事實證實，在科學飛速發(fā)展的今天，無論從事哪個領域的研究，要想突破，除了有良好的理論基礎外，更重要的是依靠于先進的技術和優(yōu)良的儀器設備以及良好的研究環(huán)境。一個標準的分子生物學實驗室除了具有一般生物學實驗室的常規(guī)儀器設備外，還具有一些特殊用途的儀器，這些儀器一般較精密，價格昂貴。下面先容這些儀器的使用方法和留意事項。

一、冷凍離心機

低溫分離技術是分子生物學研究中必不可少的手段。基因片斷的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實驗中都離不開低溫離心技術，因此低溫冷凍離心機成為分子生物學研究中必備的重要儀器。在國內，有多個廠家生產冷凍離心機，本實驗室的高速冷凍離心機為GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。配有角式轉頭：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。極限轉速20000rpm。

1. 安裝與調試

離心機應放置在水平堅固的地面上，應至少間隔10cm以上且具有良好的透風環(huán)境中，四周空氣應呈中性，且無導電性灰塵、易燃氣體和腐蝕性氣體，環(huán)境溫度應在0～30℃之間，相對濕度小于80%。試轉前應先打開蓋門，用手盤動轉軸，輕巧靈活，無異常現象方可上所用的轉頭。轉子正確到位后打開電源開關，然后用手按住門開關，再按運轉鍵，轉動后立即停止，并觀察轉軸的轉向，若逆時針旋轉即為正確，機器可投進使用。

2. 操縱程序

（1）插上電源，待機指示燈亮；打開電源開關，調速與定時系統(tǒng)的數碼管顯示的閃爍數字為機器工作轉速的出廠設定，溫控系統(tǒng)的數碼管顯示此時離心腔的溫度。

（2）設定機器的工作參數，如工作溫度，運轉時間，工作轉速等。

（3）將預先平衡好的樣品放置于轉頭樣品架上，封閉機蓋。

（4）按控制面板的運轉鍵，離心機開始運轉。在預先設定的加速時間內，其運速升 至預先設定的值。

（5）在預先設定的運轉時間內（不包括減速時間），離心機開始減速，其轉速在預先設定的減速時間內降至零。

（6）按控制面板上的停止鍵，數碼管顯示dedT，數秒鐘后即顯示閃爍的轉速值，這時機器已預備好下一次工作。

3. 留意事項

（1）離心機應始終處于水平位置，外接電源系統(tǒng)的電壓要匹配，并要求有良好的接地線，機器不使用，要拔掉電源插頭。

（2）開機前應檢查轉頭安裝是否牢固，機腔中有無異物掉進。

（3）樣品應預先平衡，使用離心筒離心時離心筒與樣品應同時平衡。

（4）揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時，應使用帶蓋的離心管，并確保液體不過漏以免腐蝕機腔或造成事故。

（5）除工作溫度、運轉速度和運轉時間外，不要隨意更改機器的工作參數，以免影響機器性能。轉速設定不得超過最高轉速，以確保機器安全運轉。

（6）使用中如出現0.00或其它數字，機器不運轉，應關機斷電，10秒鐘后重新開機，待所設轉速顯示后，再按運轉鍵，機器將照常運轉。

（7）不得在機器運轉過程中或轉子未停穩(wěn)的情況下打開蓋門，以免發(fā)生事故。

（8）每次操縱完畢應做好使用情況記錄，并定期對機器各項性能進行檢驗。

二、電泳儀

電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳大類，自由界面電泳不需支持物，如等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。區(qū)帶電泳需用各種類型的物質作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠?DG薄層等，分子生物學實驗中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。應用電泳法可以對不同物質進行定性或定量分析，或將一定混合物進行組份分析或單個組份提取制備。下面以DYY-12型電腦三恒多用電泳儀（北京六一儀器廠）為例先容其使用方法。

1.使用方法

（1）按電源開關，顯示屏出現“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀…”等字樣后，同時系統(tǒng)初始化，蜂叫4聲，設置常設置。屏幕轉成參數設置狀態(tài)，見圖一：

