胚胎的性別鑒定方法有很多種，近年來分子生物學(xué)的發(fā)展給胚胎性別鑒定帶來了技術(shù)性的革命。

（一）細(xì)胞生物學(xué)方法

利用X、Y染色體形態(tài)上的差異，通過染色體核型鑒定胚胎細(xì)胞性染色體，進(jìn)而鑒定胚胎的性別。分析性染色體需要用分裂中期的細(xì)胞，這對(duì)胚胎是一種損傷。

（二）免疫學(xué)方法

在8-細(xì)胞期至早期胚泡期，哺乳動(dòng)物的雄性胚胎表達(dá)雌性胚胎所沒有的細(xì)胞表面因子，即H-Y抗原，利用H-Y抗原和抗體免疫反應(yīng)的原理可以進(jìn)行胚胎的性別鑒定。

（三）測(cè)定卵裂球

X染色體連鎖基因劑量鑒別胚胎性別，從胚胎中取出一個(gè)卵裂球，采用雙重微量測(cè)定法，測(cè)定其與X染色體連鎖的轉(zhuǎn)移酶和與常染色體連鎖的轉(zhuǎn)移酶的活性。由于在8-細(xì)胞階段雌性胚胎中的兩條X染色體均有活性，因此可根據(jù)HPRT活性在基因劑量上的兩倍差異，鑒別出雄性和雌性胚胎。

（四）分子生物學(xué)方法

1.Y染色體特異性DNA探針

利用Y染色體特異的DNA探針與Y染色體的DNA進(jìn)行特異性結(jié)合是鑒定胚胎性別的一種方法。早在20世紀(jì)80年代就有將牛的Y染色體特異的DNA重復(fù)序列作為探針用于牛胚胎的性別鑒定的研究報(bào)道。這種方法的準(zhǔn)確率很高，特異性強(qiáng)，操作繁瑣。

2.PCR技術(shù)應(yīng)用于胚胎性別鑒定

PCR技術(shù)來進(jìn)行檢查有較高的準(zhǔn)確率，且操作簡(jiǎn)單，快速，微量。

用PCR鑒定胚胎性別的主要程序：

根據(jù)Y染色體上的性別決定基因或特異性片段設(shè)計(jì)引物，同時(shí)設(shè)計(jì)一對(duì)公母共有基因引物作為內(nèi)對(duì)照，避免假陽(yáng)性的發(fā)生；

用顯微操作或徒手從胚胎中取出幾個(gè)細(xì)胞熱處理后進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

電泳檢測(cè), 能同時(shí)擴(kuò)增出Y-染色體上相應(yīng)片段和公母共有基因片段的胚胎即為雄性胚胎，而只能擴(kuò)增出共有基因片段的胚胎即為雌性胚胎。