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【原理與解析】 (1)真核細(xì)胞的DNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi),RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。 (2)甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強(qiáng),使DNA顯現(xiàn)出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強(qiáng),使RNA呈現(xiàn)出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細(xì)胞染色,可同時(shí)顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。 (3)鹽酸的作用 ① 鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運(yùn)輸; ② 鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,便于DNA與染色劑的結(jié)合。
【注意事項(xiàng)】 1.材料的選擇 ① 選用的實(shí)驗(yàn)材料既要容易獲得,又要便于觀察; ② 常用的觀察材料由人的口腔上皮細(xì)胞、洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞(為避免原有顏色的干擾,不可使用紫色表皮細(xì)胞) 2.取材要點(diǎn) ① 取口腔上皮細(xì)胞之前,應(yīng)先漱口,以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì); ② 取洋蔥表皮細(xì)胞時(shí),盡量避免材料上帶有葉肉組織細(xì)胞。 3.沖洗載玻片時(shí)水的流速要盡量慢,切忌直接用水龍頭沖洗。 4.安全要點(diǎn) ① 用酒精燈烘烤載玻片時(shí),不要只集中于材料處,而應(yīng)將載玻片在火焰上來回移動(dòng),使載玻片均勻受熱,以免破裂; ② 烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。 5.換用高倍鏡觀察材料時(shí),只能用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行調(diào)焦,切不可動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋。
【主要步驟】(以觀察口腔上皮細(xì)胞為例) 1.取材 ① 滴: 在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液; ② 刮: 用消毒牙簽在口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下; ③ 涂: 將牙簽上的碎屑涂抹在載玻片的生理鹽水中; ④ 烘: 將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘干。 2.水解 ① 解: 將烘干的載玻片放入裝有30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸的小燒杯中,進(jìn)行材料的水解; ② 保: 將小燒杯放入裝有30℃溫水的大燒杯中保溫5分鐘。 3.沖洗涂片 ① 沖: 用緩緩的蒸餾水沖洗載玻片10秒鐘; ② 吸: 用吸水紙吸去載玻片上的水分。 4.染色 ① 染:用2滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上,染色5分鐘; ② 吸: 吸去多余染色劑; ③ 蓋: 蓋上蓋玻片。 5.觀察 ① 低: 在低倍物鏡下,尋找染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調(diào)節(jié)清晰; ② 高: 轉(zhuǎn)到高倍物鏡,調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色情況。
在"觀察DNA和RNA在細(xì)胞中分布"的實(shí)驗(yàn)中,下列說法正確的是 ( ) A.染色時(shí)先用甲基綠染液,再用吡羅紅染液 B.用8%的鹽酸目的之一是使DNA與蛋白質(zhì)分離,使DNA水解 C.酒精燈烘干載玻片,可迅速殺死細(xì)胞.防止細(xì)胞死亡時(shí)溶酶體對核酸的破壞 D.用高倍顯微鏡可以比較清楚地看到呈綠色的染色體和呈紅色的RNA分子
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