U: 0V U＝ 100V ｜ Mode： STD I: 0mA I ＝ 50mA ｜ P: 0W P＝ 50W ｜ T: 00:00 T＝ 01:00 ｜

其中:左側大寫U: I: P: T: 為電泳時實際值；中間部分顯示程序的常設值（預置值）。Mode(模式)：STD(標準)；TIME(定時)；VH（伏時）；STEP（分步）

（2）設置工作程序。用鍵盤輸進新的工作程序。例如，要求工作電壓U＝1000V，電流I限制在200mA以內，功率W限制在100W以內，時間T為3小時20分，并且到時間自動關掉輸出。則操縱步驟如下：

①按“模式”鍵，將工作模式由標準（STD）轉為定時（TIME）

模式。每按一下模式鍵，其工作方式按下列順序改變： STD®TIME®VH®STEP®STD。

②先設置電壓U，按“選擇”鍵，先將其反顯，然后輸進數字鍵即可設置該參數的數值。按數字1000,則電壓即設置完成。

③設置電流I，按“選擇”鍵，先使I反顯，然后輸進數字200。

④設置功率P，按“選擇”鍵，先使P反顯，然后輸進數字100。

⑤設置時間T，按“選擇”鍵，先使T反顯，然后輸進數字320。假如輸進錯誤，可以按“清除”鍵，再重新輸進。

⑥確認各參數無誤后，按“啟動”鍵，啟動電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態(tài)欄中顯示Start! 并蜂叫4聲，提醒操縱者電泳儀將輸出高電壓，留意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設置值。同時在狀態(tài)欄中顯示“Run”，并有兩個不斷閃爍的高壓符號，表示端口已有電壓輸出。在狀態(tài)欄最下方，顯示實際的工作時間（精確到秒）。

⑦每次啟動輸出時，儀器自動將此時的設置數值存進“MO”號存儲單元。以后需要調用時可以按“讀取”鍵，再按“0”鍵，按“確定”鍵，即可將上次設置的工作程序取出執(zhí)行。

⑧電泳結束，儀器顯示：“END”，并連續(xù)蜂叫提醒。此時按任一鍵可止叫。

2.留意事項

(1)U、I、P三個參數的有效輸進范圍是：U：5～3000V；I： 4～400mA；P：4～400W.

(2)一般情況下，當No Load！時，首先應關機檢查電極導線與電泳槽之間是否有接觸不良的地方，可以用萬用表的歐姆檔逐段丈量。

(3)假如輸出端接多個電泳槽，則儀器顯示的電流數值為各槽電流之和，此時應選擇穩(wěn)壓輸出，以減小各槽的相互影響。

(4)留意保持儀器的清潔，不要遮擋儀器后方進風通道。嚴禁將電泳槽放在儀器頂部，避免緩沖液灑進儀器內部。

(5)本儀器輸出電壓較高，使用中應不避免接觸輸出回路及電泳槽內部，以免發(fā)生危險。

(6）長期不用儀器，應放置在干燥透風的清潔環(huán)境中保存。

三、分析天平

分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要儀器，充分了解儀器性能及熟練把握其使用方法，是獲得可靠分析結果的保證。分析天平的種類很多，有普通分析天平、半自動/全自動電光分析天平及電子分析天同等。目前實驗室常規(guī)備用的是自動化程度較高的電子分析天平。下面先容電子分析天平 PL203/01型和AL104/01型 (METTLER-TOLEDO)的性能及使用方法。PL203/01型精密電子天平：最大稱量210g；實際分度值0.001g；AL104/01型高分辨率電子分析天平：最大稱量110g；實際分度值0.0001g

