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>細(xì)胞核移植技術(shù)中能用受體細(xì)胞的通常有MⅡ期卵母細(xì)胞和受精卵。早期的核移植常用受精卵,后來基本上用MⅡ期卵母細(xì)胞取代了受精卵,主要是兩者的細(xì)胞質(zhì)環(huán)境不同。有人認(rèn)為重組需要的因子存在于MⅡ期卵母細(xì)胞質(zhì)中,而在受精卵形成時這些因子已被降解或用光,因此受精卵去核可引起細(xì)胞質(zhì)中重組因子缺乏。促成熟因子(MFP)是卵母細(xì)胞質(zhì)中重要的胞質(zhì)影響因子,MFP的活性在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂的MⅠ和MⅡ期達(dá)到最高,受精或激活后MFP迅速失活,因此MⅡ期卵母細(xì)胞中MFP活性高,而受精卵中MFP活性低。而MFP水平的高低可影響供體核染色質(zhì)的狀態(tài)和復(fù)制。MⅡ期卵母細(xì)胞細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)已成熟,而MⅠ期卵母細(xì)胞細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)尚未成熟,其細(xì)胞質(zhì)不能支持胚胎的全程發(fā)育,因此盡管MⅠ期卵母細(xì)胞MFP活性也高,但不能作為受體卵母細(xì)胞。也有人認(rèn)為用去核受精卵作受體時可能由于受精卵去核時一些早期發(fā)育必需的因子隨核的去除而去掉,而使受精卵缺乏發(fā)育能力。因此,目前廣泛采用MⅡQI 5卵母細(xì)胞做受體。
細(xì)胞核移植用的是處于減數(shù)第二次分裂中期的次級卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)。此時的細(xì)胞質(zhì)有助于恢復(fù)細(xì)胞核的全能性。此時所說“細(xì)胞核”實(shí)際上主要指的是核區(qū)的染色體。不能機(jī)械的理解為“細(xì)胞核結(jié)構(gòu)” |
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