,下一步將就食品與藥品進(jìn)口的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)、抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥品原料生產(chǎn)以及艾滋病和非典防治開展合作。


編輯:西門吹血

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