1. 使用方法

（1）檢查并調整天平至水平位置。檢查電源電壓是否匹配（使用配置的穩(wěn)壓器），按天平儀器要求通電預熱至所需時間30min 。

（2）打開天平開關“on”，天平則自動進行靈敏度及零點調節(jié)。待顯示屏上所有字段短時點亮，天平回零時，可進行正式稱量。

（3）稱量時將潔凈稱量瓶或稱量紙置于稱盤上，關上側門，天平將顯示該重量，點擊“®O/T¬”鍵自動校對零，然后逐漸加進待稱物質，直至所需重量為止。

（4）稱量結束應及時除往稱量瓶（紙），關上側門，切斷電源，并做好使用情況登記。

2. 留意事項

（1）天平應放置在牢固平穩(wěn)水泥臺或木臺上，室內要求清潔、干燥，同時應避免光線直接照射到天平上。

（2）稱量時應從側門取放物質，讀數時應封閉箱門以免空氣活動引起天平擺動。

（3）揮發(fā)性、腐蝕性、強酸強堿類物質應盛于帶蓋稱量瓶內稱量，防止腐蝕天平。

（4）電子分析天平若長時間不使用，則應定時通電預熱，每周一次，每次預熱2h，以確保儀器始終處于良好使用狀態(tài)。

四、分光光度計

不同物質對不同波長進射的吸收程度各不相同，從而形成各具特征的吸收光譜 。根據這一原理，應用比色法可以對某些有色物質進行定性或定量分析。但由于比色法僅限于可見光區(qū)，而且精度低，已遠遠不能滿足高精度微量分析的要求。隨著科學技術不斷發(fā)展，分析儀器也不斷地更新換代，人們引進了分光光度法的概念，分光光度計隨之應用。分光光度計由光源、單色器、吸收池、接受器、顯示屏幕所組成，它不僅適應于可見光區(qū)，同時還擴展至紫外光區(qū)及紅外光區(qū)。光密度（OD）是很多溶液中的溶質定量的指標之一，通過所產生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值。分子生物學實驗中常使用紫外分光光度計進行核酸溶液定量和純度的初步判定。下面先容紫外可見光分光光度計GeneQantTM Pro（Amersham）的使用方法。該儀器除了能檢測核酸樣品濃度外，還可進行蛋白質濃度以及細胞培養(yǎng)液濃度的測定，能檢測低至幾微升樣品（70µl和5～7µl），樣品無需稀釋，丈量后還可全部回收。

使用方法

(1）打開電源開關（ON），等待數秒鐘，顯示屏上顯示一系列數據，如本機型號、當前日期等，這些數據可以重新設置，當出現“instrument Ready”即可進進下一程序。

(2）在儀器面板上有很多功能鍵，其中包括檢測base sep 、Tm、DNA、RNA、oligo、Protein595assay、Protein280 meas、cell culture等。例如，欲檢測DNA， 按DNA鍵，即進進DNA檢測程序。在顯示屏上：

Pathlengh 10mm

Units µg/µl

Use 320nm NO

Dilution Faotor 1

Insert reference,

以上為儀器預設置的參考數據，若按“enter”鍵，和“select”鍵可以將以上的參數進行重新設定。

(3）取石英樣品杯70µl或5～7µl ，容量大小根據需要。先用吸管吸高純水進樣品杯中，然后放進儀器上的樣品槽中，放進時留意樣品杯的光學面朝前方。

(4)按“set ref”鍵，進行空缺測試。顯示屏上出現一系列數據均“0.000”并提示插進樣品“Insert sample ”。將樣品杯取出，吸干水分，稍干燥后，同樣吸進待測樣品，放進樣品槽中進行測定。

(5）一個樣品測定完畢，按“stop”鍵，返回“Instrument Ready”。

(6）取出樣品杯，吸出樣品，然后用高純水洗幾次，自然晾干。由于樣品杯十分昂貴，使用時要小心操縱。不能用手指拿樣品杯的光學面，用后要及時洗滌，可用溫水或稀鹽酸，乙醇以至鉻酸洗液（濃酸中浸泡不要超過15分鐘），表面只能用柔軟的絨布或拭鏡頭紙擦凈。

五、數字式酸度計

酸度計是實驗室配置溶液必備的儀器。本實驗室的酸度計為臺式微電腦酸堿度計和溫度計（Hanna）,丈量pH范圍為0.00～14.00pH；溫度為0.0～100.0℃；

