郭海濱,雷家軍

　　(沈陽農(nóng)業(yè)大學園藝學院,遼寧沈陽110161)

　　摘要:對葉子花(Bougainvillea glabra Choisy)莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)進行了研究,篩選出適宜的增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1,增殖系數(shù)達到4.0;最適合的生根培養(yǎng)基為MS+IBA1.0 mg·L-1,每株平均生根7.2條,根長4.2cm,側(cè)根數(shù)4.5條。以河沙為基質(zhì)進行試管苗移栽有利于葉子花的成活,25d后成活率可達78.6%。

　　關(guān)鍵詞:葉子花;莖尖;組織培養(yǎng)；

　　中圖分類號:S50353文獻標識碼:B

　?。ㄓ⑽穆裕?/p>

　　葉子花(B.glabra Chosiy)又名九重葛、寶巾、三角梅,為木質(zhì)常綠大藤本,是重要的觀賞花卉,我國各地都有栽培,喜熱怕冷,在北方主要以室內(nèi)盆栽為主。葉子花扦插不易成活,利用組織培養(yǎng)法不僅可以解決其生根難的問題,而且還能快速繁殖優(yōu)質(zhì)種苗。

　　1、材料與方法

　　1.1試驗材料

　　材料來源于沈陽農(nóng)業(yè)大學花卉基地,為紅色大花品種,在生長良好健壯、無病蟲害的優(yōu)良母株上剪取莖尖作為外植體。

　　1.2試驗方法

　　1.2.1外殖體消毒先用自來水沖洗,沖刷干凈后,用75%的酒精浸泡2～3s,后用無菌水沖洗,再用0.1%的HgCl2溶液浸泡6min,最后用無菌水沖洗5～6次。

　　1.2.2培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件

　　誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1;增殖培養(yǎng)基 MS+6-BA(0～0.5)mg·L-1+NAA(0～0.5)mg·L-1共6個組合;生根培養(yǎng)基MS+IBA(0～2.0)mg·L-1共4個組 合,在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)30d后調(diào)查生根情況。培養(yǎng)溫度為23～27℃,光照強度3000lx,光照時數(shù)12h;光質(zhì)為熒光燈;環(huán)境相對濕度為 70%～80%。

　　1.2.3煉苗移栽取苗高約3～5cm、5～6片葉的試管苗(有根或無根),先在室內(nèi)煉苗 5～6d,洗凈培養(yǎng)基,移栽到基質(zhì)中。移栽基質(zhì)為河沙,草炭:園土=3:1,蓋塑料小拱棚保溫,濕度控制在85%～90%,每天噴水1～2次,中午適當遮 蔭。10d、15d、20d、25d分別調(diào)查成活率。

　　2、結(jié)果與分析

　　2.1不同激素濃度組合對葉子花誘導(dǎo)與增殖的影響

　　不同培養(yǎng)基誘導(dǎo)愈傷組織的時間、顏色有差異,增殖系數(shù)也不同(見表1)。當6-BA濃 度<0.5 mg·L-1,苗生長較慢,形成的側(cè)芽數(shù)量少,但植株形態(tài)正常;當6-BA濃度達到0.5 mg·L-1、NAA濃度達到0.2 mg·L-1植株長勢良好,產(chǎn)生的側(cè)芽較多,增殖系數(shù)可達4.0,愈傷組織形成時間最短,為5d,并且愈傷組織量較少,葉片的形狀正常,新生的幼葉顏色偏 紅,但過幾天后轉(zhuǎn)綠,進入正常生長,生長速度快,個別生根;當6-BA為0.5 mg·L-1、NAA的濃度達到0.5 mg·L-1時組培苗出現(xiàn)玻璃化,側(cè)芽少,愈傷組織多,有的甚至生長到培養(yǎng)基的表面上,苗比較細弱。可見愈傷組織的多少在一定程度上影響著苗的長勢。葉子 花在增殖培養(yǎng)過程中,產(chǎn)生的愈傷組織較疏松,顏色較淺。MS+6-BA0.5+NAA0.2為葉子花增殖最適合的培養(yǎng)基。

表1不同濃度激素處理對葉子花外植體愈傷組織誘導(dǎo)與增殖的影響

下載 (35.02 KB)

2008-11-6 00:04

　　2.2不同IBA濃度對葉子花生根的影響

　　葉子花個別植株在增殖培養(yǎng)基中就有生根發(fā)生,出現(xiàn)的根有兩種情況,即皮部生根和愈傷組織生 根。皮部生根有利于試管苗移栽成活,另外,試管苗生根的好壞主要體現(xiàn)在根系的質(zhì)量(粗度、長度)和根系的數(shù)量兩個方面。不僅要求不定根比較粗壯,更重要的 是要有較多的毛細根,以擴大根系的吸收面積,增強根系的吸收能力,提高移栽成活率。MS+IBA1.0為最適合葉子花的生根培養(yǎng)基。

表2不同IBA濃度對葉子花生根的影響

下載 (21.97 KB)

2008-11-6 00:04

　　2.3不同基質(zhì)對葉子花移栽成活的影響

　　由圖1可知,河沙作為移栽基質(zhì)較合適,25d后移栽成活率達78.6%,明顯高于草炭+田 園土。由于草炭+田園土的保水能力太強,幼苗長時間處于高濕缺氧的條件下,組培苗從基部向上腐爛,導(dǎo)致苗大量死亡。在河沙中,組培苗移栽成活率較高,這可 能是由于河沙具有一定的保水能力,且透氣性較好。但在15d左右時葉片發(fā)黃,變褐脫落,并且無根苗開始死亡。而后,情況逐漸好轉(zhuǎn),25d左右根系生長良 好。移栽半年后,組培苗就可開花。

圖1不同基質(zhì)對葉子花扦插成活率的影響

下載 (22.86 KB)

2008-11-6 00:04

　　3、討論

　　在增殖過程中,不同培養(yǎng)基中均有愈傷組織的出現(xiàn),顏色多為黃綠色和綠色,并且很疏松,愈傷組織越多,越不利于葉子花組培苗的生長。這樣的愈傷組織能否進一步誘導(dǎo)分化出苗還有待于進一步研究。

　　葉子花試管苗容易出現(xiàn)玻璃化,主要表現(xiàn)為葉片呈水浸狀,葉色變深,部分葉片變紅,畸形,嚴 重時下部葉片變黑脫落。適當增加瓊脂含量,減少培養(yǎng)基中的游離水,從而降低培養(yǎng)瓶內(nèi)的濕度,能使玻璃化苗的比率降低;適當降低細胞分裂素的用量;加大光照 強度;適當縮短每次的繼代時間;降低培養(yǎng)瓶植株的密度,均可有效的控制玻璃化。

　　參考文獻

　　[1]李師翁.葉子花的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].植物生理學通訊,2000,36(3):230

　　[2]范小峰.葉子花扦插繁殖技術(shù)研究[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學學報,2003,(12):442～445

　　[3]Sharama,A.K.,et al.Clo ne Prop agatio n ofBo ugainvillea Glabra‘Magnifica’Tro ugh Shoot ApexCult ure.Plant Cell Tis sue Or gan Cult ure,1981,(1):33～38

下載 (18.45 KB)

2008-11-6 00:04