1.提取過程中，有機(jī)酸中的氫能將葉綠素中的鎂置換出來，導(dǎo)致葉綠素被破壞。加碳酸鈣的目的是為了中和酸。
2.葉綠體中的色素所處的環(huán)境具微堿性，實(shí)驗(yàn)中，由于研磨會(huì)使細(xì)胞結(jié)構(gòu)遭到破壞，細(xì)胞液（具微酸性）流出，酸性的細(xì)胞液就會(huì)直接接觸葉綠體中色素，致使葉綠素的分子結(jié)構(gòu)遭到破壞，使葉綠素失鎂，呈黃褐色，所以加入少許碳酸鈣是為了中和細(xì)胞液的酸性，可起到保護(hù)葉綠素的作用
3.實(shí)驗(yàn)步驟
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步 驟 |
注 意 問 題 |
分 析 |
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1．提取色素
5克綠葉剪碎，放入研缽，加SiO2、CaCO3和5mL丙酮（或10mL無水乙醇）迅速、充分研磨。（若沒有無水乙醇，也可用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇，但要加入適量的無水碳酸鈉，除去水分） |
加SiO2
加CaCO3
加丙酮
迅速 |
加SiO2為了研磨得更充分。
加CaCO3防止研磨時(shí)葉綠素受到破壞。因?yàn)槿~綠素含鎂，可被細(xì)胞液中的有機(jī)酸產(chǎn)生的氫代替，形成去鎂葉綠素，CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機(jī)酸，防止葉綠體被破壞。
葉綠體色素易溶于丙酮等有機(jī)溶劑。
減少研磨過程葉綠素的分解，減少有毒性的丙酮揮發(fā)。 |
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2．收集濾液
漏斗基部放一單層尼龍布，研磨倒入漏斗內(nèi)擠壓，將濾液收集到小試管中，用棉花塞塞住試管口。 |
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尼龍布起過濾作用。
試管口用棉花塞塞緊是為了防止丙酮揮發(fā)。 |
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3．制備濾紙條
將干燥的濾紙，順著紙紋剪成長(zhǎng)10cm，寬1cm的紙條，一端剪去二個(gè)角，并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。 |
干燥
順著紙紋剪成長(zhǎng)條
一端剪去二個(gè)角 |
可吸收更多的濾液。
層析時(shí)，色素分離效果好。
可使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線。 |
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4．劃濾液細(xì)線
用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線劃出細(xì)、齊、直的一條濾液細(xì)線，干后重復(fù)三次。 |
濾液細(xì)線越細(xì)、越齊越好。
重復(fù)三次。 |
防止色素帶之間部分重疊。
增加色素在濾紙上的附著量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更明顯。 |
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5．紙層析法分離色素
將3mL層析液倒入燒杯中，將濾紙條（劃線一端朝下）插入層析液中，用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。 |
層析液不能沒及濾紙條。
燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。 |
防止色素溶解在層析液中，
層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。 |
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6．觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果
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擴(kuò)散最快是胡蘿卜素，擴(kuò)散最慢是葉綠素b，含量最多的是葉綠素a |
四種色素之所以能被分離，是因?yàn)樗姆N色素隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度不同。 |
◆分別在A、B、C三個(gè)研缽加入2克減碎的新鮮菠菜葉，并按下表所示添加試劑，經(jīng)研磨得到三種不同顏色的溶液，即：深綠色、黃綠色、幾乎無色。試回答：
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處理 |
A |
B |
C |
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SiO2（少量） |
＋ |
＋ |
＋ |
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CaCO3（少量） |
－ |
＋ |
＋ |
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95%乙醇（10毫升） |
＋ |
－ |
＋ |
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蒸餾水（10毫升） |
－ |
＋ |
－ |
（1）A處理得到的溶液顏色（ ），原因（ ）
（2）B處理得到的溶液顏色（ ），原因（ ）
（3）C處理得到的溶液顏色（ ），原因（ ）
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