1. 使用方法

（1）將pH電極和溫度探頭與主機連接，主機與電源連接。

（2）取出電極保護套，假如有結晶鹽出現，這是電極常見現象，浸進水后就會消逝。假如薄膜玻璃或透析膜發(fā)干，可在HI170300電極保存液中浸泡1小時。

（3）pH校準。將pH電極和溫度探棒浸泡在所選的標準緩沖液內4cm（建議用pH6.86、7.01），緩沖液值可通過“D℃”或“Ñ℃”鍵來調節(jié)。按“CAL”鍵，儀器將顯示“CAL”和“BUF”符號及“7.01”數據。當讀數不穩(wěn)定時，屏幕會顯示“NOTREADY”；當讀數穩(wěn)定時，屏幕會顯示“READY”和“CFM”，按“CFM”鍵確認校準值。確認第一校準點后，將pH電極與溫度探棒浸泡在標準緩沖液內4cm（建議用pH4.01、9.18、10.01）；再按“CAL”鍵，儀器將顯示“CAL”和“BUF”符號及“4.01”數據。按“CFM”鍵確認校正值。

（4）pH丈量。校準完畢后，儀器自動進進pH丈量狀態(tài)，將電極與溫度探棒浸泡在待測溶液約4cm，停幾分鐘讓電極讀數穩(wěn)定。

2. 留意事項

（1）由于pH211酸度計內裝有可充電電池，在剛購買或長時間放置后，再使用時，通電校正丈量完畢后，可將電源繼續(xù)還插進電源插座，只需封閉開關，這樣可以保證電池充電，是校正值得以儲存，下次丈量時無須校正即可進進精確丈量。

（2）不可用蒸餾水、往離子水和純水浸泡電極。假如讀數偏差太大（±1pH），則是由于沒有校正或電極變干。為避免電極受損，在關機前要將pH電極從溶液中拿出。當處于關機狀態(tài)時，在電極浸進電極保存液前，電極要與機器分開。

（3）如儀器已測過幾種不同的樣品溶液，請用自來水清洗，或在插進樣品溶液前，用待測樣品清洗電極。

（4）溫度會影響pH的讀數，為丈量正確的pH值，溫度要在適合的范圍內進行自動溫度補償，用HI7669/2W溫度探棒浸進樣品中，緊靠電極并停幾分鐘，假如被測溶液的溫度已知或丈量是在相同溫度下進行，只需動手補償，那么此時溫度探棒是不用連接，屏幕上會顯示溫度讀數伴有℃信號閃爍。溫度可通過“Ñ℃”或“D℃”來調節(jié)。

六、PCR儀

PCR儀，也稱DNA熱循環(huán)儀、基因擴增儀，它是使一對寡核苷酸引物結合到正負DNA鏈上的靶序列兩側，從而酶促合成拷貝數為百萬倍的靶序列DNA片斷，它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進行DNA變性、引物復性、DNA聚合酶催化的延伸反應的三個過程。

PCR儀主要應用于基礎研究和應用研究等很多領域，如基因分析、序列分析、進化分析、臨床診斷、法醫(yī)學等等。隨著分子生物學的不斷發(fā)展，PCR擴增技術也得到普及推廣應用，因此了解PCR儀的性能，熟練把握儀器的正確使用方法及使用過程中的留意事項，將是十分必要的。

現先容PCR 擴增儀（Tl Thermocycler）的使用方法和留意事項。

1. 使用方法

(1）接通電源開關，儀器進進預備狀態(tài)；在顯示屏上記錄了當前儀器的溫度和蓋子（Lid）的溫度。若儀器正在運行時，須按“ B ”鍵（start/stop），才能退出運行并返回預備狀態(tài)。

(2）編寫程序段。在預備狀態(tài)下按“ C ”鍵(programs)進進編程狀態(tài)，選定一程序號，然后按“enter”鍵，進進下一程序；按 “A”(list)鍵后，選一文件號（empty program）；再按“enter”鍵，進進下一程序；按“ABC”鍵，進進下一程序，用上下左右鍵號選擇一個字母（A、B、C、D、…），然后按“enter”鍵，進進下一程序；按“name ok”鍵，完成文件命名。

(3）設定蓋子的溫度。“lid temp： ℃”，蓋子的溫度一般比變性溫度要高10℃，例如變性溫度是95℃，那么蓋子的溫度就要設定為105℃。待蓋子預熱后按“enter”鍵，進進下一程序。